文心蘭AP3-like基因的克隆與表達(dá)分析研究.pdf

1、被子植物的AP3家族屬于MADS-box基因中的B功能基因,其在花器官形成和生殖發(fā)育中有重要的作用。為研究蘭花MADS-box基因的表達(dá)與花器官發(fā)育之間的關(guān)系,以文心蘭(Oncidium Milliongolds)為材料,本研究通過(guò)RT-PCR方法克隆到一個(gè)花發(fā)育相關(guān)的MADS-box基因,通過(guò)該基因在花芽不同發(fā)育時(shí)期和不同組織的表達(dá)模式,推測(cè)該基因?qū)ㄆ鞴傩纬伤鸬恼{(diào)控作用,為蘭花花器官發(fā)育的分子調(diào)控機(jī)制進(jìn)一步的研究奠定基礎(chǔ),為蘭花分

2、子育種提供理論依據(jù)。本研究主要結(jié)果如下:
　　 (1)通過(guò)RT-PCR分離得到OAP3基因cDNA的全長(zhǎng),該基因全長(zhǎng)799bp,包括一個(gè)612bp的CDS框,編碼一個(gè)長(zhǎng)度為203個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)。在GenBank登錄(登錄號(hào):GU644447)。進(jìn)化樹(shù)分析表明OAP3屬于花器官發(fā)育B類基因,但該基因卻不存在B類基因C-端共有的結(jié)構(gòu)域。
　　 (2)文心蘭OAP3基因蛋白屬于AP3-like基因家族中的paleoAP3系列

3、,與其它物種相比,氨基酸序列比對(duì)發(fā)現(xiàn)該序列與蝴蝶蘭PeMADS5的氨基酸序列同源性高達(dá)78％,與單子葉植物水稻MADS16和百合LMADS1的氨基酸序列同源性均為62％,明顯高于與雙子葉植物擬南芥AP3(50％)和金魚(yú)草DEF(50％)的同源性。
　　 (3)OAP3基因編碼的蛋白質(zhì)推測(cè)其分子量為23661.1D,理論等電點(diǎn)為9.49。其中,堿性氨基酸占總氨基酸的18.23％,酸性氨基酸占總氨基酸的13.80％,疏水氨基酸占總氨