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1、南京師范大學(xué)碩士學(xué)位論文靶向乳腺癌的增殖腺病毒載體的研究姓名：胡小翠申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師：蘇長青曹祥榮2009南京師范大學(xué)碩士學(xué)位論文IIABSTRACTOncolyticadenovirusesarecurrentlybeingdevelopedasanticancerbiologicalagents.Creatinganarmedtherapeuticviralplatfmwherethelyticproper
2、tyofviralinfectioncoupledtoviralmediatedtransgenedeliverymayenhanceviralbasedtherapeuticpotential.Asoncolyticadenovirusspecificallyproliferatingreplicatingintumcellstheanticancergenesmayhaveasubstantialincreaseincopyitse
3、xpressionlevelmayrisehundredsoftimesconsequentlyachievethepurposeofkillthetumcells.InthisresearchamodifiedbreastcancerspecificpromotermHerDF3wasclonedusedtodrivetheexpressionofmutatedE1A(whichwasdtheCR2regionlosttheabili
4、tyofcombiningwithRb)mutatedE1B(whoseE1B55KDwasdefectivelosttheabilityofbindingtop53).HereatumspecificreplicativevectpSCQwasconstructedinwhichthemutatedE1AE1BwascontrolledbymHerDF3promoterthenpSCQhIL24wasconstructedbyingt
5、hehIL24geneintopSCQ.TherecombinantadenoviruseswerepackedinHEK293namedAdSCQAdSCQhIL24respectively.TheadenoviruseswereidentifiedbyPCRtheninfecteddifferentcelllines.TheivereplicationofAdSCQAdSCQhIL24intumcellswasinvestigate
6、dbyvirusproliferativetestWesternblotassayCPEassaywhileinnmalcellswasnotobvious.TheseresultsindicatedthatanovelcancerivegenetherapeuticoncolyticadenovirusvectsystemnamedAdSCQwasconstructedwhichcanivelyreplicateexpressther
7、apeuticgenesincancercells.Itisapromisingsystemftargetedcancergenetherapy.InadditionweconstructedarecombinantprokaryoticexpressionvectofhIL24expleditsproperinducingconditions.Allthewksarehelpfulfitsexpressionpurificationf
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