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文檔簡介
1、目的:研究卡維地洛對(duì)缺血再灌注心肌細(xì)胞的保護(hù)作用,并探討其可能的作用機(jī)制。 方法:取新生1-3天的Sprague-Dawley鼠的心肌,原代分離,培養(yǎng)其心肌細(xì)胞。心肌細(xì)胞培養(yǎng)72小時(shí)后進(jìn)行分組,Ⅰ組正常對(duì)照組,Ⅱ組單純?nèi)毖?復(fù)氧組,Ⅲ組卡維地洛+缺氧/復(fù)氧組,卡維地洛的濃度為4ug/ml,使培養(yǎng)板中的細(xì)胞缺氧(氧濃度<1%),缺氧120分鐘后,復(fù)氧30分鐘,造成缺氧/復(fù)氧損傷模型,測定細(xì)胞存活率:抽取細(xì)胞培養(yǎng)上清液測定乳酸脫氫酶
2、(LDH),磷酸肌酸激酶(CK-MB);并破碎細(xì)胞測定丙二醛(MDA)含量,超氧化酶歧化酶(SOD)活性:取細(xì)胞爬片,免疫組化方法測定Bcl-2、Bax基因蛋白的表達(dá)情況。 結(jié)果:1.Ⅰ組正常對(duì)照組,Ⅱ組單純?nèi)毖?復(fù)氧組,Ⅲ組卡維地洛十缺氧/復(fù)氧組細(xì)胞存活率分別為:94.24%,58.39%,70.21%,各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05): 2.Ⅰ組,Ⅱ組,Ⅲ組上清液中LDH,CK-MB分別為:18.66 U/L,
3、50.28U/L,32.32 U/L:22.24 U/L,42.45 U/L,28.33 U/L,各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); 3.Ⅰ組,Ⅱ組,Ⅲ組破碎細(xì)胞,測定丙二醛(MDA)含量,SOD活性分別為:1.60 nmol/ml,8.32 nmol/ml,5.32 nmol/ml:16.64 U/ml,7.42 U/ml,10.32 U/ml,各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); 4.Ⅰ組,Ⅱ組,Ⅲ組取細(xì)胞
4、爬片Bcl-2、BaX基因蛋白表達(dá)陽性率為:8.24%,12.22%,20.32%:14.32%,40.21%,32.62%:Bcl-2/Bax比值為:0.57,0.30,0.62,其中Bax蛋白表達(dá)陽性率,Bcl-2/Bax比值的組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 結(jié)論:1.卡維地洛對(duì)心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷有保護(hù)作用。 2.卡維地洛能清除氧自由基,提高心肌細(xì)胞抗氧化能力。 3.卡維地洛有顯著抗心肌細(xì)胞凋亡作
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