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1、甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文亞洲Ⅰ型口蹄疫病毒VP1基因真核表達載體的構(gòu)建及其免疫活性初探姓名：董金杰申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：王永錄伏小平20050620ConstructionofAsiaIFMDVVPlGeneRecombinantExpressionVectorandElementaryAnalysesofItsImmunologicalActivitySummaryFoot—and—mouthdiseaseVir
2、us(FMDV、causesahighlycontagiousdisease——foot—and—monthdisease(FMD)inclovenhoofedanimalsVaccineisoneofmajormethodsagainstFMDnotonlyatpresentbutalsointhefutureWiththedevelopmentofmolecularbiologyandfurtherunderstandingofst
3、ructureandfunctionofFMDVgenome，F(xiàn)MDvaccinehasgone“inactivevaccine”and“attenuatedvaccine”andhasalreadydevelopedtowardsnew—typedmolecularvacinneBecauseDNAvaccinehasmuchmerit，ithasbecomeimportantdirectionofnewtypedmolecularv
4、accineresearchInthisstudy，AsiaIserumTiletotalRNAwasextractedfromtypeofFMDVandtheeDNAfragmentofVP1wasamplifiedwithspecificprimersbyRTPCRthepurifiedeDNAfragmentwasinsertedintopGEMTeasyvectorTherecombinantplasmid‘wasidentif
5、iedbyrestrictionendonucleaseanalysisandPCRnwasprovedthattheacquiredrecombinantcontainscompleteVPlgenebyDNAsequencingAfterwardsthecompleteVPlgenefromtheidentifiedrecombinantwasamplifiedwithanotherpairofprimerscontainingBa
6、mHIandEcoRITheexpressionvectorpcDNA31()wasdigestedbyBamHIandEcoRIrespectivelyPositiveclonesnamedaspcDNAVwasidentifiedbyrestrictionendonucleaseanalysis，PCRandDNAsequencing；IL18wasinsertedintopcDNAVbythesarnemethod，itwasna
7、medpcDNAVIconstructingeukaryoticexpressionrecombinantplasmidspcDNAVI，300400gramguineapigswereimmunizedwithpcDNAVI，andaboostervaccinationwasgiventwoweekslaterKinetictestswerecarriedoutbyELISAResultsshowthathumoralimmunore
8、sponsewaselicitedbypcDNAVIDNAvaccinesandhadstrongerprotectioneffectThisencouragedfurtherworktowardsthedevelopmentofaDNAvaccineagainstFMDVandprovidedthebasisofresearchfurDNAvaccineKeywords：FMDV；AsiaIserumtype；expressionve
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