不同松林根際促生細(xì)菌的分離、篩選及其促生效應(yīng)研究.pdf

1、植物根際促生細(xì)菌（Plant growth-promoting rhizobacteria，PGPR）具有固氮、解磷、解鉀及分泌激素等生物活性。利用微生物固氮、解磷、解鉀的作用促進(jìn)植物生長，彌補(bǔ)土壤營養(yǎng)的不足，已成為當(dāng)前國內(nèi)外的研究熱點(diǎn)。但這方面的研究多集中在農(nóng)作物上，關(guān)于林木根際促生細(xì)菌的研究報(bào)道尚少。本試驗(yàn)采用平板稀釋法對(duì)廣西南寧市郊區(qū)的濕地松、加勒比松、人工馬尾松和飛播馬尾松4種松林的根際促生細(xì)菌進(jìn)行分離篩選。運(yùn)用乙炔還原法（AR

2、A）測(cè)定固氮菌的固氮酶活性；通過測(cè)定菌株在固體平板以及液體培養(yǎng)基中的解無機(jī)磷能力，篩選解無機(jī)磷菌；通過測(cè)定菌落周圍產(chǎn)生解有機(jī)磷圈的大小，對(duì)解有機(jī)磷菌的解有機(jī)磷能力進(jìn)行比較；采用火焰分光光度計(jì)測(cè)定解鉀菌的解鉀能力，篩選出生物活性較強(qiáng)的菌株。探討振蕩培養(yǎng)前后培養(yǎng)液pH值和解磷、解鉀量的關(guān)系，研究促生細(xì)菌的接種效應(yīng)，同時(shí)對(duì)生物活力強(qiáng)的菌株進(jìn)行16S rDNA序列測(cè)定，并在Genbank上進(jìn)行比對(duì)分析，初步確定菌株的分類地位。
　　 主

3、要研究結(jié)果如下：
　　 （1）不同松林的根際促生細(xì)菌總量差異明顯，加勒比松林最多，人工馬尾松林最少，其他兩種松林相差不大；各類根際促生細(xì)菌數(shù)量在不同松林間均有顯著性差異；不同松林的根際促生細(xì)菌數(shù)量都以固氮菌最多，解鉀菌次之，解無機(jī)磷菌最少；4種松林中，不同松林兩兩間根際促生細(xì)菌的綜合效應(yīng)差異均達(dá)顯著性水平；主成分分析結(jié)果表明，不同松林土壤肥力的排序是：飛播馬尾松>濕地松>加勒比松>人工馬尾松。
　　 （2）根際促生細(xì)菌的

4、生物活力測(cè)定結(jié)果顯示，固氮菌N4和N9菌株具有較強(qiáng)的固氮酶活性，其固氮酶活性分別為260.975 nmolC2H4/hL和149.787 nmolC2H4/hL：解無機(jī)磷菌P3、P1菌株的解無機(jī)磷能力較強(qiáng)，解無機(jī)磷量分別為7.00μg/ml和3.87μg/ml；解有機(jī)磷菌YP27菌株的解有機(jī)磷能力最強(qiáng)，解有機(jī)磷圈面積為5.29c㎡，遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于其他菌株；解鉀菌K6菌株具有較強(qiáng)的解鉀能力，解鉀量為2.3μg/ml。解無機(jī)磷菌和解鉀菌生物活力的

5、定量測(cè)定中，它們的pH值下降與解無機(jī)磷量、解鉀量的增加都存在正相關(guān)關(guān)系，其中，解無機(jī)磷菌的解無機(jī)磷能力與pH值的下降達(dá)到極顯著相關(guān)關(guān)系。
　　 （3）對(duì)篩選出生物活力強(qiáng)的PGPR菌株進(jìn)行16S rDNA序列測(cè)定，結(jié)果分析表明：固氮菌以腸桿菌屬（Enterobacter sp．）為主，占44.4％，另外還有根瘤菌屬（Rhizobium tropici）、土壤桿菌屬（Agrobacterium tumefaciens）、伯克霍爾德氏

6、菌屬（Burkholderia sp．）和歐文菌屬（Erwinia sp．）；解無機(jī)磷菌以假單胞菌屬（Pseudomonas sp．）為主；解鉀菌均為伯克霍爾德氏菌屬，各菌株的16S rDNA序列已在GenBank上注冊(cè)。
　　 （4）根際促生細(xì)菌回接試驗(yàn)結(jié)果表明，10處理的綜合效應(yīng)最好，即接種主菌為N11的處理綜合效應(yīng)最好，其對(duì)苗木生長促進(jìn)、根際微環(huán)境的改進(jìn)綜合作用最大。試驗(yàn)篩選出N11、P9、K8分別為最好的固氮菌、解無機(jī)磷