新藥臨床前藥理學(xué)評價評價

1、新藥臨床前藥理學(xué)評價,蔣建敏中山大學(xué)藥學(xué)院藥理與毒理學(xué)實驗室,,http://www.sda.gov.cnhttp://www.fda.gov/,,新藥評價,新藥評價是指新藥從發(fā)現(xiàn)到批準(zhǔn)投產(chǎn)上市，從藥學(xué)、藥理學(xué)、毒理學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)等各方面的系統(tǒng)評價過程。上市后藥品應(yīng)用的管理監(jiān)督追蹤也是新藥評價過程的延續(xù)。所以，新藥評價的全過程是一項多學(xué)科、多部門協(xié)作才能完成的復(fù)雜的系統(tǒng)工程。,新藥評價的內(nèi)容：,尋找并發(fā)現(xiàn)新藥后，就要根據(jù)新藥評價的

2、內(nèi)容逐一進(jìn)行研究。根據(jù)我國《藥品注冊管理辦法》確定該完成哪些內(nèi)容的實驗研究。新藥評價的內(nèi)容可按學(xué)科來分和藥品注冊管理辦法的具體要求來分。,一. 按評價學(xué)科分,1. 藥學(xué)評價：2. 臨床前藥理學(xué)評價：3. 臨床前毒理學(xué)評價：4. 臨床藥理學(xué)評價：,1. 藥學(xué)評價主要內(nèi)容,名稱、結(jié)構(gòu)、分子式、理化性質(zhì)、合成路線和工藝、制劑處方和制作工藝、,定性鑒別、含量測定、穩(wěn)定性試驗、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、起草說明等。,2. 臨床前藥理學(xué)評價

3、主要內(nèi)容,1) 有主要藥效學(xué)，一般要求有兩種動物、兩種以上方法、兩個途徑（至少一種是臨床給藥途徑）、三個劑量、空白對照、陽性對照和模型對照等；2) 一般藥理學(xué)，一般要求2~3個有效劑量、臨床給藥途徑、至少觀察對神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)的影響；3) 藥代動力學(xué)，一般要求3個劑量，提供常規(guī)藥動學(xué)參數(shù)、摸室類型和分布排泄試驗。,3. 臨床前毒理學(xué)評價主要內(nèi)容,有急性毒性、長期毒性、特殊毒性、局部用藥毒性、過敏試驗、刺激性試

4、驗、藥物依賴性試驗。,4. 臨床藥理學(xué)評價：,臨床試驗分為I、II、III、IV期。,I期臨床試驗：,初步的臨床藥理學(xué)及人體安全性評價試驗。觀察人體對于新藥的耐受程度和藥代動力學(xué)，為制定給藥方案提供依據(jù)。,II期臨床試驗：,治療作用初步評價階段。其目的是初步評價藥物對目標(biāo)適應(yīng)癥患者的治療作用和安全性，也包括為III期臨床試驗研究設(shè)計和給藥劑量方案的確定提供依據(jù)。此階段的研究設(shè)計可以根據(jù)具體的研究目的，采用多種形式，包括隨機(jī)盲法對照臨床

5、試驗。,III期臨床試驗：,治療作用確證階段。其目的是進(jìn)一步驗證藥物對目標(biāo)適應(yīng)癥患者的治療作用和安全性，評價利益與風(fēng)險關(guān)系，最終為藥物注冊申請的審查提供充分的依據(jù)。試驗一般應(yīng)為具有足夠樣本量的隨機(jī)盲法對照試驗。,IV期臨床試驗：,新藥上市后應(yīng)用研究階段。其目的是考察在廣泛使用條件下的藥物的療效和不良反應(yīng)，評價在普通或者特殊人群中使用的利益與風(fēng)險關(guān)系以及改進(jìn)給藥劑量等。,二. 按新藥注冊申請進(jìn)行申報,藥品注冊申請包括:

6、 1. 新藥申請、 2. 仿制藥申請、 3. 進(jìn)口藥品申請 4. 補(bǔ)充申請 5. 再注冊申請,1. 新藥申請,是指未曾在中國境內(nèi)上市銷售的藥品的注冊申請。對已上市藥品改變劑型、改變給藥途徑、增加新適應(yīng)癥的藥品注冊按照新藥申請的程序申報。,2. 仿制藥申請,是指生產(chǎn)國家食品藥品監(jiān)督管理局已批準(zhǔn)上市的已有國家標(biāo)準(zhǔn)的藥品的注冊申請；但是生物制品按照新藥申請的

7、程序申報。,3. 進(jìn)口藥品申請,是指境外生產(chǎn)的藥品在中國境內(nèi)上市銷售的注冊申請。,4. 補(bǔ)充申請,是指新藥申請、仿制藥申請或者進(jìn)口藥品申請經(jīng)批準(zhǔn)后，改變、增加或者取消原批準(zhǔn)事項或者內(nèi)容的注冊申請。,5. 再注冊申請,是指藥品批準(zhǔn)證明文件有效期滿后申請人擬繼續(xù)生產(chǎn)或者進(jìn)口該藥品的注冊申請。,The drug discovery pipeline,,Discovery,,IND,,Phase 1,,Phase 2,,Phase 3,NDA,

8、Phase 4,Preclinical pharmacology,,,Preclinical safety,,clinical pharmacology & safety,,,,臨床前藥理學(xué)評價是新藥評價的核心內(nèi)容。一個化合物在結(jié)構(gòu)確定、合成路線基本固定、也有一定穩(wěn)定性和相當(dāng)數(shù)量的基礎(chǔ)上就要開始臨床前藥理學(xué)的系統(tǒng)評價。內(nèi)容有主要藥效學(xué)、一般藥理學(xué)、藥代動力學(xué)和藥理作用機(jī)制研究。,臨床前藥理學(xué)研究的目的,確證一個化合物是

9、否有防治或診斷疾病的作用，即是否有效，有效程度如何，有效范圍多大，和目前臨床應(yīng)用公認(rèn)的已知藥相比有何特色；在有效劑量范圍內(nèi)對機(jī)體的其他系統(tǒng)，如心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)等有何影響；藥物在體內(nèi)的高峰濃度多大，達(dá)峰時間多長，作用持續(xù)時間多久，半衰期和生物利用度又如何；其作用機(jī)制是否和老藥一樣還是另有特點等等均需通過實驗來證明。總之，為新藥申報臨床提供可靠的實驗藥理學(xué)資料，為臨床應(yīng)用范圍提供實驗依據(jù)。,第一節(jié) 臨床前藥

