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文檔簡介
1、聚合離子液體(PILs)是一種新興的高分子材料,本論文將聚合離子液體固定在納米硅膠顆粒表面,并用于蛋白質(zhì)的分離純化,拓展了聚合離子液體在生命科學中的應用。
采用γ-(異丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷為硅烷化試劑對納米硅膠顆粒表面進行修飾,引入可聚合的末端雙鍵。通過離子液體單體(1-乙烯基-3-乙基咪唑溴代鹽)和交聯(lián)劑(1,4-丁基-3,3'-二-1-乙烯基咪唑二溴代鹽)的共聚反應,得到聚(1-乙烯基-3-乙基咪唑溴代鹽)共價包覆的
2、納米復合材料PIL@SiO2。對PIL@SiO2復合材料進行紫外-可見光譜(UV-Vis)、透射電鏡(TEM)、掃描電鏡(SEM)、Zeta電位等表征。
以PIL@SiO2復合材料作為固相萃取劑,考察了其在蛋白質(zhì)分離純化中的性能。結(jié)果表明,PIL@SiO2對酸性蛋白具有明顯的選擇性。本實驗以卵清蛋白的分離純化為評價指標,通過改變聚合過程中離子液體單體的用量,在pH6.0時,5.0 mg PIL@SiO2復合材料對1 mL200
3、μg mL-1卵清蛋白的最大吸附效率為95%。卵清蛋白在復合材料表面的吸附行為符合Langmuir模型,最大吸附容量為333.3 mg g-1。吸附在固相材料表面的卵清蛋白可用0.2%(m/v)的SDS溶液進行洗脫,洗脫回收率為60%。圓二色光譜表明經(jīng)透析除去SDS后,卵清蛋白的二級結(jié)構(gòu)不發(fā)生改變。將所建立的方法用于雞蛋白中卵清蛋白的選擇性分離,并采用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度驗證,結(jié)果表明經(jīng)該方法分離得到的卵清蛋白具有較高純度
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