靶向人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶（hTERT）RNA干擾的建立及其生物學(xué)效應(yīng)的研究.pdf

1、 具有活性的端粒酶由一個RNA亞基和幾個蛋白組份構(gòu)成。RNA亞基(hTR)含有端粒DNA復(fù)制的模板。蛋白組分包括具有催化活性的端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)和端粒酶相關(guān)蛋白1(hTEP1)。hTR和hTEP1在很多正常人組織中都有表達(dá)，而hTERT則表達(dá)于細(xì)胞永生化過程中具有端粒酶活性的細(xì)胞中，在細(xì)胞的癌變過程中起關(guān)鍵作用。近來，越來越多的研究表明，hTERT的功能除了維持端粒的結(jié)構(gòu)外，還可以通過與其他分子相互作用而發(fā)揮不同的生物學(xué)

2、功能?！?為進(jìn)一步研究hTERT的新的生物學(xué)功能，發(fā)現(xiàn)與之相互作用的相關(guān)分子，我們應(yīng)用RNA干擾(RNAi)技術(shù)抑制HepG2細(xì)胞hTERT的表達(dá)，觀察HepG2細(xì)胞的生物學(xué)特性如細(xì)胞凋亡，生長速度的改變；檢測了凋亡通路中幾個重要蛋白的表達(dá)水平以探討hTERT抑制誘導(dǎo)凋亡發(fā)生的機(jī)制；同時(shí)研究了p53的表達(dá)對hTERT的調(diào)節(jié)作用。　　siRNA能顯著抑制hTERT的表達(dá)，其抑制效率與靶基因mRNA的二級結(jié)構(gòu)有關(guān)。hTERT表達(dá)下調(diào)能