10、理學(xué)評價　　　 的意義和要求,,一. 臨床前藥理學(xué)評價的意義,1. 新藥評價就是要為臨床提供有效、安全、優(yōu)質(zhì)而穩(wěn)定的新藥。2. 臨床前藥理評價還為尋找新藥和開發(fā)新藥提供重要線索。,,只有通過臨床前的系統(tǒng)藥理評價才有可能申報臨床研究。通過臨床前藥理學(xué)評價，就了解了該藥的作用強(qiáng)度、用量大小、可能的毒副作用以及對機(jī)體系統(tǒng)可能會帶來什么影響；通過藥動學(xué)資料可了解該藥在機(jī)體的分布情況，哪個器官或組織含量最高，在體內(nèi)是如何代謝、轉(zhuǎn)化和排泄

11、的，半衰期多長，作用起始及高峰時間、維持多久；這將為臨床用藥方案的設(shè)計，用藥個體化提供重要的參考依據(jù)。上述這些都是臨床大夫極想了解和必須知道的信息，否則就很難安全有效用于病人。,,如通過藥理學(xué)評價就知道該藥在作用相同藥物中的地位，有何特色，是否有進(jìn)一步進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造的價值；藥理學(xué)評價就可以了解該藥在體內(nèi)是原型起作用，還是代謝物起作用，若是后者則可考慮進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造，研究更好的化合物，還可進(jìn)行劑型改革的研究，這也是新藥之一種；一般藥理學(xué)研

12、究就有可能發(fā)現(xiàn)該藥新的作用，從而開發(fā)該藥應(yīng)用的新領(lǐng)域，藥理作用機(jī)制的研究則有可能發(fā)現(xiàn)新作用類型的藥物，從而合成系列化合物，這比發(fā)現(xiàn)一個老作用類型的藥物還有意義。,臨床前藥理評價的基本要求,1.課題負(fù)責(zé)人必須是有扎實的基礎(chǔ)理論知識、有相當(dāng)知識面的、有豐富實踐經(jīng)驗的藥理毒理學(xué)家，并熟悉新藥審批辦法的有關(guān)規(guī)定，尤其是臨床前藥理、毒理學(xué)的有關(guān)規(guī)定。研究人員應(yīng)經(jīng)過專門培訓(xùn)，技術(shù)熟練，操作準(zhǔn)確，觀察仔細(xì)，作風(fēng)踏實，這樣結(jié)果才能可靠。試驗者應(yīng)在完整整

13、潔實驗記錄上簽字，以供課題負(fù)責(zé)人或單位主管領(lǐng)導(dǎo)的檢查。必要時還應(yīng)接受藥政部門的抽查。,臨床前藥理評價的基本要求,2. 受試藥物結(jié)構(gòu)確定、制備工藝基本穩(wěn)定，藥物或制劑基本穩(wěn)定，并符合臨床研究用藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，最好能提供與臨床前其他基礎(chǔ)研究質(zhì)量同一的藥品。所用試劑應(yīng)表明批號、廠家和規(guī)格要求。,臨床前藥理評價的基本要求,3. 實驗動物應(yīng)符合國家科委規(guī)定的等級動物要求。一般用正常成年動物，必要時可用特定年齡、性別的動物和特定的模型動物。,臨

14、床前藥理評價的基本要求,4. 實驗儀器、設(shè)備應(yīng)符合要求，寫明廠家、規(guī)格。要能保持正常工作，并有專人定期校驗，誤差在允許范圍之內(nèi)。5. 實驗設(shè)計應(yīng)遵循科學(xué)研究的基本規(guī)律，按隨機(jī)、對照和重復(fù)的原則進(jìn)行設(shè)計。,臨床前藥理評價的基本要求,6. 實驗記錄要盡量采用客觀的儀器記錄，做到表格化。觀察指標(biāo)、記錄時間、評判標(biāo)準(zhǔn)等均應(yīng)通過預(yù)試事先制訂。多人參加記錄時，應(yīng)事先訓(xùn)練，統(tǒng)一掌握標(biāo)準(zhǔn)。實驗出現(xiàn)未預(yù)見的現(xiàn)象時，應(yīng)及時記錄。實驗中的誤差應(yīng)及時發(fā)現(xiàn)，發(fā)

15、現(xiàn)差錯后應(yīng)立即在記錄中說明情況。原始記錄至少應(yīng)保存到藥品上市后二年。7. 實驗結(jié)果應(yīng)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理。結(jié)合客觀實際恰當(dāng)下結(jié)論。,第二節(jié)　主要藥效學(xué)研究,,,一個化合物首先必需有效才有可能成為藥物。所以，藥效評價是新藥評價中重要而且必須及早完成的工作。藥效評價一方面是發(fā)現(xiàn)新藥，另一方面是評選新藥。,,發(fā)現(xiàn)新藥就是用各種方法將原來作用不明的化合物的有效藥理作用暴露出來；評選新藥就是通過系列嚴(yán)密的科學(xué)設(shè)計將已發(fā)現(xiàn)有效的藥物的優(yōu)缺點弄清楚，從

16、而決定棄取。發(fā)現(xiàn)的重點是暴露有效藥，評選的重點是擇優(yōu)錄用。不使療效可疑或沒有突出優(yōu)點的藥物濫竽充數(shù)，魚目混珠，以免造成上市新藥泛濫，管理混亂的惡果。,,評選新藥主要是評價它的主要藥效作用，即從它預(yù)期用于臨床預(yù)防、診斷和治療目的藥理作用，這就是主要藥效學(xué)研究的任務(wù)。如嗎啡類化合物評價其鎮(zhèn)痛作用，抗菌素評價其殺菌作用，降壓藥評價其抗高血壓作用等。通過評價，明確受試化合物的作用強(qiáng)度和特點，與已知藥相比，有何特點，從而決定是否需要進(jìn)一步的

17、評價。在評價藥效的同時，如有可能，還應(yīng)努力闡明藥物的作用靶器官和作用機(jī)制。,一、總的要求,(一)方法1.新藥的主要藥效作用應(yīng)當(dāng)用體內(nèi)體外兩種以上試驗方法獲得證明，其中一種必須是整體的正常動物或模型動物。2.實驗?zāi)Ｐ捅仨毮芊从乘幚碜饔玫谋举|(zhì)。如果有些新藥確實無法滿足上述動物和模型要求，應(yīng)予以充分說明理由，改用其它模型。(二)指標(biāo)應(yīng)能反映主要藥效作用的藥理本質(zhì)。應(yīng)客觀，能定量或半定量。,一、總的要求,(三)劑量應(yīng)做出量效關(guān)系，盡

