狼毒組織培養(yǎng)及其黃酮類成分研究.pdf

1、狼毒（Stellera chamaejasme），又名斷腸草（內(nèi)蒙古），拔蘿卜、燕子花（河北），饅頭花（青海），是瑞香科(Thymel aeaceae)狼毒屬（Stellera）多年生草本植物，是我國傳統(tǒng)中藥狼毒的正品，也是重要的蒙藥和藏藥，有清熱解毒、消腫、瀉火、止?jié)儭㈧罡≈πА?br>　　本研究以瑞香科狼毒屬狼毒的葉片為外植體，探討了不同濃度的2，4-D對愈傷組織誘導(dǎo)率的影響，得到了誘導(dǎo)愈傷組織的最佳2，4-D濃度;進(jìn)行了不

2、同接種量的細(xì)胞生長動態(tài)研究，確定了增殖培養(yǎng)適宜的接種量，并著重探討了生長素類和細(xì)胞分裂素類對愈傷組織增殖培養(yǎng)的效應(yīng)，獲得了愈傷組織增殖的最佳培養(yǎng)基配方;用比色法測定了愈傷組織中總黃酮的含量，研究生長素和細(xì)胞分裂素類對愈傷組織總黃酮累積的影響;采用DPPH自由基清除法探究了愈傷組織總黃酮提取物的抗氧化活性。本研究為狼毒的開發(fā)利用奠定了基礎(chǔ)。主要結(jié)論歸納如下：
　　1.以狼毒的葉片為外植體，誘導(dǎo)愈傷組織的最佳2，4-D濃度為1.0mg

3、/L，誘導(dǎo)率可達(dá)98.33％，愈傷組織呈淡黃色，致密。
　　2.愈傷組織生長量的動態(tài)研究表明：鮮重和干重的生長曲線均呈“S”型，明顯地分為：延遲生長期、指數(shù)生長期和衰減期。
　　3.單獨(dú)使用2，4-D和KT對狼毒愈傷組織的增殖效應(yīng)不明顯并嚴(yán)重褐化;單獨(dú)使用NAA增殖效應(yīng)明顯但褐化較明顯;單獨(dú)使用6-BA增殖效應(yīng)很好但輕微褐化;單獨(dú)使用TDZ增殖效應(yīng)最好。生長素與細(xì)胞分裂素組合對愈傷組織的增殖效應(yīng)比單一的植物生長調(diào)節(jié)劑好。MS

4、+NAA0.5mg/L+TDZ1.0mg/L是最佳增殖培養(yǎng)基，鮮重為14.49g/瓶，是初始接種量的28.98倍，干重為0.61g/瓶，為初始接種量的25.41倍。
　　4.單獨(dú)使用NAA和6-BA可促進(jìn)愈傷組織中總黃酮的累積，而培養(yǎng)基中附加不同濃度的TDZ時總黃酮的累積均低于NAA和6-BA?？傸S酮累積的最佳培養(yǎng)基配方為MS+NAA1.0mg/L+6-BA0.25mg/L，總黃酮含量達(dá)10.779mg/g，明顯高于野生狼毒根(總