中草藥有效成分測定及其抗氧化作用.pdf

1、中草藥以其豐富的資源、獨特的療效、毒副作用少，安全性高，等特點，已成為目前抗自由基藥物的研究熱點。本研究的目的是研究一些中草藥的有效成分，并篩選出具有清除自由基功能的中草藥自由基清除劑，保護(hù)DNA等生物大分子免受損傷，維護(hù)機體正常生理功能。 本文利用LC-MS/MS聯(lián)用技術(shù)對水溶性迷迭香提取物中的有效成分進(jìn)行了測定，并對阿魏酸、銀杏提取物、茶多酚、迷迭香提取物、甘草次酸提取物、絞股蘭提取物、三七總皂甙等天然中草藥提取物清除氧自由

2、基和對DNA損傷保護(hù)作用進(jìn)行了研究，取得了一些新的結(jié)果。主要內(nèi)容如下： 1.LC-MS/MS法同時測定水溶性迷迭香提取物中迷迭香酸、阿魏酸、咖啡酸含量建立了一種快速同時測定水溶性迷迭香提取物中迷迭香酸、阿魏酸和咖啡酸含量的液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)定量分析方法。使用三級四極串聯(lián)質(zhì)譜(MS/MS)作為HPLC的檢測器，對水溶性迷迭香提取物中迷迭香酸、阿魏酸和咖啡酸三種化合物進(jìn)行分離測定。三種分析物在研究范圍5～500n

3、g/mL線性良好(r＞0.999)，方法的檢出限均在5ng/mL以內(nèi)。對50ng/mL的迷迭香酸、咖啡酸和阿魏酸溶液進(jìn)行11次平行測定，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)分別為2.7％，3.5％和4.8％。每個樣品分析時間為3min。本方法操作簡便、靈敏度高、分析速度快，可以應(yīng)用于水溶性迷迭香提取物中迷迭香酸、阿魏酸和咖啡酸含量的同時測定。 2.七種中草藥提取物清除氧自由基活性研究建立了一種流動注射化學(xué)發(fā)光檢測羥基自由基的方法，具有分析速度

4、快，精度高，容易實現(xiàn)自動化和連續(xù)分析等優(yōu)點。用所建立的方法和次黃嘌呤-黃嘌呤氧化酶-魯米諾體系比較了七種天然中草藥提取物清除羥基自由基和超氧陰離子自由基的能力，其清除羥基自由基的半抑制濃度(IC50)分別為茶多酚3.1μg/ml，阿魏酸3.55μg/ml，銀杏提取物2.95μg/ml，迷迭香提取物6.24μg/ml，甘草次酸提取物10.3μg/ml，絞股蘭提取物39.1μg/ml，三七提取物58.7μg/ml；清除超氧陰離子自由基的半抑

5、制濃度(IC50)分別為茶多酚0.042μg/ml，阿魏酸0.045μg/ml，銀杏提取物0.45μg/ml，迷迭香提取物0.025μg/ml,甘草次酸提取物1.68μg/ml，絞股蘭提取物14.08μg/ml，三七提取物167μg/ml。結(jié)果表明七種中草藥提取物都具有清除羥基自由基和超氧陰離子自由基的能力，其中以阿魏酸和茶多酚最強，三七總皂甙最弱。 3.三種中草藥提取物對DNA氧化損傷保護(hù)作用研究利用CuSO4-Phen-Vc

6、-H2O2-DNA化學(xué)發(fā)光體系，研究了阿魏酸、迷迭香、銀杏三種植物提取物對DNA氧化損傷的保護(hù)作用。在本實驗條件下，阿魏酸、迷迭香、銀杏三種植物提取物均能有效抑制DNA損傷發(fā)光，并使DNA損傷發(fā)光峰延遲時間變長，在本體系中阿魏酸、迷迭香、銀杏三種植物提取物對DNA損傷發(fā)光的半抑制濃度IC50分別為0.24μg/ml、1.63μg/ml、3.0μg/ml。結(jié)果表明，阿魏酸、迷迭香、銀杏三種植物提取物兼屬預(yù)防型和斷鏈型抗氧化劑，對DNA的保