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1、目的:研究京尼平(Genipin)對(duì)缺氧/復(fù)氧心肌細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制。
方法:模擬心肌缺血/再灌注損傷,通過體外培養(yǎng)H9c2心肌細(xì)胞,建立心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧模型。實(shí)驗(yàn)分為6組:對(duì)照組、缺氧/復(fù)氧(Hypoxia/Reoxygenation, H/R)組、京尼平預(yù)處理后缺氧/復(fù)氧模型組:H/R+0.5μmol· L-1 Genipin組、H/R+1.25μmol· L-1 Genipin組、H/R+2.5μmol
2、·L-1 Genipin組、H/R+10μmol·L-1 Genipin組。CCK-8檢測(cè) H9c2心肌細(xì)胞存活率;酶標(biāo)儀檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中乳酸脫氫酶(LDH)釋放量、細(xì)胞內(nèi)的丙二醛(MDA)含量和細(xì)胞內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)的活性;激光共聚焦檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)線粒體活性氧和活性氮(ROS和RNS)產(chǎn)生,線粒體鈣離子及線粒體膜電位;Western-blot檢測(cè)細(xì)胞色素C(cytochrome-c)蛋白釋放量。
結(jié)果:與對(duì)照組比較,
3、 H/R組 H9c2心肌細(xì)胞存活率顯著降低(P<0.01);低濃度(1.25μmol·L-1~40μmol·L-1)京尼平可提高缺氧/復(fù)氧后H9c2心肌細(xì)胞存活率(P<0.05),高濃度(80μmol·L-1~320μmol·L-1)京尼平對(duì)細(xì)胞有明顯毒性作用(P<0.05)。與 H/R組比較, H/R+1.25μmol· L-1 Genipin組, H/R+2.5μmol· L-1 Genipin組和H/R+10μmol·L-1 Ge
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