免疫性血小板減少癥患者IL-18及IL-18受體的研究.pdf

1、免疫性血小板減少癥(idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)是一種自身免疫性出血性疾病,該病特點(diǎn)是患者體內(nèi)抗血小板抗體增多,血小板破壞過(guò)多而出血。其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,可能涉及T細(xì)胞、B細(xì)胞、巨核細(xì)胞、細(xì)胞因子、轉(zhuǎn)錄因子等多因素錯(cuò)綜復(fù)雜的關(guān)系,尤其是T細(xì)胞免疫在巨核細(xì)胞受抑和血小板破壞中發(fā)揮了關(guān)鍵性作用。早期研究的重點(diǎn)多集中于體液免疫異常,證明了血小板特異性抗體與血小板抗原結(jié)合后,致敏的血小板通過(guò)Fc受

2、體被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬破壞(特別是脾臟中的單核吞噬細(xì)胞),從而引起血小板的減少。目前,隨著研究的逐步深人多轉(zhuǎn)向于細(xì)胞免疫異常,許多研究涉及到B7/CD28/CTLA-4和CD40/CD40L的共刺激信號(hào),誘發(fā)了ITP患者Th1類細(xì)胞的過(guò)度極化。大多數(shù)觀點(diǎn)認(rèn)為Th1過(guò)度極化是導(dǎo)致ITP發(fā)生的重要機(jī)制[1,2],但也有相反或不一致的報(bào)道。當(dāng)前ITP發(fā)病機(jī)制的焦點(diǎn)集中于Th1/Th2細(xì)胞之間的失衡,白介素18(IL-18)作為T細(xì)胞炎性介質(zhì)強(qiáng)有

3、力的誘導(dǎo)者,通過(guò)刺激Th1型反應(yīng),誘導(dǎo)嚴(yán)重的免疫紊亂。本研究通過(guò)檢測(cè)Th細(xì)胞的上游基因T-bet(T-boxexpressed in cells)和GATA-3(GATA binding protein-3)在ITP患者中的表達(dá),首次利用T-bet/GATA-3作為ITP患者Th1/Th2細(xì)胞失衡的敏感指標(biāo),驗(yàn)證了Th1類細(xì)胞因子在該病中的優(yōu)勢(shì)應(yīng)答,并首次報(bào)道IL-18及IL-18R在其發(fā)病及治療觀察中的作用。
　　 研究目的:

4、通過(guò)檢測(cè)新診斷的ITP患者用藥前后外周血白介素18(IL-18)和CD+3細(xì)胞表面IL-18受體α鏈(IL-18Rα)的表達(dá),外周血單個(gè)核細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄因子T-bet和GATA-3mRNA的表達(dá)；探討IL-18及IL-18R在ITP患者Th1類細(xì)胞因子優(yōu)勢(shì)應(yīng)答中的作用及發(fā)病中的效應(yīng)機(jī)制。
　　 研究方法:以山東大學(xué)齊魯醫(yī)院門診及住院治療的18例新診斷的ITP為研究對(duì)象,應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcriptas

5、e polvmerase chain reaction,RTPCR)檢測(cè)患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中Th細(xì)胞上游基因T-betmRNA和GATA-3mRNA的表達(dá)；應(yīng)用ELISA檢測(cè)血漿中IL-18的變化；應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD3+細(xì)胞和總淋巴細(xì)胞表面IL-18R的表達(dá)；正常對(duì)照均為與試驗(yàn)組匹配的健康志愿者。
　　 主要結(jié)果:新診斷的ITP患者血漿中I

6、L-18的含量為(468.57±141.62)pg/ml,顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；CD3+細(xì)胞表面及淋巴細(xì)胞表面IL-18Rα的表達(dá)分別為(8.50±3.16)％和(9.16±2.98)％,兩者之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但兩者均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；PBMCs中IL-18mRNA、T-betmRNA和GATA-3mRNA的表達(dá)分別為0.12±0.02、0.07±0.02和0.0039±0.0014,IL-18mRNA和T-be

7、tmRNA顯著高于對(duì)照組(RR=1.66和3.65,P<0.05),而GATA-3mRNA顯著低于對(duì)照組(下調(diào)至正常對(duì)照的0.69倍,P<0.05),T-bet/GATA-3比例顯著增高。ITP緩解期T-betmRNA與GATA-3mRNA表達(dá)水平與正常對(duì)照比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),T-bet/GATA-3基本恢復(fù)正常；血漿中IL-18和CD3+細(xì)胞表面IL-18R的表達(dá)也基本恢復(fù)正常。
　　 結(jié)論:IL-18與ITP