飼料中展青霉素測(cè)定方法及其在飼料中污染情況的研究.pdf

1、展青霉素是多種霉菌產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物，廣泛存在于食品和飼料中，對(duì)動(dòng)物具有多種毒性，包括神經(jīng)毒性、細(xì)胞毒性、遺傳毒性等。飼料中展青霉素對(duì)動(dòng)物的危害引起了人們的注意。本研究的目的是建立檢測(cè)配合飼料和飼料原料中展青霉素含量的高效液相色譜法，并進(jìn)一步調(diào)查我國(guó)飼料中展青霉素污染情況，為我國(guó)制定相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)提供技術(shù)及數(shù)據(jù)支持。主要研究結(jié)果如下：
　　 高效液相色譜法的建立：將樣品粉碎過40目篩后混勻，加乙腈/水(4：1)提取，經(jīng)離心，取5mL上

2、清液于40℃條件下濃縮近干，加入0.5mL流動(dòng)相，渦旋混勻，用0.45μm濾膜過濾后上機(jī)。使用C18反相色譜柱，在檢測(cè)波長(zhǎng)為276nm，柱溫為30℃,進(jìn)樣量20μL，流動(dòng)相流速為1.0mL/min條件下檢測(cè)樣品，展青霉素保留時(shí)間約10min。本試驗(yàn)樣品中展青霉素檢出限為2.5μg/kg，定量限為8.5μg/kg。展青霉素濃度在0.1～4μg/mL與峰面積呈良好的線性關(guān)系，線性方程為y=127793x+854.16,R2=0.9999。蘋

3、果渣、麥芽根、DDGS、玉米、次粉、酒糟、配合料、小麥和米糠在添加50μg/kg展青霉素后回收率為66.2％～89.4％，平均為73.8％；添加250μg/kg展青霉素后回收率為76.1％～92.7％，平均為82.9％；添加500μg/kg展青霉素后回收率為83.3％～97.7％，平均為90.0％。平行間變異系數(shù)為5.0％～10.1％。用展青霉素含量不同的3個(gè)樣品進(jìn)行精密度試驗(yàn)，結(jié)果平行間變異為6.3％～12.2％，重現(xiàn)性變異為6.7％

4、～10.4％。三個(gè)水平再現(xiàn)性的變異系數(shù)分別為9.5％，6.9％,5.5％。
　　 飼料中展青霉素含量測(cè)定結(jié)果：采集了154個(gè)飼料及原料樣，用高效液相色譜法檢測(cè)了其中展青霉素的含量。所有樣品PAT檢出率為32.4％，平均含量為152.3μg/kg。玉米、玉米蛋白粉、玉米皮、麥類籽實(shí)、面粉、白酒糟未檢出。蘋果渣檢出率最高，為90.9％；其次是麩皮、麥芽根和啤酒糟分別為80.0％、75.0％和75.0％；配合料檢出率20.4％。檢出率

5、最高的蘋果渣檢出水平并不是最高，檢出范圍為50.1～482.9μg/kg，平均含量為173.3μg/kg。而DDGS平均含量最高，為514.9μg/kg,檢出范圍為545.4～1636.2μg/kg；其次是米糠，平均含量為232.0μg/kg，檢出范圍為19.3～1289.0μg/kg。用薄層色譜法進(jìn)行半定量驗(yàn)證，結(jié)果高于薄層色譜法檢出限(125μg/kg)的檢出樣品檢出范圍與高效液相色譜法檢出結(jié)果一致。
　　 本研究建立的高效