18、量求出ED50或有效劑量范圍。量效關(guān)系不明確的藥物應(yīng)說明原因。(四)給藥方法應(yīng)采用擬推薦臨床應(yīng)用的給藥方法。如該法在動物上無法實施時，應(yīng)予說明，改用他法。(五)對照應(yīng)有空白對照和已知標(biāo)準(zhǔn)陽性藥物或治療措施對照。,二、有關(guān)問題,(一) 動物選擇(二) 模型的建立(三) 檢測指標(biāo)(四) 測試方法(五) 劑量要求,(六) 實驗設(shè)計(七) 統(tǒng)計處理(八) 給藥途徑(九) 客觀總結(jié),(一)動物選擇,一般來說，主要藥效學(xué)實驗所

19、選擇的動物應(yīng)是品系清楚、成年健康、雌雄各半、符合實驗動物管理要求、且對藥效學(xué)反映敏感的動物。但抗肝癌或胃癌等藥效學(xué)試驗時就用有免疫缺陷的動物，如裸鼠。藥效學(xué)試驗是在動物身上進(jìn)行的，因此動物的質(zhì)量與藥效關(guān)系密切，動物的種類、品系、年齡、性別和飼養(yǎng)管理等都有影響。,1.動物的預(yù)篩,大部分動物只要選用符合實驗動物管理要求的動物就行。但有些藥理實驗還必須首先將這些動物進(jìn)行過篩，即預(yù)篩。選擇在一定藥理反應(yīng)指標(biāo)內(nèi)的動物，以免因個體差異太大而影響結(jié)果

20、的評判，然后進(jìn)行隨機(jī)分組試驗。如觀察藥物對小鼠游泳、學(xué)習(xí)記憶和抗癲癇藥的轉(zhuǎn)棒試驗等，都應(yīng)先進(jìn)行預(yù)篩。類似的還有鎮(zhèn)痛試驗用小鼠；鎮(zhèn)咳試驗用豚鼠進(jìn)行電刺激嗽時約有5％的豚鼠可對刺激無反應(yīng)或不能發(fā)生復(fù)制反應(yīng)，這些動物也應(yīng)棄去；利尿藥與抗慢性腎衰藥試驗用大鼠也需預(yù)篩，測定無蛋白尿者方可入選使用。,2. 年齡的選擇,一般選用成年動物。但有些實驗要選用年齡不同的動物。如觀察藥物對生長、發(fā)育、內(nèi)分泌等作用時，以幼年動物為好；而觀察抗衰老作用時，則

21、宜用老年動物或衰老過程較快的模型動物。病毒性心肌炎體外模型的心肌細(xì)胞需用新生3～4 天SD大鼠的心臟所得的細(xì)胞懸液，病毒性心肌炎在體模型宜用3～4周齡BABL／C 雄性小鼠，ip柯薩奇B3病毒感染而成；豚鼠致喘不僅要用純種，而且體重宜小于200g的豚鼠引喘較敏感；抗腫瘤的藥物中細(xì)胞毒類藥物藥敏試驗用大鼠宜用3～4周齡，約50～70g較宜；鴨乙型肝炎病毒試驗需用1日齡北京雛鴨；減肥藥試驗用剛斷乳的SD大鼠，約50g，用于營養(yǎng)性肥胖模型。若

22、是下丘腦性肥胖模型則用新生乳鼠，自出生頭一天起sc l5％谷氨酸鈉造模。,3. 性別的選擇,臨床前藥效學(xué)試驗通常用雌雄各半動物。但不少藥效學(xué)試驗需用雄性動物:如抗癲癇藥的癲癇模型動物；抗動脈粥樣硬化藥和調(diào)血脂藥的實驗動物；精神藥藥效試驗的動物；抗血小板聚集藥常用雄性兔和大鼠，以避免雌性動物的性周期對實驗結(jié)果的影響；抗凝血藥最好用雄性動物；中毒性心肌炎在體模型用Wistar雄性大鼠；,3.性別的選擇,觀察藥物對呼吸道分泌的影響一般用雄性

23、小鼠；利尿藥及抗利尿藥實驗用 大鼠；抗腎病藥造模用雄性大鼠、兔或犬；抗結(jié)石藥、抗前列腺增生藥和腎上腺皮質(zhì)激素類藥物的有關(guān)代謝試驗等均用雄性動物；抗痛風(fēng)關(guān)節(jié)藥動物模型用雄性大鼠和兔；抗風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎藥和抗炎免疫藥的藥效學(xué)實驗也用雄性動物；抗梅毒螺旋體藥用新西蘭含兔；抗神經(jīng)毒藥藥效學(xué)試驗一般也用雄性動物。,3.性別的選擇,有些藥效學(xué)試驗宜用雌性動物。如藥物對雌性動物內(nèi)分泌及生殖系統(tǒng)的作用當(dāng)然用雌性動物。此外，鎮(zhèn)痛藥試驗的熱板法和足跖刺激法，

24、由于陰囊部位對熱較敏感，不用雄鼠而用雌性鼠。,4. 種屬異同性,動物和人、不同動物之間、同一動物不同品系之間對藥物的反應(yīng)均有相似性的一面和差異性的另一面。正確認(rèn)識這種異同性，對正確評估藥效學(xué)評價的結(jié)果意義重大。既不因相似性而一味迷信實驗藥效學(xué)結(jié)果好壞就決定臨床療效的優(yōu)劣；也不因差異性就忽視認(rèn)真完成藥效學(xué)試驗，錯誤地強(qiáng)調(diào)最終的判斷；豈不知，一般來講，動物身上做不出藥效學(xué)結(jié)果是不能批準(zhǔn)上臨床的。新藥評價發(fā)展到今天，臨床前評價是上臨 床的

25、基礎(chǔ)和依據(jù)，必須嚴(yán)肅認(rèn)真去完成。,(1)人與動物的差異,回顧新藥評價歷史，就發(fā)現(xiàn)不少藥物在動物實驗無效，而臨床應(yīng)用不差。如環(huán)絲氨酸對動物感染結(jié)核無效，但對結(jié)核病人卻肯定有效；保泰松在動物實驗中未見有消炎作用，但對人卻有肯定療效。當(dāng)然也有相反的例子，動物實驗有效，臨床應(yīng)用無效。如芐基青霉素對動物感染有效，對人卻很差。還有對動物療效較差，而對人卻較好。如丁二醇二甲烷磺酸酯(馬利蘭、白消安)對動物白血病療效較差，但對人的慢性髓性白血病的療效卻

26、較好。,魯卡因局部應(yīng)用，對人是局麻作用，對馬卻是中樞興奮作用；肌松劑琥珀酰膽堿和十烴季銨對人呈去極化型阻斷作用，而對大鼠、兔和豚鼠卻表現(xiàn)為雙相阻斷作用；腎上腺素能誘導(dǎo)人的血小板聚集，但對大鼠無此作用；丙咪嗪對人有抗抑郁作用，對小鼠和兔無此作用；杜冷丁對人比嗎啡安全，但動物卻不如嗎啡安全；人注射組胺引起血壓升高，而大鼠和貓則血壓下降；人對催吐藥敏感，但鼠類和兔不引起嘔吐；抗5-HT藥溴麥角酰胺對大鼠的足趾浮腫有抗炎消腫作用，但對人

