動(dòng)物源性食品中磺胺類和多肽類抗生素殘留檢測(cè)方法學(xué)研究.pdf

1、磺胺類藥物和多肽類抗生素是畜禽養(yǎng)殖過程中最常用的兩類獸藥，經(jīng)常攝入磺胺類藥物和多肽類抗生素殘留的食品，會(huì)造成體內(nèi)微生物系統(tǒng)失衡，產(chǎn)生抗藥性，若蓄積含量過高，還會(huì)造成腎毒性、耳毒性等毒副作用。許多國(guó)家加強(qiáng)了對(duì)磺胺類藥物和多肽類抗生素的監(jiān)控，并分別制定了動(dòng)物源性食品中磺胺類藥物和多肽類抗生素的最大殘留限量(MRL，0.01 mg/kg～0.1 mg/kg)，多肽類和磺胺類藥物的檢測(cè)方法研究也得到重視。近幾年來，國(guó)內(nèi)外學(xué)者先后開展了動(dòng)物源性食

2、品中磺胺類藥物殘留檢測(cè)方法的研究。然而到目前為止，這些方法尚不能完全覆蓋到當(dāng)前生產(chǎn)實(shí)際中涉及的磺胺類藥物，如氨苯磺胺和磺胺乙氧噠嗪；而且現(xiàn)有的檢測(cè)方法其檢出限仍不能滿足國(guó)際上對(duì)同類藥物0.01 mg/kg檢出限的要求。此外，目前還未見同時(shí)檢測(cè)動(dòng)物源性食品中5種多肽類檢測(cè)方法的報(bào)道，也沒有相關(guān)檢測(cè)方法的標(biāo)準(zhǔn)。因此，針對(duì)目前國(guó)際上缺乏的檢測(cè)方法，以及我國(guó)食品出口受國(guó)外技術(shù)壁壘的限制和國(guó)內(nèi)獸藥使用的具體情況，本研究以動(dòng)物源性食品為研究對(duì)象，通

3、過對(duì)液相參數(shù)、質(zhì)譜參數(shù)、流動(dòng)相配比、前處理方法的優(yōu)化分別建立了動(dòng)物源性食品中24種磺胺類藥物、5種多肽類抗生素殘留的液相色譜－質(zhì)譜/質(zhì)譜檢測(cè)方法，主要研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下：
　　 (1)優(yōu)化了各個(gè)方法的前處理技術(shù)，采用簡(jiǎn)單的傳統(tǒng)液液萃取方法將復(fù)雜樣品基質(zhì)凈化，在液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜提取離子流圖上無干擾，節(jié)省了前處理耗費(fèi)的時(shí)間，降低了前處理成本。
　　 (2)研究了牛奶、雞肉、牛肉、豬肉、羊肉、蜂蜜6種基質(zhì)中24種磺胺類藥物的

4、UPLC-MS/MS檢測(cè)方法，此方法在10 min內(nèi)完成一個(gè)樣品的檢測(cè)，24種磺胺類藥物的質(zhì)量濃度在1μg/kg～200μg/kg的范圍內(nèi)，濃度與其峰面積呈良好的線性，相關(guān)系數(shù)(r2)為0.995～0.999。方法檢出限(LOD)為0.04μg/kg～1.35μg/kg之間，磺胺二甲基異嘧啶和磺胺對(duì)甲氧嘧啶為0.04μg/kg，磺胺硝苯為1.35μg/kg。在5μg/kg、10μg/kg、20μg/kg三個(gè)添加濃度回收率為61.4％～1

5、20％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于18.9％。
　　 (3)研究了牛奶、雞肉、牛肉、豬肉、羊肉、蜂蜜6種基質(zhì)中24種磺胺類藥物的HPLC-MS/MS的檢測(cè)方法，該方法在28 min完成一個(gè)樣品的分析檢測(cè)，方法檢出限(LOD)為0.27μg/kg～2.86μg/kg。樣品含量在5μg/kg～300μg/kg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，在10μg/kg、20μg/kg、50μg/kg三個(gè)添加濃度回收率為61.9％～122％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于18.5％

6、。
　　 (4)研究了動(dòng)物源性食品牛奶、牛肉、羊肉、豬肉、雞肉中5種多肽類抗生素的HPLC-MS/MS檢測(cè)方法，結(jié)果表明：5種多肽類抗生素在25μg/kg、50μg/kg、100μg/kg三個(gè)添加濃度回收率為75.1％～120.％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于15.7％；方法檢出限0.10μg/kg～5.57μg/kg，符合目前國(guó)際殘留限量檢測(cè)的要求。
　　 本研究開發(fā)的檢測(cè)方法前處理操作快速簡(jiǎn)單，可重復(fù)性好，可滿足國(guó)內(nèi)外對(duì)動(dòng)物源性