根結(jié)線蟲生防菌的篩選及其生物有機(jī)肥研制.pdf

1、根結(jié)線蟲(Meloidogyne sp.)嚴(yán)重危害世界農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。隨著溫室大棚的推廣,根結(jié)線蟲病發(fā)生比以往更加廣泛和嚴(yán)重.由于根結(jié)線蟲體壁可保護(hù)其免受侵害,而且根結(jié)線蟲寄主廣泛,幾乎涵蓋所有農(nóng)作物,所有對(duì)根結(jié)線蟲的防治非常困難?；瘜W(xué)方法防治根結(jié)線蟲雖然可以達(dá)到較好的防治效果,但是化學(xué)農(nóng)藥危害環(huán)境及人類健康,故已逐漸被限制使用.物理防治(如曬田)和農(nóng)業(yè)防治(如輪作、抗病品種)與化學(xué)防治相比較為安全,但受到多種自然條件的制約且防治效果一般.生

2、物防治方法對(duì)環(huán)境影響甚微,成為最有潛力的替代方法.本研究意在篩選根結(jié)線蟲高效拮抗菌,研制有效防治根結(jié)線蟲生物有機(jī)肥,并且評(píng)價(jià)其溫室和田間條件下的防治效果.
　　 本研究基于以下假設(shè):若細(xì)菌可將根結(jié)線蟲體壁中的膠原蛋白分解,那么二齡幼蟲(J2)的活性和侵染能力都會(huì)降低,甚至死亡.本文利用膠原蛋白酶選擇性培養(yǎng)基從土壤中篩選得到的兩株可產(chǎn)生膠原蛋白酶的細(xì)菌菌株QL17和ZY5.在明膠培養(yǎng)基培養(yǎng)48h后,QL17和ZY5茵落直徑分別為3

3、.67 mm和6.60 mm,明膠水解圈分別為16.8mm和22.5mm。分別用QL17和ZY51/5發(fā)酵液處理J2,48h后J2死亡率分別達(dá)52.49％和65.52%.依據(jù)伯杰細(xì)菌鑒定手冊(cè)和常見細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊(cè)的方法,經(jīng)生理生化特性和16S rDNA鑒定,確定QL17和ZY5均為巨大芽孢桿菌(Bacillusmegaterium).
　　 通過溫室番茄盆栽試驗(yàn)評(píng)價(jià)拮抗菌對(duì)根結(jié)線蟲的生物防治效果.以腐熟豬糞和菜粕微生物酶解混合物

4、為原料,分別制成含不同拮抗菌量大于108CFU·g-1生物有機(jī)肥.結(jié)果表明,QL17和ZY5對(duì)應(yīng)生物有機(jī)肥處理與對(duì)照處理相比,根結(jié)指數(shù)顯著降低,對(duì)根結(jié)線蟲病相對(duì)防治效果分別可達(dá)63.5%和48.9%;處理60d后,土壤J2密度均降低45%;每克新鮮根系含蟲卵數(shù)分別減少27%和24%.說明含拮抗茵QL17和ZY5的生物有機(jī)肥對(duì)根結(jié)線蟲侵染和繁殖均有一定抑制作用.
　　 田間試驗(yàn)在根結(jié)線蟲嚴(yán)重發(fā)病的甜瓜田中進(jìn)行.利用根結(jié)線蟲拮抗菌X

5、5、BTG以及木霉菌株(本實(shí)驗(yàn)室提供)制成的三種不同生物有機(jī)肥料.將以上三種生物有機(jī)肥按體積比1:1:1混合制成第四種生物有機(jī)肥.試驗(yàn)結(jié)果表明,無機(jī)肥對(duì)照田塊根結(jié)線蟲病發(fā)生嚴(yán)重,而施用生物有機(jī)肥田塊發(fā)病率降低,最高防治率達(dá)81.1%;施用生物有機(jī)肥后,土壤中J2密度,卵塊中卵數(shù)和根系卵密度均顯著減少;此外,生物有機(jī)肥處理與常規(guī)肥料處理的土壤線蟲DGGE圖譜明顯不同,分別歸于兩個(gè)聚簇,表明土壤線蟲群落結(jié)構(gòu)受到施用含根結(jié)線蟲拮抗菌的生物有機(jī)