27、卻無此作用；別嘌呤醇治療人的痛風(fēng)、高尿酸血癥效果很好，因它能抑制黃嘌呤氧化酶，但在批準(zhǔn)上臨床時費了很長時間，因?qū)游餆o效，究其原因是人對嘌呤代謝的最終產(chǎn)物排泄的是尿酸，而其它哺乳動物是將嘌呤分解成尿囊素后排泄。,,(2)動物之間的差異,嗎啡對狗和猴引起抑制，但對老虎和貓卻引起興奮；嚙齒類動物(大鼠、家兔、豚鼠和小鼠)不引起嘔吐，但鴿子、狗和貓則對嘔吐敏感；家兔注射組織胺后引起血壓升高，而貓和大鼠則血壓降低；貓對司可林和十烴季銨呈去極

28、化型阻斷作用，而兔、豚鼠和大白鼠則常表現(xiàn)為雙相阻斷作用；治療心功能不全的藥物不宜用大鼠作藥效學(xué)試驗，因為它對強(qiáng)心甙和磷酸二酯酶抑制的強(qiáng)心反應(yīng)不敏感，而二者又常作為陽性對照藥，前者如地高辛，后者如甲腈吡啶，此外，有些新藥本身也可能屬于這二類；,(2)動物之間的差異,腎上腺素能誘導(dǎo)兔血小板聚集但不能誘導(dǎo)大鼠血小板聚集，因為大鼠血小板無PAF受體；狗無論清醒或麻醉狀態(tài)，對各種刺激(化學(xué)、機(jī)械、電、迷走神經(jīng))均敏感，可引起咳嗽反應(yīng)，而豚鼠僅

29、對化學(xué)和機(jī)械刺激敏感，大、小鼠則因變異太大而不宜采用；利尿藥和抗利尿藥實驗宜選擇大鼠或犬，不宜用小鼠或兔；抗血吸蟲藥常用小鼠、兔或犬，不宜用大鼠；解熱藥實驗宜首選兔等等。正是由于動物種屬差異性很大，因而目前趨向于采用反應(yīng)比較特異的多種所謂“專家式”動物，而不是用一兩種“全能”動物。如豚鼠常用作過敏試驗及維生素C缺乏癥試驗；家兔用于皮膚及眼的刺激試驗；鴨用于引起白內(nèi)障的藥物及病毒性肝炎治療的模型。,(3)品系之間的差異,不同種屬動

30、物對藥物反應(yīng)有差異性，就是同一種動物的不同品系有時也有藥物反應(yīng)的不同。這種反應(yīng)的差異是由遺傳因素決定的。如黑色家兔多數(shù)都有抗阿托品作用，白色家兔無此作用，因前者有控制阿托品酯酶的基因；KL系小白鼠對胰島素的耐藥性比其它系列的小白鼠高l0倍；大鼠Sprague-Dawley、Wistar、Holtzman和Long-Evans等系列，研究發(fā)現(xiàn)酶誘導(dǎo)劑苯巴比妥的作用在Long-Evans大鼠中最強(qiáng)；而丙咪嗪的抗利血平作用則以Long-Ev

31、ans最低。,(3)品系之間的差異,克服動物品系差異的辦法是采用同一品系的動物。現(xiàn)在國際上公認(rèn)的小鼠近交系約有252個品系，大鼠也有200多個品系，豚鼠和家兔也有10多個品系。如有些動物有自發(fā)疾病，這種疾病與人體疾病也有某些相同之處，可以用這些自發(fā)疾病的模型動物來評價藥物。如有多種特殊疾病的小鼠，如高癌鼠、低癌鼠、糖尿鼠、自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)、先天性肌萎縮病鼠等，可進(jìn)行特殊藥效學(xué)評價。,時辰藥理學(xué),此外，還應(yīng)注意藥物效應(yīng)在動物身上

32、的晝夜變化。時辰藥理學(xué)(Chronopharmacology)就是研究生物體的晝夜節(jié)律對藥物作用或體內(nèi)過程的影響的藥理學(xué)分支。由于機(jī)體有晝夜節(jié)律的變化，因此在晝夜節(jié)律的不同時間，給某一藥物以后，在生物利用度、排泄、血藥濃度等方面，常呈現(xiàn)一種周期性改變，因而反映在藥效和毒性上也會有節(jié)律性的變化。當(dāng)然對臨床前和臨床藥理學(xué)評價帶來影響。許多藥物，如麻醉藥、鎮(zhèn)靜藥、安眠藥、安定藥、抗驚藥、中樞興奮藥、解熱消炎藥、降壓藥、強(qiáng)心藥、抗腫瘤藥、抗菌

33、素和激素等都在藥效反應(yīng)上受到晝夜節(jié)律的影響。,(二)模型的建立,主要藥效學(xué)的評價要建立實驗動物的病理模型，本世紀(jì)以來，新藥研究開發(fā)較快的原因之一就是成功地建立了許多動物病理模型，從而開辟了實驗治療學(xué)的廣闊前景。藥效學(xué)試驗要選用合適的動物模型，所謂合適就是指能反映臨床疾病的病理生理過程，能反應(yīng)藥理作用的本質(zhì)。模型動物一般要選用與人體解剖、生理反應(yīng)和機(jī)能類似的動物，不同動物模型選擇不同的動物。,藥效學(xué)實驗動物模型(一),動物模型的治療結(jié)果

34、與人體試用結(jié)果基本相同。這占大多數(shù)，否則也就失去了制造動物模型的意義了。如抗感染動物模型(家兔的梅毒病和結(jié)核性腦膜炎，豚鼠的真菌感染模型等)；可移植性腫瘤動物模型(B16黑色素瘤，Lewis肺癌等)；小鼠鎮(zhèn)痛模型(熱板法和扭體法等)；豚鼠過敏性氣喘模型；大鼠高血壓模型(SHR自發(fā)性高血壓大鼠、腎動脈結(jié)扎型模型和Doca模型等)；寄生蟲感染模型(鼠瘧原蟲及猴瘧原蟲模型)；各種心律失常模型；糖尿病模型和胃潰瘍模型；類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎模型等等。

