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1、分類號(hào):$8582826592密級(jí):無(wú)y932437單位代碼:1D193學(xué)號(hào);2003202嘻敞居案巖獸碩士學(xué)位論文豬圓環(huán)病毒2型吉林株的分離與鑒定及ORF2基因序列分析IsolationandIdentificationofPorcineCircovirusType2IsolatedinJilinProvinceandSequenceAnalysisofORF2Gene研究生:崔瞳垡指導(dǎo)專業(yè)研究所在教師:蛆掛堂煎援名稱:亟墮盞醫(yī)堂方向
2、:動(dòng)物痘至生學(xué)院:一動(dòng)麴抖鹽堂睦2006年6月IsolationandIdentificationofPorcineCircovirusType2IsolatedinJilinProvinceandSequenceAnalysisofORF2GeneAbstractAccordingtothepublishedgenesequenceofporcinecircovirus(Pcv)fromGenbank,apairofprimerspe
3、cifictoporcinecircovirustype2(PCV2)weredesignedandsynthesizedLymphnodesandspleenofaswinesuspectedPMWSbrokeoutinsomeporcinefarminJilinprovinceweredetectedbypolymerasechainreaction(PCR)Theresultshowedthat2PCV2positivesampl
4、esweredetectedin9samplesTheaveragepositiverateis222%ItapprovedthatPMWSexistedJilinprovinceThePCV2positivesampleswereabraded,sedimentedbycentrifugation,filteredandinoculatedtothePK一15cellline,whichwerenotcontaminatedbyPCV
5、lTheextractviralDNAinPK15cellsafter6passageswasdetectedwithapairofprimersofPCV2andobtainedpositiveresultTheresultshowedthatthePK15cellsfreeofPCVwereinfectedbyPCV2Thentheviralsampleswerepuredandobservedwithelectronicmicro
6、scopeTheywere17nmindiameterInthecytoplasm,thespecificfluorescenceparticleswereobservedinthefrozensectionstrainedbyindirectimmunofluorescencetestspecifictoPCV2Accordingtoaboveresults,theisolatedstrainbelongstoPVC2andnamed
7、PCV2JL01and02strainAccordingtothepublishedORF2genesequenceofPCV2,apairofprimerweredesignedsynthesizedandORF2genewasamplifiedbyPCRTheproductwasabout07kbinsizedetectedbyagarosegelelectrophoresisItwasaccordwiththeanticipate
8、dfragmentTheproductswerepurifiedandsequencedTheresultshowedthattheORF2genesofJL01andJL02isolatedstrainsare702bpinsizeandtheyshared999%homologywiththereferentialstrainsand919994%homologywithotherisolatedstrainsThattheviru
9、seswereisolated,identifiedandsequenceanalysisofORF2genewillsupplygoodfoundationforaetiologydiagnosisandcontrolofPCV2AndtheresultalsogivessomehelponresearchingthebioactivityofORF2protein—codeandestablishingthediagnosticki
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