兩種寡糖對(duì)大鼠腸黏膜結(jié)構(gòu)及黏膜免疫相關(guān)細(xì)胞影響的研究.pdf

1、本研究選用100g左右同性、同品系SPF級(jí)Wistar大鼠作為動(dòng)物模型，運(yùn)用組織常規(guī)和特殊染色技術(shù)、免疫組織化學(xué)技術(shù)和圖像分析等技術(shù)，采取定性、定位和定量相結(jié)合的方法，從腸黏膜形態(tài)學(xué)入手，通過觀察不同實(shí)驗(yàn)組大鼠腸黏膜結(jié)構(gòu)、堿性磷酸酶(AKP)活性及黏膜免疫相關(guān)細(xì)胞的數(shù)量和分布的動(dòng)態(tài)變化來探討半乳甘露寡糖和殼寡糖對(duì)大鼠腸道吸收功能、腸黏膜免疫功能以及抗大腸桿菌感染作用的影響，同時(shí)探討半乳甘露寡糖與乳酸桿菌(Lactobacillus)以及

2、殼寡糖之間的協(xié)同作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下： 1.連續(xù)灌喂半乳甘露寡糖、殼寡糖及半乳甘露寡糖+乳酸桿菌(乳酸桿菌在實(shí)驗(yàn)前一天灌飼)28天，各實(shí)驗(yàn)組大鼠與空白對(duì)照組比較，腸黏膜結(jié)構(gòu)完整，絨毛排列整齊，黏膜上皮增生、更新明顯，AKP為強(qiáng)陽性反應(yīng)。不同取材時(shí)間，各實(shí)驗(yàn)組大鼠小腸絨毛長度及黏膜厚度均高于對(duì)照組。28天取材時(shí)，各灌糖實(shí)驗(yàn)組大鼠十二指腸絨毛長度分別為826.8±78.4μm、803.1±54.0μm和759.4±44.3μm均顯著高

3、于對(duì)照組(P＜0.05)。實(shí)驗(yàn)紹大鼠腸黏膜單位面積內(nèi)AKP陽性物所占面積的百分比均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。 2.連續(xù)灌喂半乳甘露寡糖、殼寡糖及半乳甘露寡糖+乳酸桿菌(乳酸桿菌在實(shí)驗(yàn)前一天灌飼)28天，各實(shí)驗(yàn)組大鼠與空白對(duì)照組比較，腸黏膜上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞(IEL)分布正常，PAS呈強(qiáng)陽性反應(yīng)，免疫組化染色sIgA呈強(qiáng)陽性反應(yīng)。不同取材時(shí)間，各實(shí)驗(yàn)組大鼠不同腸段腸黏膜上皮內(nèi)杯狀細(xì)胞(GC)和淋巴細(xì)胞(IEL)的數(shù)量以及腸黏膜單

4、位面積內(nèi)sIgA陽性反應(yīng)物所占面積的百分比均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。 3.連續(xù)灌喂半乳甘露寡糖、半乳甘露寡糖+殼寡糖及半乳甘露寡糖+乳酸桿菌(乳酸桿菌在實(shí)驗(yàn)前一天灌飼)28天，21天時(shí)對(duì)各組進(jìn)行大腸桿菌感染灌喂。各實(shí)驗(yàn)組大鼠與大腸桿菌感染組比較，腸黏膜結(jié)構(gòu)較完整，各實(shí)驗(yàn)組大鼠小腸絨毛長度及黏膜厚度、腸黏膜單位面積內(nèi)AKP陽性物所占面積的百分比以及不同腸段腸黏膜單位面積內(nèi)sIgA陽性反應(yīng)物所占面積的百分比均顯著高于感染組(

5、P＜0.05)。 綜上所述，連續(xù)灌飼半乳甘露寡糖、殼寡糖及半乳甘露寡糖+乳酸菌均能改善大鼠腸道黏膜結(jié)構(gòu)，增強(qiáng)小腸吸收功能，同時(shí)增強(qiáng)大鼠腸黏膜屏障作用，提高腸黏膜局部免疫力。另外，添加乳酸桿菌對(duì)半乳甘露寡糖有一定的協(xié)同作用，但存在一些不穩(wěn)定性。半乳甘露寡糖、半乳甘露寡糖與乳酸桿菌或殼寡糖聯(lián)合使用均能維持感染一定劑量大腸桿菌后大鼠的健康，抵御外源性大腸桿菌的感染。半乳甘露寡糖與殼寡糖聯(lián)合使用對(duì)大鼠抗大腸桿菌感染的作用效果優(yōu)于半乳甘露