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文檔簡介
1、目的:研究5—烯丙基—7—二氟甲基白楊素(ADFMChR)選擇性抑制體外培養(yǎng)人肺癌A549細胞生長和誘導細胞凋亡的作用。 方法:體外培養(yǎng)人肺癌A549細胞系細胞和中國倉鼠肺上皮CHL細胞系細胞。平皿集落形成法檢測細胞錨定依賴性生長。軟瓊脂集落形成法測定細胞非錨定依賴性生長。PI染色流式細胞術分析細胞凋亡率。DNA瓊脂糖凝膠電泳觀察凋亡細胞的DNA梯形條帶。 結果:平皿集落形成法結果顯示:0.1、1.0、10.0、100.
2、0μg/mL的ADFMChR分別處理人肺癌A549細胞7d的集落抑制率為16.3%、38.9%、65.6%、96.7%;與溶媒對照組比較,ADFMChR對A549細胞生長有抑制作用(P<0.05)。ADFMChR抑制A549細胞生長的IC50為1.6μg/mL,其效價強度高于先導物白楊素(ChR,IC50為9.3μg/ml),與紫杉醇(Tax,IC50為1.4μg/mL)類似。同時,1.0、10.0、100.0μg/mL的ADFMChR
3、分別處理中國倉鼠肺上皮CHL細胞7d集落抑制率為29.6%、52.4%、74.1%;與溶媒對照組比較,ADFMChR對CHL細胞生長有抑制作用(P<0.05),IC50為7.8μg/mL,其效價強度低于Tax(IC50為3.1μg/mL),與先導物ChR接近(IC50為8.5μg/mL)。軟瓊脂集落形成法結果表明:0.1、1.0、10、100μg/mL的ADFMChR分別處理人肺癌A549細胞8d的集落抑制率為23.6%、42.8%、6
4、6.1%、86.7%;與溶媒對照組比較,ADFMChR對A549細胞有抑制作用(P<0.05),IC50為1.7μg/mL,其抑制強度高于ChR(IC50為10.6μg/mL),與Tax接近(IC50為1.5μg/mL)。PI染色流式細胞術分析結果發(fā)現:1.0、10.0、100.0μg/mL的ADFMChR處理A549細胞48h,A549細胞凋亡率分別為12.0%、19.3%、28.0%;10.0μg/mLADFMChR孵育A549細胞
5、24h、48h、72h,A549細胞凋亡率分別為4.5%、19.30%,18.8%。ADFMChR呈濃度和時間依賴性誘導A549細胞凋亡,且凋亡率均高于相應濃度ChR的誘導凋亡率(6.8%、11.5%、23.9%),與相應濃度Tax的(10.9%、21.4%、、29.0%)接近。1.0、10.0、100.0μg/ml的ADFMChR處理CHL細胞48h,CHL細胞凋亡率分別為10.2%、14.3%、26.9%,10.0μg/mLADFM
6、ChR孵育CHL細胞24h、48h、72h,CHL細胞凋亡率分別為4.8%、14.3%、14.6%。ADFMChR呈濃度和時間依賴性誘導CHL細胞凋亡,但凋亡率均低于相應濃度Tax誘導的凋亡率(15.4%、21.4%、30.8%),與相應濃度ChR誘導的凋亡率(10.7%、15.3%、25.0%)相當。DNA瓊脂糖凝膠電泳結果證實:10.0、100.0μg/ml的ADFMChR分別孵育A549細胞48h,出現典型細胞凋亡特征性DNA梯形
7、條帶。10.0、100.0μg/mLADFMChR分別孵育CHL細胞48h,出現典型細胞凋亡特征性DNA梯形條帶。 結論: 1、ADFMChR顯著抑制體外培養(yǎng)人肺癌A549細胞系細胞錨定依賴性生長。 2、ADFMChR顯著抑制體外培養(yǎng)人肺癌A549細胞系細胞非錨定依賴性生長。 3、ADFMChR能有效地誘導A549細胞凋亡。 4、與對人肺癌A549細胞生長的作用比較,ADFMChR對中國倉鼠肺上皮
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