Rab27AmRNA與人乳腺癌細胞侵襲轉(zhuǎn)移能力相關性的體內(nèi)外研究.pdf

1、目的：檢測人乳腺癌細胞中Rab27A的定位、表達情況，在體內(nèi)外研究Rab27A與乳腺癌細胞侵襲轉(zhuǎn)移能力相關性。 方法： 1、采用SYBR GREEN法實時半定量RT-PCR技術，檢測Rab27A在四種人乳腺癌細胞MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435和MDA-MB-435HM中的mRNA，應用Western-blot檢測Rab27AmRNA在四種人乳腺癌細胞MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-

2、435和MDA-MB-435HM中的蛋白表達。 2、應用免疫熒光（immunofluorescence）及激光共聚焦(confocal)掃描成像技術顯示Rab27A蛋白在乳腺癌細胞中的定位。3、裸鼠乳房脂肪墊(mammary fat pad，MFP)接種人乳腺癌細胞，探討Rab27A過表達對裸鼠原位腫瘤生長及肺轉(zhuǎn)移的影響。 結(jié)果： 1、Rab27A mRNA及蛋白在人乳腺癌細胞MCF-7、MDA-MB-231、M

3、DA-MB-435及MDA-MB-435HM中的表達水平隨細胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的增強而升高。 2、在人乳腺癌細胞MCF-7、MDA-MB-231和MDA-MB-435中，Rab27A彌散性分布于細胞漿中，而在后兩者中又可見Rab27A蛋白在核周凝聚。 3、Rab27A高表達細胞克隆組裸鼠肺轉(zhuǎn)移率增高，MDA-MB-231組由10％增加到50％(P<0.01)，MDA-MB-435組由60％增加到90％（P<0.05），平均每