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文檔簡介
1、實驗36植物種子生命力的快速測定.TTC法一、原理TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)的氧化態(tài)是無色的,可被氫還原成不溶性的紅色三苯甲月替(TTF)。應用TTC的水溶液浸泡種子,使之滲入種胚的細胞內(nèi),如果種胚具有生命力,其中的脫氫酶就可以將TTC作為受氫體使之還原成為三苯甲月替而呈紅色,如果種胚死亡便不能染色,種胚生命力衰退或部分喪失生活力則染色較淺或局部被染色,因此,可以根據(jù)種胚染色的部位或染色的深淺程度來鑒定種子的生命力。二、材料
2、、儀器設備及試劑(一)材料:水稻、小麥、玉米、棉花、油菜等待測種子。(二)儀器設備:1.小燒杯;2.刀片;3.鑷子;4.溫箱;(三)試劑:0.12%~0.5%TTC溶液(TTC可直接溶于水,溶于水后,呈中性,pH70.5,不宜久藏,應隨用隨配)。三、實驗步驟1.將種子用溫水(約30℃)浸泡2~6h,使種子充分吸脹。2.隨機取種子100粒,水稻種子要去殼,豆類種子要去皮,然后沿種胚中央準確切開,取其一半備用。3.將準備好的種子浸于TTC試
3、劑中,于恒溫箱(30~35℃)中保溫30min。4.染色結束后要立即進行鑒定,因放久會褪色。倒出TTC溶液,再用清水將種子沖洗1~2次,觀察種胚被染色的情況,凡種胚全部或大部分被染成紅色的即為具有生命力的種子。種胚不被染色的為死種子,如果種胚中非關鍵性部位(如子葉的一部分)被染色,而胚根或胚芽的尖端不染色都屬于不能正常發(fā)芽的種子Ⅲ、碘化鉀反應法一、原理某些種子在發(fā)芽過程中,胚內(nèi)會形成和積累淀粉。淀粉在碘試劑作用下產(chǎn)生藍色反應,從而可根據(jù)
4、胚中產(chǎn)生藍色反應的程度來判斷種子的生活力。2、材料、設備及試劑(1)材料云杉、松和落葉松的種子。(2)設備玻璃板,培養(yǎng)皿,濾紙,其余用品同TTC法。(3)試劑碘一碘化鉀溶液:把1.3g碘化鉀溶解在水中,再加入0.3g結晶碘,然后定容至100mL。三、實驗步驟1.將種子在水中浸泡18h。2.取出放在墊有濕濾紙的培養(yǎng)皿內(nèi),將培養(yǎng)皿置于30℃恒溫箱中。松和云杉種子放48h,落葉松放72h。3.用刀片把胚部切下,然后浸入碘一碘化鉀溶液中20-3
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