無芒雀麥種質(zhì)資源遺傳多樣性分析.pdf

1、ISSR(Inter-simple Sequence Repeat Polymorphic DNA)是一種新型的以微衛(wèi)星重復(fù)序列作為引物檢測(cè)物種多態(tài)性的DNA分子標(biāo)記技術(shù)，具有重復(fù)性好，多態(tài)性豐富，共顯性的特點(diǎn)。無芒雀麥(Bromus inermis)為長(zhǎng)壽根莖型多年生草本植物禾本科草類，又稱無芒草，禾萱草。具有營養(yǎng)價(jià)值高、產(chǎn)量大、適口性好、利用季節(jié)長(zhǎng)、耐寒耐旱、耐放牧、適應(yīng)性強(qiáng)、根莖發(fā)達(dá)、再生性強(qiáng)、根部蔓生地下莖、易結(jié)成草皮，是建立人

2、工草場(chǎng)和環(huán)保固沙的主要草種。本研究利用ISSR分子標(biāo)記技術(shù)分析69份無芒雀麥種質(zhì)資源的遺傳多樣性，旨在為無芒雀麥遺傳資源的鑒定，優(yōu)良品質(zhì)資源的發(fā)掘、改良以及在雜種優(yōu)勢(shì)育種上的應(yīng)用提供參考。主要結(jié)果如下：
　　1.通過對(duì)模板DNA濃度、Taq DNA聚合酶用量、引物濃度、退火溫度等因素的研究，建立了適合無芒雀麥基因組DNA的ISSR技術(shù)擴(kuò)增體系：25μL體系中含10×PCR Buffer3μL，MgCl24μL，dNTPs（各2.5

3、mmol/L）2μL，模板DNA10-30ng，Taq DNA聚合酶1.0μL，引物（10 nmol/L）1μL。
　　2.從62條引物中篩選出19條多態(tài)性高、條帶清晰、分布均勻的引物用于材料分析，共擴(kuò)增出可統(tǒng)計(jì)條帶109條，每個(gè)引物產(chǎn)生1到10個(gè)位點(diǎn)，其中104條多態(tài)性條帶，多態(tài)性位點(diǎn)占95.41％。
　　3.用POPGENE32分析軟件對(duì)無芒雀麥遺傳多樣性進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果表名：69份無芒雀麥材料總的Nei's基因多樣性