35、,藥效學(xué)實驗動物模型(二),無合適的模型或不大好建立，前者如銀屑病、禿發(fā)、頸椎病、骨質(zhì)增生、痔瘡、紅斑性狼瘡和視網(wǎng)膜炎等，可采用一些間接指標(biāo)，如改善皮膚微循環(huán)，測量毛發(fā)生長速度、數(shù)量與彈性，測定皮膚膠原蛋白含量及觀察眼結(jié)膜的微循環(huán)等；后者如冠心病、癲癇、慢性萎縮性胃炎等，雖然也評選了一些藥物，但與人體相比，在病原及病理上總還有相當(dāng)差距，更要經(jīng)過多種方法驗證，特別是臨床驗證后才能肯定。,藥效學(xué)實驗動物模型(三),第三種情況是有些疾病在動物

36、迄今無法建立，如神經(jīng)官能癥、精神病、眩暈癥、四肢麻木、夜尿和幻覺等?？傊畬λ幚碜饔靡唧w分析，大量查閱文獻(xiàn)，結(jié)合客觀實際進(jìn)行藥效學(xué)動物模型的試驗設(shè)計。,,藥效學(xué)動物模型，一般來說，以整體動物為好，我國藥效學(xué)指導(dǎo)原則也指出，至少有一種整體動物模型。但也并非不能用離體實驗?zāi)Ｐ?，只要特異性好，能反映藥理作用的本質(zhì)就行。如青蛙坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本可用作橫紋肌松弛藥的藥效學(xué)評選； 離體器官可以作為藥效學(xué)評選模型，在試管內(nèi)也可評選藥物的藥理作用。如

37、抗寄生蟲藥和抗微生物藥物大部分先在試管內(nèi)看藥效。很多作用于酶的藥物(單胺氧化酶抑制劑、碳酸酐酶抑制劑、膽堿酯酶抑制劑及其重活化劑)都可先在試管內(nèi)觀察它們對酶的作用強(qiáng)度和形式。,,要注意整體動物模型和各種體外模型的藥理反應(yīng)之間的差別。如很多簡單的酚化物和芳香胺在體外百分之幾的濃度就能抑制結(jié)核桿菌的生長，而在體內(nèi)無效。如果Domark不是及早在感染小鼠上做實驗，那么磺胺藥也不會被他發(fā)現(xiàn)，因后者在體外作用極弱。瘧原蟲雖有體外(惡性瘧原蟲體

38、外培養(yǎng)成功)和體內(nèi)二種方法，但主要是靠體內(nèi)；對病毒，體外過篩有效藥很多，而體內(nèi)無效。體外試驗受pH、滲透壓等因素的影響較多較大。,,為此藥理工作者對模型本身必須進(jìn)行認(rèn)真的研究，應(yīng)選擇與人體反應(yīng)比較接近的動物模型。建立模型應(yīng)根據(jù)人體發(fā)病機(jī)制來建立。如果模型本身成問題，然后對著這個錯誤的靶子去用藥，當(dāng)然得不出正確的結(jié)果來。一般來講，更強(qiáng)調(diào)整體模型。在利用體外模型評選時，需反復(fù)探討模型本身的基礎(chǔ)。一定要在體內(nèi)和體外，動物和人體的各方面效應(yīng)

39、之間不斷驗證。發(fā)現(xiàn)矛盾時再深入分析原因，從中找出比較能代表人體反應(yīng)情況的模型進(jìn)行試驗。所以，一個藥效評價往往需要用幾個模型，而且在評價工作的不同階段反復(fù)進(jìn)行。切忌單憑個別動物指標(biāo)就作出是與否的結(jié)論。要知道無效藥物用于臨床同樣是害人害己，浪費有限的資金。,在模型建立過程中要注意問題,,1. 致模劑,大部分病理動物模型都要用致模劑。不同模型、不同動物用致模劑可以不同；同一模型、不同動物，或同一實驗?zāi)Ｐ?、同一動物也可用不同致模劑。致模劑?/p>

40、選擇主要根據(jù)藥理作用、作用機(jī)制、動物的敏感性，甚至給藥途徑等綜合因素考慮。常見的致模劑有化學(xué)品、藥品、菌液、病毒、瘤細(xì)胞、寄生蟲、各種理化刺激(光、電、熱、冷、機(jī)械等)，手術(shù)結(jié)扎或器官摘除等。,,藥效學(xué)試驗具體的致模劑選擇參見新藥臨床前藥效學(xué)試驗指導(dǎo)原則和藥理學(xué)實驗方法及有關(guān)文獻(xiàn)。如發(fā)熱動物模型的致熱劑有感染性和非感染性兩種，前者有不同死菌培養(yǎng)液和內(nèi)毒素，后者如松節(jié)油和蛋白胨等；引起心律失常的致模劑有電刺激、結(jié)扎冠脈前降支和不同藥物(腎

41、上腺素、氯化鋇、烏頭堿、強(qiáng)心苷、乙酰膽堿等)。,,致模劑，尤其是化學(xué)品和藥物等，和藥物作用有量效關(guān)系一樣，模型成功與否，程度大小都與致模劑有關(guān)。有時致模劑用量過大，雖是有效藥物也未必能抗得住，如前列腺增生動物模型用丙酸睪丸素用量就要適當(dāng)，否則連陽性對照藥雌二醇也做不出陽性結(jié)果；,,有的模型也不是致模劑用量越大，模型程度就越高，如致熱劑死菌培養(yǎng)液或內(nèi)毒素，用量適中，溫度升高大于1℃就稱致模成功，若致模劑用量過大，有時不僅不再升溫，甚至有

42、的兔反而降溫，糖尿病鼠模型用四氧嘧啶用量不當(dāng)也有造成血糖下降的?？傊?，致模劑用量選擇要參考文獻(xiàn)，但更主要的是通過預(yù)試驗來決定。,2. 模型動物用麻醉劑的選擇,,,一些藥效學(xué)試驗動物模型的建立常常需要麻醉，而麻醉藥有可能對藥效學(xué)有影響，因此需盡量選擇影響小或無影響的麻醉劑。如心肌缺血實驗常常需麻醉，而麻醉本身對藥效學(xué)有影響，需用清醒動物作比較；給貓電刺激喉上神經(jīng)引咳時，麻醉藥選用氯醛糖較好，對咳嗽反射幾無影響。,,巴比妥類麻醉藥因其麻

43、醉深淺不一，變異較大，刺激閾測定值不一致，不宜連續(xù)觀察藥物的作用，麻醉過深則明顯抑制咳嗽反射，影響實驗結(jié)果；瀉藥與止瀉藥藥效學(xué)試驗用在體腸管運動強(qiáng)度描記法時需麻醉動物，麻醉藥宜選用烏拉坦，不宜用巴比妥類麻醉劑，因后者對消化道運動有抑制作用，影響實驗結(jié)果。,3. 藥物作用機(jī)制不同選用 不同動物模型,,,一種疾病往往有多種病因，也往往有多種不同藥理作用機(jī)制的藥物治療。因此雖然治療同一疾病，但不同作用機(jī)制的藥物，其藥效學(xué)試驗需用不同模型來

