吉西他濱聯(lián)合鉑類治療非小細(xì)胞肺癌的個(gè)體化臨床應(yīng)用研究.pdf

1、肺癌是全球發(fā)病率和死亡率最高的惡性腫瘤之一,確診的肺癌中約80％為非小細(xì)胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCIC),除少數(shù)病人可經(jīng)手術(shù)切除外,多數(shù)病人因診斷時(shí)已處晚期(Ⅲ、Ⅳ期)而預(yù)后差。吉西他濱(Gemcitabine,Gem,商品名:健澤)是阿糖胞苷類似物,化學(xué)名2,2'-雙氟胞嘧啶核苷,屬抗代謝類抗癌藥。美國FDA于1998年批準(zhǔn)用于治療局部晚期或轉(zhuǎn)移的非小細(xì)胞肺癌(NSCLC),是目前臨床治療NS

2、CLC中的最有效的新藥之一。目前臨床中常采用Gem與鉑類、紫杉類、葸環(huán)類、嘧啶類等抗腫瘤藥聯(lián)合應(yīng)用以提高化療效果,減輕不良反應(yīng)。
　　 臨床上常通過測定患者血藥濃度為臨床尋找最佳的化療方案,減輕化療引起的不良反應(yīng),并進(jìn)一步實(shí)行臨床個(gè)體化給藥提供依據(jù)。同時(shí),近年來日益興起的藥物基因組學(xué)根據(jù)患者/腫瘤的特有遺傳學(xué)特征而進(jìn)行的“個(gè)體化”治療,是突破目前NSCLC化療療效進(jìn)入“瓶頸”的希望所在。
　　 故本研究采用Gem(120

3、0mg/m2,第1、8天)2小時(shí)靜脈恒速滴注聯(lián)用卡鉑(AUC5,第1天)對進(jìn)展性NSCLC患者化療,并用高效液相色譜法(HPLC)測定患者血漿樣品中吉西他濱的血藥濃度,進(jìn)行吉西他濱血藥濃度與毒性的相關(guān)性研究。同時(shí)也研究作為吉西他濱作用靶點(diǎn)之一的核苷酸還原酶(ribonucleotidereductase M1)RRM1和同樣對NSCLC發(fā)揮了重要作用的乳腺癌易感基因(breastcancer susceptibility gene1)B

4、RCA1在晚期非小細(xì)胞肺癌患者外周血中的表達(dá)情況,探討其表達(dá)與吉西他濱/鉑類聯(lián)合化療的臨床意義。
　　 研究采用SYBR熒光實(shí)時(shí)定量PCR法檢測非小細(xì)胞肺癌組織與外周血中基因表達(dá)水平,通過優(yōu)化SYBR熒光實(shí)時(shí)定量PCR法工作條件,建立質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn),對該檢測方法準(zhǔn)確度、精密度和重現(xiàn)性進(jìn)行考察;構(gòu)建管家基因β-actin質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品,以SYBR熒光實(shí)時(shí)定量PCR分析,制備標(biāo)準(zhǔn)曲線;對20例非小細(xì)胞肺癌組織及外周血中RRM1(AF10704

5、5)、BRCA1(U14680)和管家基因β-actin(AY582799)的mRNA進(jìn)行檢測,評價(jià)RRM1和BRCA1mRNA在腫瘤組織、外周血和/或癌旁組織中表達(dá)水平的差異及相互之間表達(dá)的相關(guān)性。同時(shí)隨機(jī)選取37晚期NSCLC病例,采用吉西他濱1200 mg/m2(d1,d8)聯(lián)合卡鉑(AUC5;d1)組成的NSCLC標(biāo)準(zhǔn)一線化療方案,檢測外周血中RRM1和BRCA1mRNA的表達(dá),評價(jià)預(yù)后臨床意義。
　　 以SPSS15.

6、0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)。獨(dú)立樣本ONE-WAY ANOVA檢驗(yàn)法分析腫瘤組織、正常組織、淋巴組織與外周血基因表達(dá)水平的差異。RRM1和BRCA1在外周血中的表達(dá)比較采用線性相關(guān)性分析及X2檢驗(yàn),總體生存率的比較采用Kaplan-Meier生存曲線和log-rank檢驗(yàn)法分析,影響晚期NSCLC患者生存期的相關(guān)因素分析采用COX多因素回歸分析法。以P＜0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果顯示在吉西他濱2小時(shí)輸注聯(lián)合卡鉑作為一線化

7、療方案治療晚期NSCLC的21例臨床試驗(yàn)研究中,有效率為47.6％,其中10人為部分反應(yīng)(PR),7人為疾病穩(wěn)定(SD)。疾病進(jìn)展時(shí)間(TTP)為7.0月(95％可信區(qū)間4.0-10.0月),中位生存期(OS)為12.0月(95％可信區(qū)間11.2-12.8月)。在血藥濃度Cmax與血液毒性的相關(guān)性研究中,平均血藥濃度為4.95±2.42μg/ml。主要的毒性為血液性毒性的3-4級的血小板減少癥和白細(xì)胞百分率的下降。同時(shí)分析結(jié)果得,吉西他

8、濱Cmax與WBC下降百分率存在一定相關(guān)性(r2=0.4575,p＜0.05),Cmax與PLT下降百分率存在一定相關(guān)性(r2=0.5671,p＜0.05)。
　　 腫瘤組織中RRM1的表達(dá)明顯高于正常組織和淋巴組織(P＜0.05),BRCA1在腫瘤組織、正常組織和淋巴組織中的表達(dá),無顯著性差異(P＞0.05),外周血中RRM1和BRCA1的表達(dá),均明顯低于組織中的表達(dá)量(P＜0.05)。這提示RRM1表達(dá)與腫瘤增殖活性密切相關(guān)

9、,甚至有可能與化療藥物耐藥性具有相關(guān)性,而BRCA1表達(dá)與腫瘤活性似乎沒有非常密切的相關(guān)性。這均有待進(jìn)一步研究證實(shí)。
　　 在37例晚期并采用吉西他濱聯(lián)合卡鉑方案化療的NSCLC患者外周血中對聯(lián)RRM1和BRCA1mRMA的表達(dá)水平進(jìn)行檢測,評估臨床、病理因素對生存期的影響,結(jié)果顯示:除了對化療敏感性不同的組間(CR+PR Vs SD+PD)對生存期有顯著的影響(19.50 Vs12.88,log-rank8.392,P=0.0

10、04)外,在性別、TNM分期、吸煙狀況、病理組織類型、PS分級組間(P值分別為0.833,0.943,0.927,0.487,0.803)生存期的差異并無統(tǒng)計(jì)學(xué)上的意義。RRM1和BRCA1的表達(dá)無顯著相關(guān)性,但RRM1低表達(dá)組比高表達(dá)組有更長的生存期(16.95 Vs12.76,log-rank3.989,P=0.046)。BRCA1低表達(dá)組的生存曲線雖然在高表達(dá)組之上,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(16.80 Vs13.77,log-rank

11、0.830,P=0.362)。COX模型進(jìn)行多因素回歸分析發(fā)現(xiàn)外周血RRM1表達(dá)水平不是影響患者預(yù)后的獨(dú)立因素(hazardraTiO22.586;95％CI:0.967～6.916:p=0.058)。
　　 綜上所述,Gem(1200mg/m2,第1、8天)2小時(shí)靜脈恒速滴注聯(lián)用卡鉑對進(jìn)展性NSCLC患者化療有效率為47.6％,主要的毒性為血液性毒性的3-4級的血小板減少癥和白細(xì)胞百分率的下降。雖然RRM1 mRNA表達(dá)水平不