大蕉musaabb，cv.dajiao組織培養(yǎng)物的胚性與serk表達(dá)特性的研究

1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文大蕉（Musa ABB，cv.Dajiao）組織培養(yǎng)物的胚性與SERK表達(dá)特性的研究姓名：章婷婷申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：植物學(xué)指導(dǎo)教師：黃學(xué)林20070606中山大學(xué)碩士學(xué)位論文的理想的外植體研究結(jié)論相吻合。2 、以大蕉組培苗假莖薄片為外植體分別在M B 5 + 1 0 ／l m o l ／L D i c a m b a 、M B 5+ 2 7I _ t m o l ／L 2 ，4 - D 和M S l 三個(gè)培養(yǎng)基上

2、培養(yǎng)一個(gè)月誘導(dǎo)出不同的愈傷組織用于S E R K 基因的表達(dá)分析。M B 5 含B 5 基本鹽+ 改良維生素像基酸混合物+ lI j t m o l ／LI A A 。M S l 培養(yǎng)基含M S 基本鹽+ s ．2 8 9 m o l ／LP i c l o r a m + 5 。7 1p m o F L I A A + 1 3 ．4 3I _ t m o l f L N A A 。愈傷組織的誘導(dǎo)和繼代培養(yǎng)都在黑暗條件下進(jìn)行。在含1 0

3、g m o l ／LD i c a m b a 的M B 5 培養(yǎng)基上所形成的是黃色、松脆、含水量高的愈傷組織( 誘導(dǎo)率為9 5 ％) ：在含2 7g m o F L 2 , 4 - D 的M B 5 培養(yǎng)基上可誘導(dǎo)出無(wú)色、柔軟、含水量高的愈傷組織( 誘導(dǎo)率為9 2 ％) 。這兩種愈傷組織在原來(lái)的培養(yǎng)基上繼代培養(yǎng)3 0 天后，大部分褐化死亡。但在M S l 培養(yǎng)基上誘導(dǎo)的是黃色、顆粒狀、粘性較大的愈傷組織( 誘導(dǎo)率為8 5 ％) ，在原

4、培養(yǎng)基上經(jīng)1 個(gè)月的繼代培養(yǎng)后，進(jìn)一步在懸浮培養(yǎng)基上懸浮培養(yǎng)6 0 天產(chǎn)生球形、具有胚性特征的細(xì)胞和類體胚結(jié)構(gòu)的培養(yǎng)物，同時(shí)結(jié)合該愈傷組織的形態(tài)特征、細(xì)胞學(xué)和組織學(xué)的觀察，證實(shí)在M S l 培養(yǎng)基上所誘導(dǎo)愈傷組織為胚性愈傷組織。比較在這3 個(gè)培養(yǎng)基所誘導(dǎo)產(chǎn)生的愈傷組織中S E R K 基因的表達(dá)發(fā)現(xiàn)，M S l 培養(yǎng)基上所誘導(dǎo)的胚性愈傷組織的S E R K 基因表達(dá)比其他兩種非胚性的愈傷組織的強(qiáng)?？梢?，S E R K 基因的表達(dá)與大蕉體

5、細(xì)胞胚性潛能的獲得和胚性愈傷組織的形成有密切相關(guān)。3 、以來(lái)源于花序外植體的大蕉胚性愈傷組織所建立的胚性細(xì)胞懸浮培養(yǎng)體系為材料，在懸浮培養(yǎng)的1 5 0 天中，每3 0 天取一定量的胚性懸浮細(xì)胞，在體胚誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)6 0 天誘導(dǎo)體胚發(fā)生，同時(shí)凍存部分細(xì)胞用半定量R T - P C R測(cè)定S E R K 基因的表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)這個(gè)基因在培養(yǎng)過(guò)程中都有一定水平的表達(dá)，到9 0 天時(shí)表達(dá)晟強(qiáng)，隨后逐漸減弱。S E R K 基因的表達(dá)模式與該懸