44、評選。如抗心律失常的許多藥物，其作用機(jī)制不同，需選用合適的動物模型才能顯示療效。如β-受體阻滯劑對腎上腺素所致的心律失常更敏感，鈉通道阻滯劑則對烏頭堿所致的心律失常更敏感；甾體類和非甾體類抗炎藥的炎癥動物模型也不完全相同；抗腫瘤藥、抗菌藥、抗真菌藥和抗寄生蟲藥也不例外，根據(jù)作用瘤譜、抗菌譜和殺蟲類別而選用不同動物模型；抗高血壓藥的作用機(jī)制有多種，選擇動物模型就要區(qū)別對待。,4. 影響致模的其它因素,動物模型制作成功與否受多種因素影響

45、，如致模劑的選擇、劑量的大小、給藥途徑及時間的確定、手術(shù)方案等往往比較重要。這里要指出的是一些易忽略的因素，如周圍環(huán)境及溫、濕度等.,,如用大鼠尾動脈間接測壓法測定大鼠血壓時常需加溫，要注明加溫的溫度和時間，因溫度高低和加溫時間的長短，甚至室溫高低均對血壓有影響；抗感染藥物實驗時，細(xì)菌、真菌或病毒等致模劑在培養(yǎng)基上長期傳代，其毒力下降，一般傳4-5代就要換代，有類似道理的是一些遺傳疾病動物，自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)、糖尿病和高癌鼠等

46、也不能總是近親繁殖下去，否則就漸漸面目全非，不是原來的模型動物了。還有些藥物的治療作用和預(yù)防作用也選不同的動物模型，如狗冠脈結(jié)扎和大鼠iv烏頭堿所致心律失常比較穩(wěn)定和持久，可供實驗治療用，其它心律失常多用作預(yù)防作用實驗。,(三) 檢測指標(biāo),動物模型確立后就要確定觀察指標(biāo)。指標(biāo)應(yīng)能反映主要藥效作用的藥理本質(zhì)。應(yīng)客觀，能定量或半定量，且要靈敏。,1. 指標(biāo)應(yīng)反映主要藥效學(xué)作用的藥理本質(zhì),,一種藥理作用可以由多種原因引起。如抗休克藥，不僅

47、引起休克的原因不同，休克的臨床癥狀也非完全一致，治療休克的不同藥物作用也各異，這方面指標(biāo)的選擇更是重要。如果是腎上腺素類抗休克，則主要是心源性休克，則心血管系統(tǒng)指標(biāo)很重要；如果是末梢血管擴(kuò)張劑則主要體現(xiàn)在改善微循環(huán)，糾正休克癥狀；如果是大量出血引起休克，則通過補(bǔ)充血容量或提高血壓來糾正休克；如果是血液系統(tǒng)障礙引起則主要是通過抗凝系統(tǒng)或纖溶系統(tǒng)活性提高來糾正；如果是感染中毒性休克，則主要是通過抗感染糾正休克。上述種種休克治療藥當(dāng)然要針

48、對性地選擇反映抗休克藥理作用的指標(biāo)才能真正得出正確的結(jié)論來。,,,不反映本質(zhì)的指標(biāo)盡量不用。相反有些指標(biāo)對藥效確實有作用的還應(yīng)增加。如抗腫瘤藥物，雖然腫瘤的大小和體重，荷瘤動物的存活率和存活期是主要指標(biāo)，必須要觀測。但是少數(shù)藥物，特別是一些基因工程藥品和中藥抗癌藥，它們不僅有直接殺傷或抑制腫瘤細(xì)胞生長的作用，而且通過調(diào)節(jié)或增強(qiáng)機(jī)體的防御功能，如免疫功能，來達(dá)到防治腫瘤的作用。確切說，這些屬于生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑或腫瘤輔助用藥。所以應(yīng)增加

49、免疫指標(biāo)的觀測，尤其是細(xì)胞免疫指標(biāo)的檢測，如巨噬細(xì)胞試驗，自然殺傷細(xì)胞NK測定，LAK細(xì)胞活性測定，誘生IL-1試驗，淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗和細(xì)胞激活因子等?？拱滩《舅幬镆膊粌H要有體內(nèi)外殺病毒試驗，也應(yīng)增加免疫指標(biāo)的檢測。,2. 指標(biāo)要客觀,動物的藥效反應(yīng)指標(biāo)分二種，一種是客觀可定量或半定量的，如計數(shù)指標(biāo)，儀器檢測有具體數(shù)字顯示，這種指標(biāo)可以計數(shù)，可進(jìn)行統(tǒng)計處理，比較可信。不少指標(biāo)有時很難反映反應(yīng)的程度，如紅斑水腫或光毒反應(yīng)，還有一些神經(jīng)

50、癥狀，屬于主觀判定不可計數(shù)的資料，不能進(jìn)行統(tǒng)計處理，此時盡量采用分級打分評定的方法，轉(zhuǎn)化成計數(shù)資料，再進(jìn)行統(tǒng)計處理?？傊?，指標(biāo)選擇盡量采用客觀的可定量的指標(biāo)，實在無法時也想法轉(zhuǎn)化成可定量的指標(biāo)。,3. 指標(biāo)要靈敏,指標(biāo)靈敏度要適當(dāng)，以免造成“假陽性”或“假陰性”。測試指標(biāo)的方法過分靈敏，不該測出的也測出了，這就是“假陽性”；如果方法靈敏度太低，該測出的也測不出，這就是“假陰性”?！凹訇栃浴钡慕Y(jié)果增加了不該入選的藥物，增加了系統(tǒng)評價的

51、負(fù)擔(dān)；“假陰性”的結(jié)果是漏掉該入選的有效藥物，非?？上АＬ貏e是有些還沒有有效藥物的疾病，損失就更難估量了?？朔凹訇栃浴焙汀凹訇幮浴钡姆椒ㄊ窃谡酱_定指標(biāo)及靈敏度以前做一些預(yù)試，篩選部分藥物，用已知陽性藥及陰性藥做對照，驗證方法是否可靠，指標(biāo)是否合適，靈敏度是否恰當(dāng)。,4. 指標(biāo)限度,不同藥物藥效學(xué)指標(biāo)的要求也不應(yīng)完全一致，如抗菌素的藥效學(xué)指標(biāo)要訂高些，因現(xiàn)有不少抗菌素可用，至少不應(yīng)低于現(xiàn)有抗菌素的水平；抗艾滋病毒藥物，指標(biāo)就應(yīng)低些，

