地塞米松對(duì)宮頸癌裸鼠移植瘤生長(zhǎng)及凋亡的影響.pdf

1、子宮頸癌是威脅女性生命的第二大惡性疾病，是婦科最常見的惡性腫瘤，近年來(lái)有年輕化的趨勢(shì)，已經(jīng)成為的重大社會(huì)問(wèn)題。宮頸癌最常用的治療手段是手術(shù)和放療，綜合治療是宮頸癌治療的新趨勢(shì)，化療聯(lián)合放療、化療聯(lián)合手術(shù)、放療聯(lián)合手術(shù)等形式治療越來(lái)越多的用于臨床。 糖皮質(zhì)激素是由腎上腺皮質(zhì)束狀帶分泌的重要類固醇類內(nèi)分泌激素，有重要的生理學(xué)作用，主要影響糖和蛋白質(zhì)代謝，具有調(diào)節(jié)生長(zhǎng)、發(fā)育、分化以及內(nèi)環(huán)穩(wěn)境定的重要功能，對(duì)幾乎所有細(xì)胞的生長(zhǎng)及分化都有

2、調(diào)節(jié)作用，對(duì)許多組織來(lái)源的腫瘤細(xì)胞均有增殖抑制作用和誘導(dǎo)分化作用。地塞米松作為糖皮質(zhì)激素的代表藥物，廣泛應(yīng)用于臨床。在惡性腫瘤的藥物治療中，地塞米松往往作為減輕化療的胃腸道反應(yīng)的輔助藥物，以減少止吐藥的應(yīng)用，而對(duì)地塞米松的抗腫瘤作用還沒有充分的認(rèn)識(shí)，沒有引起大家足夠的重視。體外研究已證明：地塞米松可誘導(dǎo)人宮頸癌細(xì)胞株HeLa細(xì)胞凋亡，對(duì)卵巢癌3A0細(xì)胞、乳腺癌MCF-7細(xì)胞有明顯增殖抑制作用，還能抑制骨髓瘤細(xì)胞、人肝癌細(xì)胞系SMMC-7

3、721細(xì)胞、卵巢癌HO-8910細(xì)胞、肝癌細(xì)胞系H22細(xì)胞增殖，同時(shí)，地塞米松能抑制小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，誘導(dǎo)胸腺細(xì)胞凋亡。 體內(nèi)研究表明：地塞米松對(duì)小鼠進(jìn)展期肺腺癌有抗腫瘤作用，灌喂大劑量地塞米松(12mg/kg)可抑制小鼠前胃鱗狀上皮的增生、癌變，對(duì)小鼠前胃磷狀上皮癌有抑癌作用；大劑量地塞米松有加強(qiáng)順鉑抗小鼠埃利希氏腹水癌作用。地塞米松還抑制小鼠肝癌細(xì)胞系H22腫瘤組織VEGF-mRNA的表達(dá)及微血管生成，給小鼠H22腫瘤瘤

4、模型腹腔注射地塞米松，給藥組的瘤重和最終瘤體積與對(duì)照組比較顯著減小，顯著抑制體內(nèi)H22腫瘤的生長(zhǎng)。 綜合以上文獻(xiàn)依據(jù)，本課題嘗試進(jìn)行了以下兩部分研究： 第一部分：建立裸鼠宮頸癌移植瘤模型，在不同給藥時(shí)間、用不同劑量的地塞米松經(jīng)腹腔注入裸鼠體內(nèi)，通過(guò)觀察腫瘤生長(zhǎng)情況以及測(cè)定腫瘤的體積，從而了解地塞米松對(duì)裸鼠宮頸癌移植瘤生長(zhǎng)的影響。 第二部分：在第一部分的基礎(chǔ)上，獲取腫瘤組織，電鏡觀察腫瘤的凋亡小體及對(duì)腫瘤進(jìn)行原位細(xì)

5、胞凋亡檢測(cè)，初步探討地塞米松影響體內(nèi)宮頸癌移植瘤生長(zhǎng)的機(jī)制，為臨床使用地塞米松治療宮頸癌提供科學(xué)的理論依據(jù)。 第一部分地塞米松對(duì)宮頸癌生長(zhǎng)的影響。 目的：探討不同給藥時(shí)間、不同劑量地塞米松對(duì)宮頸癌Hela細(xì)胞裸鼠移植瘤生長(zhǎng)的影響。 方法：建立BALB/c裸鼠宮頸癌皮下移植瘤模型：(1)不同給藥時(shí)間(Hela細(xì)胞接種后第6天和第16天)開始經(jīng)腹腔內(nèi)注射相同劑量地塞米松(15mg·kg<'-1>·d<'-1>)； (

