西妥昔單抗治療晚期胃腸腫瘤療效及耐藥研究.pdf

1、西妥昔單抗是一種人鼠嵌合型抗表皮生長因子受體（EGFR）單克隆抗體，可與腫瘤細胞表面的EGFR結合，阻斷其下游信號傳導通路，抑制腫瘤細胞生長、浸潤、轉移等惡性表型。盡管西妥昔單抗在晚期結直腸腫瘤的一線、二線與三線治療中均顯示了較好療效，但對部分患者療效欠佳。已有研究發(fā)現這種原發(fā)性耐藥現象與腫瘤K-ras基因突變有關。 本研究觀察了西妥昔單抗聯合化療治療35例晚期胃腸腫瘤的臨床療效，并通過體內外實驗研究，探討了K-ras基因突變

2、后，EGFR信號轉導通路中相關接頭蛋白表達的變化，以闡明西妥昔單抗耐藥的可能分子機制。材料與方法入選35例晚期胃腸腫瘤患者，分別接受以西妥昔單抗為基礎的靶向治療聯合化學治療，用RECIST標準評價臨床療效，用NCI–CTCv3.0標準評價治療安全性。收集部分患者原發(fā)灶組織，檢測其K-ras突變狀態(tài)。通過基因測序及免疫細胞化學染色方法，篩選EGFR 表達陽性、同時K-ras基因呈突變型或野生型的結腸癌細胞各一株，應用細胞增殖實驗、流式細胞

3、技術檢測西妥昔單抗在體外對結腸癌細胞的細胞毒作用和對細胞凋亡的影響。用K-ras呈野生型和突變型的結腸癌細胞株，分別建立裸鼠皮下移植瘤模型，給予西妥昔單抗治療，繪制腫瘤生長曲線，用TDT 介導的缺口末端標記技術（TUNEL）檢測細胞凋亡，用定量PCR、免疫組織化學染色、蛋白印跡等技術檢測移植瘤標本中EGFR蛋白表達，以及EGFR 信號轉導通路中AKT 及其磷酸化蛋白的表達。結果共計入組35例胃腸腫瘤患者，接受西妥昔單抗為基礎的靶向治療聯

4、合化學治療后，1例獲完全緩解（CR）、14例部分緩解（PR）、14例疾病穩(wěn)定（SD）、6例疾病進展（PD）。對21例胃癌的疾病控制率（CR+PR+SD）為80.0％（16/20），14例腸癌的疾病控制率為86.7％（13/15）。同時檢測了其中11例患者的原發(fā)病灶，均為K-ras 野生型。西妥昔單抗對體外培養(yǎng)的結腸癌細胞未能顯示細胞毒作用。體內研究發(fā)現，西妥昔單抗能明顯抑制K-ras 野生型結腸癌裸鼠皮下移植瘤生長，但對K-ras突變型

5、者抑制作用較差。對K-ras突變型結腸癌裸鼠皮下移植瘤，定量PCR檢測結果顯示，西妥昔單抗治療組AKT基因表達高于對照組。IHC及Western-blot顯示，西妥昔治療組與對照組的EGFR 及AKT蛋白表達無明顯差異，但西妥昔治療組的p-AKT表達高于對照組。結論西妥昔單抗聯合化療，對晚期胃腸腫瘤可獲較滿意的臨床控制率，但對部分患者未顯示明顯療效。體內外實驗研究結果提示，K-ras突變狀態(tài)與西妥昔單抗療效相關，K-ras突變型者，EG