高效液相色譜與共振瑞利散射聯(lián)用技術(shù)在藥物測(cè)定中的研究與應(yīng)用.pdf

1、共振瑞利散射技術(shù)是自1993年發(fā)展起來(lái)的一種快速、簡(jiǎn)便、靈敏的分析技術(shù)。在此后二十多年中，共振瑞利散射技術(shù)逐漸運(yùn)用于無(wú)機(jī)元素分析、藥物分析、生化分析、納米材料等領(lǐng)域。高效液相色譜具有高選擇性和高效快速分離，并可同時(shí)用于物質(zhì)檢查和含量測(cè)定的特點(diǎn)，已成為藥物研究的有力工具。近年來(lái)，自從高效液相色譜儀與共振瑞利散射聯(lián)用技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)被發(fā)現(xiàn)，它作為一種新型的聯(lián)用技術(shù)，已經(jīng)成功應(yīng)用于蛋白質(zhì)，氨基酸及藥物的分析研究。本文建立了一種無(wú)柱后衍生試劑的HPL

2、C-RRS聯(lián)用技術(shù)，及三元離子締合物的HPLC-RRS聯(lián)用體系，不僅提高了方法的穩(wěn)定性，還進(jìn)一步擴(kuò)大了RRS的應(yīng)用范圍。此外，本文在前人的基礎(chǔ)上進(jìn)一步改進(jìn)了HPLC-RRS聯(lián)用裝置，使用匹配的流通池、控制反應(yīng)管長(zhǎng)、反應(yīng)溫度等，這對(duì)提高聯(lián)用方法的靈敏度具有重要意義。本研究主要內(nèi)容包括：
　?、鸥咝б合嗌V與共振瑞利散射聯(lián)用測(cè)定三種α1受體阻滯劑。建立了一種共振瑞利散射與非柱后衍生高效液相色譜聯(lián)用分離和檢測(cè)三種α1受體阻滯劑的新方法。

3、其定量分析法是基于添加適量有機(jī)溶劑甲醇使分子聚集，在聚集體與水之間由于表面增強(qiáng)效應(yīng)而產(chǎn)生疏水作用力而使共振瑞利散射信號(hào)增強(qiáng)。三種α1受體阻滯劑在Gemini5u C18反相柱上(250 mm×4.6 mm;4μm)得到很好分離，流動(dòng)相為甲醇和乙酸銨-甲酸(25 mM; pH=3.0)緩沖溶液，流速0.7 mLmin-1。它們的共振瑞利散射信號(hào)檢測(cè)波長(zhǎng)為λex=λem=354 nm。三種藥的檢測(cè)限為0.065-0.70μg L-1，三種藥

4、的RRS信號(hào)強(qiáng)度與藥物濃度在一定范圍內(nèi)成良好的線性關(guān)系，它們的線性范圍如下:甲磺酸多沙唑嗪0.75-15μg L-1，鹽酸哌唑嗪0.075-3.0μg L-1，鹽酸特拉唑嗪0.25-5μg L-1。
　?、聘咝б合嗌V與共振瑞利散射聯(lián)用測(cè)定巰嘌呤的方法及機(jī)理研究。建立了基于巰嘌呤與金屬鈀離子反應(yīng)形成金屬螯合物產(chǎn)生的共振瑞利散射信號(hào)與高效色譜聯(lián)用測(cè)定巰嘌呤的新方法。該方法具有儀器簡(jiǎn)單，靈敏度高，選擇性好的特點(diǎn)。優(yōu)化了色譜分離條件，以

5、腺嘌呤為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)，巰嘌呤在反相色譜柱(250mm×4.6mm;4μm)，柱溫30℃，甲醇∶水=25∶75(V/V)的流動(dòng)相，流速0.3 mLmin-1條件下得到很好的分離。共振瑞利散射信號(hào)的檢測(cè)波長(zhǎng)在λex=λem=315 nm處。優(yōu)化了聯(lián)用分析方法的參數(shù)，巰嘌呤在0.0615到2.40μg mL-1的濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，在信噪比為3時(shí)檢測(cè)限為0.019μgmL-1。該法用于測(cè)定人體尿樣中巰嘌呤的含量，并得到了滿意結(jié)果。此外，本

6、文用紅外光譜、化學(xué)計(jì)算，吸收光譜及場(chǎng)發(fā)射掃描電鏡討論了螯合反應(yīng)的機(jī)理。
　?、歉咝б合嗌V與共振瑞利散射聯(lián)用測(cè)定第三代頭孢類抗生素。建立一種基于三元離子締合物產(chǎn)生的共振瑞利散射與高效液相色譜聯(lián)用同時(shí)分離和檢測(cè)第三代頭孢類抗生素的方法。該法具有簡(jiǎn)便、靈敏度高、選擇性好等優(yōu)點(diǎn)。本文用甲醇:30mM的磷酸緩沖溶液(pH=3.5)=82∶18流動(dòng)相(V/V)通過(guò)等度洗脫方法分離頭孢他啶、頭孢曲松鈉、頭孢哌酮、頭孢噻肟鈉四種抗生素。共振瑞利