6、2)腫瘤長(zhǎng)大后(接種后16 d)每d腹腔內(nèi)注射不同劑量地塞米松(15 mg·kg<'-1>·d<'-1>～250 mg·kg<'-1>·d<'-1>五組)，連用10天，測(cè)量治療后腫瘤直徑，計(jì)算腫瘤體積及抑瘤率。 結(jié)果：(1)不同給藥時(shí)間、不同劑量地塞米松體內(nèi)注射均影響宮頸癌Hela細(xì)胞裸鼠移植瘤生長(zhǎng)，治療組體積均小于對(duì)照組(P<0.01)； (2)不同時(shí)間注射地塞米松，腫瘤的體積大小有差異(P<0.01)，早期注射抑瘤率高(94

7、.36％)，晚期注射抑瘤率低(53.57％)；(3)不同劑量地塞米松體內(nèi)注射影響宮頸癌Hela細(xì)胞裸鼠移植瘤生長(zhǎng)有差異，體積均小于對(duì)照組(P<0.001)，抑瘤率為53.57％～73.99％： 當(dāng)劑量小于62.5 mg·kg<'-1>·d<'-1>時(shí)，腫瘤體積隨劑量增加而逐漸減小，各組間有明顯差異(P<0.001)；2)劑量為62.5 mg·kg<'-1>·d<'-1>～125 mg·kg<'-1>·d<'-1>時(shí)，腫瘤體積最

8、小(0.38 cm<'3>±0.04 cm<'3>～0.40 cm<'3>±0.01 cm<'3>，對(duì)照組1.47 cm<'3>±0.03 cm<'3>)，組間比較無(wú)差異(P>0.05)；3)當(dāng)劑量超過(guò)125 mg·kg<'-1>·d<'-1>時(shí)，腫瘤體積隨劑量增加而增大，組間比較有明顯差異(P<0.001)，與對(duì)照組比較亦有明顯差異，腫瘤體積小于對(duì)照組(P<0.001)。 結(jié)論：(1)不同時(shí)間、不同劑量地塞米松體內(nèi)注射均能抑制

9、腫瘤生長(zhǎng)；(2)不同時(shí)間注射地塞米松對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的影響有差異，存在時(shí)間依從性： (3)地塞米松抑制腫瘤生長(zhǎng)的效應(yīng)與劑量密切相關(guān)。 第二部分地塞米松對(duì)宮頸癌凋亡的影響。 目的：探討不同給藥時(shí)間、不同劑量地塞米松對(duì)宮頸癌Hela細(xì)胞裸鼠移植瘤凋亡的影響。 方法：在第一部分的基礎(chǔ)上，于地塞米松用藥結(jié)束后，取腫瘤組織進(jìn)行透射電鏡觀察及原位細(xì)胞凋亡檢測(cè)凋亡小體數(shù)目。 結(jié)果：(1)不同給藥時(shí)間、不同劑量地塞米松體內(nèi)注射

10、均誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡； (2)不同時(shí)間地塞米松體內(nèi)注射對(duì)腫瘤細(xì)胞凋亡的影響有差異(p<0.01)：早期注射電鏡下凋亡小體明顯，TUNEL檢測(cè)凋亡小體數(shù)目較多；晚期注射只有早期凋亡表現(xiàn)，TUNEL檢測(cè)凋亡小體數(shù)目較少，組間比較有顯著性差異(P<0.01)；(3)不同劑量地塞米松體內(nèi)注射均誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡有差異，與對(duì)照組相比凋亡小體增多(P<0.001)：1)當(dāng)劑量小于62.5 mg·kg<'-1>·d<'-1>時(shí)，凋亡小體隨劑量增加而逐漸增

11、多，各組間有明顯差異(P<0.001)；2)劑量為62.5 mg·kg<'-1>·d<'-1>～125mg·kg<'-1>·d<'-1>時(shí)，電鏡下凋亡小體最明顯，TUNEL檢測(cè)凋亡小體數(shù)目最多(413±87.26～400±100.71，對(duì)照組160±101.35)，組間比較無(wú)差異(P>0.05)；3)當(dāng)劑量超過(guò)125 mg·kg<'-1>·d<'-1>時(shí)，凋亡小體則逐漸減少，組間比較有明顯差異(P<0.001)，與對(duì)照組比較亦有明顯差異