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文檔簡介
1、新城疫(Newcastle disease,ND)是威脅養(yǎng)禽業(yè)的一種重要傳染病,給養(yǎng)禽業(yè)造成巨大的損失,國際獸醫(yī)局將其與高致病性禽流感一起列為危害養(yǎng)禽業(yè)的必須報告的疾病。自1997年以來,華南和華東地區(qū)部分省市發(fā)生了新城疫病毒(Newcastledisease virus,NDV)感染鵝的病例,雖然各地采取了積極的防治措施,但該病仍然蔓延、流行。本研究對獲得的抗NDV F蛋白單克隆抗體是否能夠?qū)Σ煌瑏碓吹男鲁且卟《具M(jìn)行了分析,并初步建立
2、了快速檢測鵝源新城疫病毒的方法,為更好地診斷、防控新城疫打下基礎(chǔ)。 采用感染NDV F48E8的雞胚成纖維細(xì)胞建立了間接免疫熒光試驗,對本室保存的抗NDV F蛋白的原始雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)、亞克隆,篩選出12株能穩(wěn)定分泌抗NDV F蛋白的陽性雜交瘤細(xì)胞株,分別命名為NDV-F1B4、NDV-F4B11、NDV-F5F3、NDV-F4C1、NDV-F2H10、NDV-F6F8、NDV-F4H10、NDV-F ID10、NDV-F2F
3、12、NDV-F4D9、NDV-F5C6、NDV-F6C4,并通過間接免疫熒光試驗測定了所獲得的12株抗NDV F蛋白單抗腹水的效價,IFA效價在1:1600到1:12800;8株單抗屬于IgG2a,2株單抗屬于IgG2b: IgM和IgG1各1株;中和試驗證明,12株抗NDV F單克隆抗體中,3株單抗有一定程度的中和價,其中單抗NDV-F4D9的中和能力最強(qiáng):所有單抗在Western blot試驗中均能識別不同來源NDV的F蛋白。
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