乳腺癌組織中COX-2、VEGF、CD105在的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、前言: 腫瘤轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的標(biāo)志性生物學(xué)特征，也是惡性腫瘤相關(guān)死亡的首要原因。其中新生血管形成是腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的前提，血管的形成不僅為腫瘤生長提供了營養(yǎng)支持，同時也為腫瘤細(xì)胞進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)提供主要途徑。目前為止，關(guān)于乳腺癌的血行轉(zhuǎn)移機(jī)制尚不清楚。進(jìn)一步研究乳腺癌的血行轉(zhuǎn)移機(jī)制，有效抑制腫瘤血管形成，可能會延長病人的生存期，降低病人的死亡率，為乳腺癌的治療提供新的途徑。 近來有研究顯示：環(huán)氧化酶-2(COX-2)與血管生成密

2、切相關(guān)。其高表達(dá)可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞釋放血管源性物質(zhì)，對調(diào)節(jié)腫瘤新生血管的形成有重要的作用，但其發(fā)生機(jī)制尚不清楚。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)是目前已知的最強(qiáng)的促腫瘤血管生成因子其能特異地作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，在體內(nèi)誘導(dǎo)血管形成。CD105(Endoglin)是一種與增生有關(guān)的內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞膜抗原。其表達(dá)與細(xì)胞周期有關(guān)，能準(zhǔn)確反映內(nèi)皮細(xì)胞的增殖狀態(tài)，目前被認(rèn)為是一種非常好的檢測內(nèi)皮細(xì)胞的指示劑。有學(xué)者報導(dǎo)：COX-2可能通過上調(diào)VEGF的表達(dá)，

3、促進(jìn)腫瘤微血管的形成。但有關(guān)COX-2、VEGF在乳腺癌組織中的表達(dá)與腫瘤微血管密度的關(guān)系國內(nèi)外鮮有報導(dǎo)。 本研究采用免疫組化S-P法對乳腺癌組織COX-2、VEGF、CD105表達(dá)情況進(jìn)行了檢測，并且對其表達(dá)情況與疾病的病理生物學(xué)特征、患者的生存時間進(jìn)行了分析，以判斷其對預(yù)后的意義。 實驗方法: 1、病例與標(biāo)本收集了本院外科1999年至2006年間行改良根治術(shù)及保乳術(shù)治療的乳腺癌患者117例，發(fā)病年齡范圍29～

4、74歲，平均年齡51.4歲。所有患者術(shù)前未經(jīng)任何抗癌治療且術(shù)后均在該科接受化療，隨訪資料完整。隨訪期限從4個月至70個月不等，平均隨訪日期為42.3個月。 2、試劑 兔抗人COX-2單克隆抗體、鼠抗人VEGF單克隆抗體、鼠抗人CD105單克隆抗體、SP試劑盒、DAB顯色液，均購于福州邁新生物技術(shù)開發(fā)公司。二抗購于北京中杉公司。 3、方法 采用S-P法進(jìn)行免疫組化測定，實驗步驟嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作，并用P

5、BS代替一抗作陰性對照，用已知的結(jié)、直腸癌COX-2、VEGF陽性片作陽性對照。 4、結(jié)果判定 CD105標(biāo)記的MVD計數(shù)以呈現(xiàn)棕色單個皮細(xì)胞或內(nèi)皮細(xì)胞群者，只要他們和鄰近的微血管、腫瘤細(xì)胞或其它結(jié)締組織分開，就把它們作為一個微血管。200×光鏡下計數(shù)微血管的個數(shù)，取其平均值為微血管密度。COX-2、VEGF的判定以細(xì)胞漿和核膜出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性，以陽性細(xì)胞百分比與著色強(qiáng)度乘積值分為低表達(dá)、中度表達(dá)和高表達(dá)。陽性率以“

6、中度+高度表達(dá)”計，陰性率以“低度表達(dá)”計。 5、統(tǒng)計分析方法 所得數(shù)據(jù)均值比較用t檢驗；生存率采用Kaplan-Meier法計算；生存期差別的比較用Log-Rank時序檢驗：兩樣本率的比較用x2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。所有統(tǒng)計均在SPSS11.5統(tǒng)計軟件包進(jìn)行。 實驗結(jié)果: 1、乳腺癌組織中COX-2、VEGF的表達(dá)及與臨床病理聯(lián)系:COX-2的陽性表達(dá)率為55.6％，其陽性表達(dá)在不同的

7、臨床分期(P=0.01、r=0.238)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.01、r=0.238)、HER-2(P=0.025、r=0.218)、ER(P=0.026、r=-0.205)狀態(tài)，有顯著性差異，而與年齡、腫塊大小、病理類型無顯著性差異。VEGF的陽性表達(dá)率為66.7％，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期有關(guān)。 2、CD105標(biāo)記MVD的表達(dá)情況及與COX-2、VEGF的關(guān)系:以CD105為新生血管標(biāo)記物測得的乳腺癌MVD值與患者的腫塊大小、激

8、素受體狀況無關(guān)，而與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期有關(guān)。并且其與COX-2及VEGF的陽性表達(dá)均呈正相關(guān)(P=0.029、r=0.201)(P=0.023、r=0.210)。 3、乳腺癌復(fù)發(fā)與COX-2和VEGF表達(dá)的關(guān)系:回顧術(shù)后乳腺癌復(fù)發(fā)患者的手術(shù)標(biāo)本，其中COX-2、VEGF的陽性表達(dá)率較高，為(79.31％、86.21％)明顯高于未復(fù)發(fā)組(47.73％％、60.23％)(P=0.003、P=0.01)。 4、COX-2、

9、VEGF表達(dá)與術(shù)后生存的關(guān)系:經(jīng)Kaplan-Meier生存曲線分析及Log-Rank時序檢驗可以看出COX-2與VEGF表達(dá)與無病生存率負(fù)相關(guān)(P=0.004、P=0.032)。且通過共檢驗得出二者共陽性組生存期最短(P=0.005). 5、多因素分析結(jié)果顯示：ER、PR、HER-2陽性表達(dá)及腫塊大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況以及COX-2陽性表達(dá)是乳腺癌的獨(dú)立預(yù)后因素。 結(jié)論: 1、乳腺癌組織中COX-2、VEGF均有