52、原則上只要有效就行，因現(xiàn)還很少有有效的抗艾滋病藥。常見病、多發(fā)病，且已有很多藥物可用的，原則上訂高些，如心血管藥、保肝藥、胃藥等；相反，罕見病、疑難病，幾乎很少有有效藥用的，可訂低些。如抗腫瘤藥、牛皮癬等。評價老的結(jié)構(gòu)類型和作用方式的藥，指標(biāo)就應(yīng)訂得高些，反之，評價完全新的結(jié)構(gòu)或新的作用方式的藥，就應(yīng)低些。因為新結(jié)構(gòu)、新作用方式是剛發(fā)現(xiàn)的一個，還不一定是該類化合物中最佳的，深入研究可能還有潛力可挖掘。,,指標(biāo)的靈敏度會受各種對照因素

53、的影響。為了減少對照因素的影響，就必須盡量控制實驗條件，如動物的品系控制，試劑的質(zhì)量規(guī)格控制，實驗儀器和方法的操作規(guī)程控制和實驗室溫度、濕度、光線、時間等各種條件控制等。最好制訂標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，即SOP,(四) 測試方法,主要藥效學(xué)的評價不是通過一種方法或一種模型，而是要多種方法及多種模型，這樣的結(jié)果才更有預(yù)測臨床療效的作用。主要藥效學(xué)試驗應(yīng)當(dāng)用體內(nèi)、外兩種以上試驗方法獲得證明，其中一種必須是整體的正常動物或動物病理模型。這就是說至少要有

54、三種方法，即一種體內(nèi)，二種體外；或二種體內(nèi)，一種體外或三種體內(nèi)。而且I類新藥還必須有兩種動物以上試驗方法來確證其藥效。即最好有二種動物的同一模型或二種動物不同模型。系列化指標(biāo)用儀器檢測時要固定操作人員和儀器。,(五)劑量要求,藥物的療效評價離不開劑量概念。嚴(yán)格地講，藥效最終都是指在人體所能接受的劑量下藥物所產(chǎn)生的作用。如無劑量限制，尤其是在離體實驗中，如果劑量和濃度不受限制，那么藥物可產(chǎn)生多種特殊的作用，而這些作用事實上是沒有意義的。

55、,(五)劑量要求,主要藥效學(xué)的評價，重要的是在整體條件下，在接近治療劑量時所出現(xiàn)的藥效，一切分析實驗結(jié)果，無論是在什么水平、什么層次上的觀察，都必須要能在整體條件下得到反映才有意義。否則往往會得出很片面的結(jié)論，這是需要時刻注意的。,,藥效學(xué)的劑量限度有時要區(qū)別對待，對于一些沒有或很少有防治藥物的疾病：如腫瘤和艾滋病等，對藥效學(xué)劑量要慎重考慮，如果實驗藥效學(xué)確實有效，但劑量偏高可能產(chǎn)生毒副作用。這時應(yīng)綜合考慮，是否利大于弊，臨床療效可能性

56、等等，不要僅僅因動物藥效學(xué)劑量偏高而將其舍去。因為對上述兩種疾病，產(chǎn)生一些毒副反應(yīng)只要確有臨床療效也是值得的。如腫瘤壞死因子的藥效學(xué)最佳劑量接近1/3LD50但臨床確實有效，就不宜簡單否定掉。,(六)實驗設(shè)計,這里是指狹意上的實驗設(shè)計，主要指藥效學(xué)試驗中的設(shè)計要符合統(tǒng)計學(xué)要求的三原則，即隨機(jī)、對照、重復(fù)。這也是科研設(shè)計的總體三原則，否則結(jié)果就失去了科學(xué)性、可信性和可靠性。盡管目的明確、指標(biāo)客觀、劑量合適、動物健康、模型可靠，但還得重新

57、進(jìn)行。,1. 隨機(jī),即機(jī)會均等，防止抽樣誤差?？捎秒S機(jī)數(shù)表等將動物按性別分別隨機(jī)分組，而不是隨意或有意分組，應(yīng)防止將健壯靈活的動物分在一組，體質(zhì)稍差或不太靈活的分在另一組，尤其是在抗腫瘤和抗瘧藥等的研究中，這樣就可出現(xiàn)因抽樣誤差造成的結(jié)果不準(zhǔn)確。小鼠急性毒性LD50測定時也容易造成抽樣誤差。,2. 對照,即可比性，有鑒別才能比較。任何實驗，都離不開對照。沒有對照，很多實驗的結(jié)果都無法判斷?，F(xiàn)代實驗科學(xué)的顯著特點之一是有嚴(yán)密的對照設(shè)計，新

58、的科學(xué)結(jié)論都必須在與嚴(yán)格的對照作比較后才能得出。,,主要藥效學(xué)試驗必須有以下幾種對照：陽性藥對照，陰性藥對照(空白對照)，模型對照，正常對照。受試藥至少三個劑量組，加上對照組，一般來講，主要藥效學(xué)試驗要6-7個組，陽性藥的劑量按臨床劑量或毒性劑量折算宜和受試藥中劑量組相當(dāng)為宜。陽性藥的選擇應(yīng)選用公認(rèn)的，已批準(zhǔn)上市或藥典上記載的，藥理作用機(jī)制相同的藥物。否則就失去比較的意義。,,如抗血小板聚集藥，若受試藥作用機(jī)制是環(huán)氧化酶抑制劑，則用阿司

59、匹林作陽性藥對照；若受試藥作用機(jī)制是抑制TXB2合成酶，則選用咪唑；若作用機(jī)制是激活腺苷酸環(huán)化酶，則選用前列腺素E1。有時給藥途徑不同也需選用不同陽性對照藥，如抗凝血藥是注射劑，則選用肝素作陽性對照，若是口服劑則選用雙香豆素類藥物。,3. 重復(fù),即可靠性，防止偶然性。沒有重復(fù)的藥效學(xué)結(jié)果是不可靠的，經(jīng)不住別人在相同條件下的重復(fù)也是不可靠的。體外試驗和整體試驗均要重復(fù)，最好有三次的重復(fù)結(jié)果，這才有把握。只有某些特殊情況，在特定條件下

60、，有相當(dāng)?shù)倪B續(xù)動態(tài)結(jié)果才可考慮不重復(fù)。,(七) 統(tǒng)計處理,新藥藥效學(xué)研究的統(tǒng)計工作包括實驗前的設(shè)計及資料處理兩方面。良好的試驗設(shè)計能夠使試驗結(jié)果比較明確地回答所提出的問題，能夠使試驗在更少的人力、物力和時間條件下，得到精確的結(jié)果。不僅工作效率提高，也使試驗的精確性和科學(xué)性加強(qiáng)。如我國陳克恢早就有效地采用12×12拉丁方的實驗設(shè)計，在12天里比較12種強(qiáng)心藥，同時又算出上下午的差別和三位實驗者之間的誤差。這種統(tǒng)計學(xué)的運用非常值

