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文檔簡介
1、目的:
通過頂空-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(HS-GC-MS)分析黨參的揮發(fā)性成分,以尋找黨參特殊香氣的主要揮發(fā)性成分,探討黨參特殊香氣的化學(xué)本質(zhì);采用頂空-氣相色譜(HS-GC)對黨參主要的揮發(fā)性成分進(jìn)行定量分析,明確不同商品黨參基源、產(chǎn)地和生長年限對黨參揮發(fā)性成分的影響及道地黨參揮發(fā)性成分的特征;測定經(jīng)茉莉酸甲酯誘導(dǎo)后黨參不定根主要的揮發(fā)性成分含量,以期發(fā)現(xiàn)參與黨參防御應(yīng)答過程的揮發(fā)性成分。
方法:
1.
2、采用水蒸氣蒸餾法和頂空法提取黨參揮發(fā)性成分,經(jīng)GC-MS分析,比較兩種不同方法所得結(jié)果的異同。
2.采用HS-GC-MS分析三個基源黨參揮發(fā)性成分,通過質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫計算機(jī)檢索和查對有關(guān)文獻(xiàn)資料,確定結(jié)構(gòu),并用面積歸一化法測得揮發(fā)性成分各組分相對百分含量,尋找黨參香氣的主要揮發(fā)性成分。
3.采用HS-GC同時測定黨參正己醛、2-己烯醛和正己醇三種成分的含量,分別比較不同基源、產(chǎn)地、生長年限的商品黨參中三種揮發(fā)性成分含量的
3、差異,明確其對黨參揮發(fā)性成分的影響,以及道地黨參揮發(fā)性成分的特征。
4.液體培養(yǎng)黨參不定根,分三組,對照組(CK1)、溶劑對照組(CK2)、實驗組(茉莉酸甲酯濃度分別為100μmol·L-1、200μmol·L-1、300μmol·L-1),采用HS-GC測定黨參不定根正己醛、2-己烯醛和正己醇的含量,分析黨參三種揮發(fā)性成分在茉莉酸甲酯誘導(dǎo)下含量的變化,以期發(fā)現(xiàn)參與黨參防御應(yīng)答的揮發(fā)性成分。
結(jié)果:
1.水
4、蒸氣蒸餾法和頂空法提取黨參揮發(fā)性成分進(jìn)行GC-MS分析,對其結(jié)果進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn),無論是成分還是其相對含量均存在一定差異,但兩種提取方法所得主要的揮發(fā)性成分種類一致,均為正己醛、2-己烯醛、正己醇和3,3-二氨基-4,4-二羥基聯(lián)苯。因此,頂空法同樣適用于黨參揮發(fā)性成分的提取。
2.采用HS-GC-MS分析三個基源五種商品黨參揮發(fā)性成分結(jié)果:
五種商品黨參共檢測到117種揮發(fā)性化合物,鑒定了64種,包括10種醇類,20種
5、醛類,14種萜類,3種酮類,4種酯類,4種呋喃類,3種羧酸類,1種烯烴類,1種烷烴,2種硫化物,2種其他類化合物。其中潞黨、白條黨、紋黨、鳳黨和板橋黨鑒定出的揮發(fā)性成分分別為61種、43種、39種、45種、46種。潞黨所含揮發(fā)性物質(zhì)最為豐富。
五種商品黨參共有的揮發(fā)性成分有30種。同時,不同的商品黨參所含的揮發(fā)性成分種類存在差異。潞黨檢測到2-異丙基-3-甲基-3,5-己二烯醛(0.38%)等8種特異成分。
五種商品
6、黨參揮發(fā)性成分的相對含量較高的主要是醛類和醇類成分,醛類平均含量為74.93%,醇類平均含量為11.17%。其中共有成分中含量較高的主要成分是正己醛、2-己烯醛和正己醇,其相對百分含量總和為69.25%~85.30%,屬黨參主要的揮發(fā)性成分,其中,正己醛含量為42.42%~59.01%,為黨參特殊香氣的主要成分之一。
綜上,黨參含有醇類、醛類等多種具有芳香氣味的揮發(fā)性成分,正己醛是其特殊香氣的主要成分。三個基源五種商品黨參比較
7、,潞黨參揮發(fā)性成分最為豐富,且含有8種特異性成分。
3.采用HS-GC同時測定黨參正己醛、2-己烯醛和正己醇三種成分的含量結(jié)果:
基源為黨參的潞黨正己醛含量為200.41μg·g-1,顯著高于基源為川黨參的板橋黨和基源為素花黨參的紋黨、鳳黨,與相同基源的白條黨無顯著性差異。不同生長年限的潞黨、板橋黨和鳳黨正己醛含量無顯著性差異。以上結(jié)果表明黨參藥材中正己醛含量主要與植物基源有關(guān),黨參中含量較高。
不同生長年
8、限的潞黨、板橋黨和鳳黨2-己烯醛含量無顯著性差異。三個基源五種商品黨參2-己烯醛含量兩兩比較,無顯著性差異。
不同生長年限潞黨、板橋黨和鳳黨正己醇含量進(jìn)行t檢驗,潞黨Р<0.05,3年生潞黨正己醇含量為101.03μg·g-1,顯著高于2年生含量。三個基源五種商品黨參正
己醇含量兩兩比較,無顯著性差異。結(jié)果表明3年生道地黨參藥材即潞黨中含量最高,為101.03μg·g-1。
綜上,基源為黨參的正己醛含量顯著
9、高于基源為素花黨參和川黨參的含量。正己醛可以作為一個評價黨參質(zhì)量的指標(biāo)成分。
4.采用HS-GC測定黨參不定根正己醛、2-己烯醛和正己醇的含量結(jié)果:
CK1與CK2間正己醛含量無顯著性差異,即乙醇對黨參不定根中正己醛含量無影響,C K1、C K2與三個實驗組間均有顯著性差異,即實驗組中正己醛含量顯著高于對照組中正己醛含量,說明茉莉酸甲酯對黨參不定根中正己醛含量有影響。C K1、C K2和三個實驗組2-己烯醛含量與正己
10、醇含量均無顯著性差異,即茉莉酸甲酯以及溶劑乙醇對黨參不定根中2-己烯醛和正己醇含量無影響。
綜上,茉莉酸甲酯對黨參不定根中正己醛含量有影響,且能促進(jìn)正己醛含量的上升,即正己醛參與黨參防御應(yīng)答過程。
結(jié)論:
黨參含有多種具有芳香氣味的揮發(fā)性成分,正己醛、2-己烯醛和正己醇相對百分含量總和為69.25%~85.30%,屬黨參主要的揮發(fā)性成分,其中正己醛含量為42.42%~59.01%,是其特殊香氣的主要成分?;?/p>
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