龍眼多糖的提取純化及其抗氧化活性研究.pdf

1、龍眼是我國南方主要的亞熱帶水果之一,具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和保健價(jià)值。現(xiàn)代藥理研究表明,龍眼果肉具有抗衰老、降血脂、抗癌、抗氧化等生物活性。本研究系統(tǒng)地研究了龍眼多糖的提取、分離純化工藝,并對(duì)龍眼多糖的結(jié)構(gòu)和體外抗氧化活性進(jìn)行了初步探索。
　　 本研究采取超聲波輔助法提取龍眼多糖,在單因素的基礎(chǔ)上,利用響應(yīng)面分析方法對(duì)龍眼多糖提取工藝進(jìn)行優(yōu)化,其最佳提取條件為：浸提溫度60℃,超聲波功率161.414W,浸提時(shí)間31.111min,

2、液料比19.9697,多糖浸提率的理論最大值為19.96％。超聲波輔助提取法比傳統(tǒng)熱水提取法的多糖浸提率略高,綜合考慮時(shí)間和能耗等因素,采用超聲波輔助提取較好。為了分離、純化龍眼多糖,本研究首先采用Sevag法、TCA法脫蛋白,并對(duì)這兩種方法的脫蛋白效果進(jìn)行了比較,然后對(duì)樹脂脫色、雙氧水脫色和活性碳脫色工藝進(jìn)行研究,結(jié)果表明,TCA法的脫蛋白效果較好,可達(dá)到79.18％,大孔吸附樹脂XDA-1的脫色效果明顯優(yōu)于雙氧水脫色和活性碳脫色。在

3、此基礎(chǔ)上,采用DEAE-纖維素柱層析和Sephadex G-100柱層析對(duì)龍眼多糖進(jìn)一步純化,結(jié)果分離出三個(gè)龍眼多糖組分并分別命名為L(zhǎng)PS-1-A、LPS-1-B和LPS-2,其中,在LPS-2洗脫曲線范圍內(nèi)還檢測(cè)到一個(gè)較小的蛋白質(zhì)洗脫峰,表明LPS-2可能是一種糖-蛋白復(fù)合物。紫外光譜分析、凝膠柱層析及凍融實(shí)驗(yàn)均表明LPS-2是一種均一多糖。由于LPS-1-A、LPS-1-B含量較少,后續(xù)試驗(yàn)僅對(duì)LPS-2進(jìn)行研究。
　　 紅

4、外光譜分析結(jié)果表明LPS-2是一種具乙酰氨基結(jié)構(gòu)的β型吡喃多糖。利用氣相色譜法對(duì)混合標(biāo)準(zhǔn)單糖和LPS-2水解衍生物進(jìn)行分析,結(jié)果顯示LPS-2是一種酸性雜多糖,由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖和半乳糖組成,摩爾比為鼠李糖:阿拉伯糖:木糖:半乳糖=1:2.59:4.43:2.25。利用硫酸-咔唑法對(duì)LPS-2的糖醛酸含量進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果表明LPS-2的糖醛酸含量較低,僅為4.3％。本研究從清除1,1-二苯基-2-苦肼基自由基(DPPH·)、羥基自由

5、基(·OH)和超氧陰離子(O-2·)三個(gè)方面分別對(duì)龍眼粗多糖(CLPS)、Sevag法脫蛋白制得的龍眼粗多糖半純品(SLPS)、TCA法脫蛋白制得的龍眼粗多糖半純品(TLPS)和LPS-2的抗氧化能力進(jìn)行初步研究。結(jié)果顯示,龍眼多糖對(duì)DPPH·和·OH有較強(qiáng)的清除能力,而對(duì)O-2·的清除效果不明顯;其中,多糖純度越高,清除DPPH活性也越強(qiáng);對(duì)于·OH和O-2,SLPS活性最強(qiáng),LPS-2活性最弱,說明雜蛋白抑制了清除·OH、O-2·活