61、得我們學(xué)習(xí)。,,要注意的是有些藥效學(xué)試驗結(jié)果用常規(guī)指標(biāo)判斷時無統(tǒng)計意義，若改變指標(biāo)則就有統(tǒng)計意義。如發(fā)熱動物模型既要發(fā)熱，又不能發(fā)熱過高而死亡，且致熱劑也未必多用就升溫加大。一般發(fā)熱動物體溫升高>1℃就稱造模成功，用藥溫度下降>1℃，則應(yīng)為有效，但統(tǒng)計處理則P >0.05，除非將n大大增加。此時若用最大降溫幅度或降溫起效時間或降溫維持時間長短來比較進(jìn)行統(tǒng)計處理，則就可能有效。統(tǒng)計處理中還要注意，如結(jié)果不符合正態(tài)分

62、布時，不宜用t檢驗，應(yīng)考慮用秩和檢驗，尤其是一些實驗結(jié)果個體差異太大時易發(fā)生這種情況。,,應(yīng)用統(tǒng)計學(xué)P 值還應(yīng)注意的一個問題是統(tǒng)計上P 值的意義是指兩組數(shù)據(jù)之間的差異有否顯著性，而這顯著性在臨床或藥理、生理學(xué)中是否有實際意義則要具體分析。如白細(xì)胞、血小板降低幾千，甚至上萬，完全有統(tǒng)計意義，但其正常值范圍就較大，仍在正常范圍內(nèi)則無病理意義。尿量改變也是如此。這在長毒試驗中更會碰到，此時關(guān)鍵要看其動態(tài)結(jié)果及重復(fù)結(jié)果如何才能決定。相反，有

63、時雖無統(tǒng)計意義，但確有實際價值，如解熱藥的降溫試驗，如總是可以降2度左右，則很有意義，但統(tǒng)計上不顯示顯著差異。,(八) 給藥途徑,,,一般來說，主要藥效學(xué)的給藥途徑宜和推薦臨床用藥途徑一致。這樣才能更好地反映藥效的價值和意義。但有時，臨床給藥途徑可以辦到，但動物上很難或根本辦不到時，應(yīng)說明理由，可以考慮采用他法。,,如麻醉動物降壓試驗或腦血流量測定等，受試藥口服給予有困難，也可用細(xì)塑料管插入十二指腸或胃中，然后關(guān)閉腹腔，等血壓穩(wěn)定后再通

64、過塑料管加藥或直接注入十二指腸；小鼠鎮(zhèn)咳藥試驗不宜ip給藥，因可干擾小鼠咳嗽反應(yīng)；抗癌藥中腹水瘤小鼠或大鼠，受試藥也不能以ip代替iv(當(dāng)臨床是iv給藥時)；抗真菌藥腹腔感染，也不宜ip給藥治療；一些內(nèi)病外治法，小兒止瀉貼劑貼于肚臍眼上，動物根本沒有肚臍眼，可考慮外貼皮膚代替；類似的還有穴位給藥、離子導(dǎo)入、氣霧吸入、某些腔道給藥(鼻腔、膽囊和陰道等)，均有探討的必要。,(九) 客觀總結(jié),主要藥效學(xué)試驗完成后就要對其的有效性、作

65、用強(qiáng)度、與臨床擬用量的關(guān)系、與陽性藥作用效果的比較、可能的毒副作用等作出明確的回答。要科學(xué)地客觀地實事求是地總結(jié)。,,有的研究人員總擔(dān)心藥效上不明顯好于陽性對照藥時不好辦，特別是申報新藥時，其實不然，評價一個新藥是全過程評價，藥效是重要方面之一，但不是唯一決定因素，其他如工藝合成、制劑配制、穩(wěn)定性、劑量用法、毒副反應(yīng)、價格銷路等綜合因素影響。陽性藥一般是經(jīng)過較長時間考驗，大家公認(rèn)的，超過它當(dāng)然好，但結(jié)論要慎重，有的試驗者不愿寫毒副反應(yīng)

66、，生怕影響新藥的價值，但如果真有毒副反應(yīng)，一定要如實寫出來，為臨床監(jiān)控藥物的毒副反應(yīng)提供依據(jù)。,(十)關(guān)于復(fù)方研究,復(fù)方是指由二個以上藥物組成的制劑。復(fù)方不同于聯(lián)合用藥。復(fù)方應(yīng)在增強(qiáng)藥效、減少毒副反應(yīng)、降低用量、改善有效時間或其他某一方面比各單藥有確切的優(yōu)點。起矯味、調(diào)色、改善穩(wěn)定性等作用的藥物屬賦形劑，按賦形劑要求進(jìn)行。,,組成復(fù)方的各單藥必須是已批準(zhǔn)生產(chǎn)的成藥。未批準(zhǔn)生產(chǎn)的新藥應(yīng)先進(jìn)行該單藥的申報，通過審批，獲得新藥證書后才可組于

67、復(fù)方中。復(fù)方藥理學(xué)研究的主要要求是通過一系列實驗確定復(fù)方組成的依據(jù)和合理性，明確復(fù)方組成藥物在藥理作用上的相互關(guān)系。評價復(fù)方藥理各項要求應(yīng)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，證明所下結(jié)論可靠。,復(fù)方制劑應(yīng)回答下列問題：,1. 藥物優(yōu)選 所選藥物在同類藥物中的優(yōu)點必須闡明，并提供實驗或文獻(xiàn)依據(jù)。2. 最佳配比 首先要說明組方理由(即用主要藥效學(xué)研究的要求選定模型及指標(biāo))，說明所選比例的依據(jù)，優(yōu)勢在哪里，這不僅要有理論根據(jù)，還要有臨床伍用依據(jù)及實驗數(shù)據(jù)，

68、要用等概率和曲線與Q50或其他方法說明此配比為最佳配比。3. 量-效關(guān)系 最佳配比確定后也需做出量-效關(guān)系來，并確定最佳劑量，為毒性、藥動學(xué)及臨床研究提供依據(jù)。,,4.拆方分析 用實驗說明每一種藥存在的必要性，或是增加療效、或是減少毒副反應(yīng)、或是減少用量、或是其他特殊優(yōu)點等。5.時效關(guān)系 組成復(fù)方后與單藥相比，在藥物作用起效時間、達(dá)峰時間、持續(xù)時間上有何特長，應(yīng)有實驗數(shù)據(jù)來證明。6.藥代影響 復(fù)方和單藥相比，在藥代動力學(xué)系