IgA腎病患者PTEN表達及其對腎間質(zhì)纖維化的影響.pdf

1、目的：IgA腎病(IgA nephropathy，IgAN)的預(yù)后不僅與腎小球硬化、腎功能損傷、高血壓、尿蛋白排泄量有關(guān)，還與腎間質(zhì)纖維化(Renal interstitial fibrosis，RIF)關(guān)系密切，甚至比腎小球硬化更能反映腎臟受損傷的程度。染色體10上缺失的磷酸酶與張力蛋白同源物基因(Phosphase andtensin homology deleted on chromosome 10，PTEN)受上游轉(zhuǎn)化生長因子-

2、β1(TGF-β1)的負性調(diào)控，抑制細胞增殖誘導(dǎo)凋亡。已有研究證實PTEN的正常表達能夠抑制TGF-β1誘導(dǎo)肺成纖維細胞轉(zhuǎn)分化、增殖以及高糖環(huán)境下SD大鼠腎小球系膜細胞肥大和增殖，但其對RIF的影響尚不清楚。本研究旨在探討IgA。腎病腎組織中PTEN表達及其對腎間質(zhì)纖維化的影響。 方法：于河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院經(jīng)臨床和腎活檢病理確診的原發(fā)性IgAN患者47例。所有病人均未用糖皮質(zhì)激素、細胞毒藥物、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(ACEI)

3、、血管緊張素Ⅱ AT1受體阻滯(ARB)治療，并除外紫癜性腎炎、狼瘡性腎炎、乙肝病毒相關(guān)性腎炎、肝硬化性腎小球病、銀屑病相關(guān)性腎炎、甲狀腺病相關(guān)性腎炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎腎損害、以及腫瘤相關(guān)性腎病。合并急性腎小管壞死和急、慢性間質(zhì)性腎炎的病例也被剔除。10例腎臟腫瘤切除后遠端。腎組織作對照。腎小管間質(zhì)的各項病理參數(shù)的半定量積分采用Katafuchi等的標準分為4組：Ⅰ組(0分，10例)；Ⅱ組(1～3分，14例)；Ⅲ組(4～6分，13例)和Ⅳ

4、組(7～9分，10例)。應(yīng)用免疫組化SP法檢測PTEN、TGF-β1、α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)、Ⅲ型膠原(ColⅢ)以及原位雜交法檢測PTENmRNA表達。應(yīng)用北航IMS-2000圖像分析系統(tǒng)對腎組織免疫組化以及原位雜交結(jié)果進行半定量分析。詳細收集患者臨床和病理資料。結(jié)果：①IgAN患者臨床資料：隨著IgAN間質(zhì)病變程度的加重，eGFR和尿滲透壓從Ⅰ組到Ⅳ組逐漸降低，各組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(p均＜0.05)；Ⅳ組UPE高于Ⅰ組

5、和Ⅱ組，組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)：Ⅲ組和Ⅳ組硬化腎小球數(shù)明顯高于Ⅰ組和Ⅱ組，而Ⅳ組硬化腎小球數(shù)也明顯高于Ⅲ組，組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；Ⅲ組和Ⅳ組血管積分明顯高于Ⅰ組和Ⅱ組，而Ⅳ組血管積分也明顯高于Ⅲ組，各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。②IgANPTEN、PTEN mRNA在。腎組織內(nèi)的表達部位及變化：對照組和IgAN組PTEN表達部位主要在腎小管上皮細胞胞漿，腎小球內(nèi)無或僅有極少量表達，在腎間質(zhì)、間質(zhì)血

6、管及浸潤的炎細胞中未見表達：PTEN mRNA表達部位與PTEN相似，此外在腎小管上皮細胞胞核內(nèi)也有少量表達。對照組和Ⅰ組中，PTEN與PTEN mRNA幾乎在每個腎小管上皮細胞胞漿中均有表達，組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P均＞0.05)；在ⅠⅡ組、Ⅲ組和Ⅳ組中，隨著腎小管間質(zhì)病變程度的加重，腎間質(zhì)纖維化、腎小管萎縮和炎細胞浸潤逐漸增加，而PTEN的表達量逐漸減少(12.23±1.44，10.04±1.14，8.00±1.98)％，較對照組及

7、Ⅰ組明顯減少，各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均＜0.05)；PTEN mRNA的表達量也相應(yīng)逐漸減少(12.55±1.35，10.38±1.36，8.06±2.21)％，較對照組及Ⅰ組明顯減少，各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均＜0.05)。③IgANTGF-β1、α-SMA、ColⅢ在腎組織內(nèi)的表達部位及變化：對照組和Ⅰ組中，TGF-β1主要在腎小管上皮細胞管腔面胞漿中表達，腎小球內(nèi)僅有少量表達，組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)：在Ⅱ組、Ⅲ

8、組和Ⅳ組中，隨著間質(zhì)病變的加重，TGF-β1除在腎小管上皮細胞的表達外，腎間質(zhì)、腎小球周圍及腎小管周圍區(qū)域的浸潤炎細胞、腎小球系膜細胞均有其表達，且表達量顯著增高(9.62±1.82，11.43±1.75，13.20±1.68)％，較對照組和Ⅰ組明顯增高，各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均＜0.05)。對照組和Ⅰ組中，α-SMA表達部位主要在腎間質(zhì)血管壁平滑肌肌層，腎間質(zhì)偶有表達，組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)；在Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組中，隨

9、著腎小管損傷范圍和纖維化程度加重，α-SMAI廣泛表達于間質(zhì)區(qū)域及一些腎小管細胞胞漿，甚至在病變較重的腎小球系膜區(qū)也可見到表達(7.85±0.84，9.40±0.93，10.90±2.00)％，較對照組和Ⅰ組明顯增多，各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均＜0.05)。ColⅢ表達部位主要在腎間質(zhì)，對照組與Ⅰ組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P均＞0.05)；Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組，隨著腎間質(zhì)纖維化程度加重，ColⅢ表達量逐漸增多，偶可見腎小管上皮細胞少量表達，各

10、組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均＜0.05)。④PTEN、PTENmRNA與TGF-β1、α-SMA、ColⅢ及其臨床資料的相關(guān)性分析：腎組織PTEN和PTENmRNA的表達量與eGFR(r=0.791，0.811；P＜0.01)、尿滲透壓(r=0.739，0.720；P＜0.01)呈正相關(guān)，與腎組織TGF-β1表達量(r=-0.632，-0.6 14；P＜0.01)、α-SMA表達量(r=-0.669，-0.627；P＜0.01)、ColI

11、II表達量(r=-0.656，-0.657；P＜0.01)、UPE(r=-0.523，-0.606：P＜0.01)、腎小球硬化率(r=-0.775，-0.776；P＜0.01)以及血管積分(r=-0.850，-0.776; P＜0.01)呈負相關(guān)。結(jié)論：①隨著IgAN腎小管間質(zhì)病變的加重，PTEN和PTEN mRNA表達逐漸減少，甚至缺失，提示PTEN可能是IgAN腎間質(zhì)纖維化進程中的一種抗纖維化內(nèi)源性保護分子。②IgAN中TGF-β1