川芎根腐病病原鑒定、生物學特性和同工酶研究.pdf

1、川芎為傘形科(Umbelliferae)藁本屬植物川芎(LigusticumchuanxiongHort)的干燥根莖，是著名的川產(chǎn)道地藥材，具有近兩千年的栽種和使用歷史。 川芎根腐病[Fusariumsolani(Mart)Sacc]是四川省都江堰市川芎種植基地的一種重要病害，2006年，該病田間的發(fā)病株率為6.08％～45.47％，平均為23.61％，重病田達68.46％，造成嚴重危害，已成為該片區(qū)川芎上的主要病害。本試驗是對

2、川芎根腐病的癥狀、病原鑒定、生物學特性、室內(nèi)藥劑篩選和田間藥劑防治及同工酶活性進行的研究，結果如下： 1川芎根腐病的癥狀川芎根腐病是一種土傳病害，在川芎的整個生長期都會發(fā)生。發(fā)病初期，地上部從外圍的葉片開始褪色發(fā)黃，并逐漸向心葉擴展。地下塊莖的病部初呈褐色至紅褐色，部分變?yōu)樗疂n狀，隨著病情的發(fā)展，病株葉尖、葉緣開始焦枯。感病塊莖髓部變黑，并且向上發(fā)展，褐色漸淺。后期感病塊莖內(nèi)部腐爛，呈黃褐色漿糊狀，有特殊臭味，呈軟腐狀；最后整個

3、植株停止生長、枯死。 2川芎根腐病的分離和培養(yǎng)性狀經(jīng)組織分離得到川芎根腐病菌純培養(yǎng)。所有分離菌株在PDA平板上的形態(tài)特征基本一致，2d后出現(xiàn)白色至淺灰色菌絲，3d后開始產(chǎn)孢，菌絲有隔，絮狀，菌落正面有同心輪紋，菌落反面呈淡紫色。 3分離菌的回接與病原鑒定在室溫條件下，用分生孢子懸浮液浸根接種川芎的根部，回接植株15d后全部發(fā)病，癥狀與田間癥狀相同，而CK不發(fā)病。從發(fā)病的部位進行常規(guī)分離再次分離到相同的病菌。由此證明該分離

4、菌是川芎根腐病的病原菌。 根據(jù)病原菌的形態(tài)特征、培養(yǎng)性狀觀察和rDNA-ITS的序列分析。參照張中義等[70]《植物病原真菌學》和Booth[30]的鐮刀菌分類系統(tǒng)，將該病原菌鑒定為茄腐鐮孢菌[Eusariumsolaniq(Marl)Sacc]，屬于半知菌亞門(Deuteromycotina)、絲孢綱(Hyphomycetes)，瘤座孢目(Tuberculariales)，瘤座孢科(Tuberculariaceae，)，鐮刀菌

5、屬(Fusarium)。由[Fusariumsolani(Mart)Sacc]引起的川芎根腐病是國內(nèi)外首次報道。 4川芎根腐病菌的生物學特性本研究明確了不同培養(yǎng)基、碳源、氮源、溫度、pH值以及光照等對川芎根腐病菌菌絲生長、產(chǎn)孢以及分生孢子萌發(fā)的影響。在不同的培養(yǎng)基中，病原菌在PSA上菌絲生長和產(chǎn)孢最好；可溶性淀粉培養(yǎng)基上菌絲生長最差；在PS培養(yǎng)基上產(chǎn)孢最差；溫度在25～30℃間適于菌絲的生長，最適溫28℃，低于10℃或高于40℃

6、均會對孢子產(chǎn)生及萌發(fā)產(chǎn)生抑制作用，高溫會造成孢子畸形；pH5～8之間適于病原菌的生長，最適生長pH6，pH過低或過高均會造成對病原菌生長的影響；不同光照條件處理表明：各處理對菌絲生長和產(chǎn)孢的影響無顯著性差異：菌絲生長最適碳源為蔗糖，產(chǎn)孢最適碳源為果糖，乳糖最差；菌絲生長在硝酸鉀上生長最好，在硫酸銨生長最差，牛肉膏產(chǎn)孢最好，氯化銨產(chǎn)孢最差。 分生孢子萌發(fā)適溫20℃～35℃；最適28℃，RH從90％～100％和水滴中均可萌發(fā)，水滴最

7、好，低于90％不萌發(fā)；適宜pH5～7，最好pH6，萌發(fā)率71.73％，高于pH8不萌發(fā)；分生孢子致死溫度為53℃。 5室內(nèi)藥劑篩選和田間藥劑防治8種藥劑(根腐菌、卡菌丹、根必治、甲基托布津、代森錳鋅、百菌清、敵克松一號、地菌統(tǒng)克)篩選結果表明，對病原菌菌絲生長和產(chǎn)孢抑制效果最好的是根必治、甲基托布津，達到極顯著水平(菌落直徑為2.20cm和1.75cm，產(chǎn)孢量為0.92x107個/皿和0.68x107個/皿)；百菌清和根腐靈對病

8、原菌的抑制次之(菌落直徑為2.93cm和3.30cm，產(chǎn)孢量為0.52x107個/皿和1.8×107個/皿)；敵克松一號和卡菌丹對病原菌無抑制作用。 對病原菌分生孢子萌發(fā)抑制效果最好的是百菌清、代森錳鋅，抑制萌發(fā)率達到100％；根必治、地菌統(tǒng)克、根腐靈次之，抑制萌發(fā)率分別為99.8％、99.5％和98.7％；敵克松一號和卡菌丹對分生孢子萌發(fā)抑制較差，僅為30.4％和14.6％。 選用4種藥劑進行田間藥效試驗，藥劑防治試驗

9、表明：百菌清、代森錳鋅、甲基托布津和根必治的病株率和防效均達到極顯著水平. 6茄腐鐮刀菌對川芎同工酶活性的影響同工酶試驗表明：接種后，POD酶活性表現(xiàn)為先上升而后下降的趨勢，在接種后第7d時達到最大值，峰值為274.335，為對照的5.43倍，而后緩慢下降，到第12d時下降到對照的水平，而對照的變化一直較為平穩(wěn)。PPO酶活性表現(xiàn)為先上升而后下降的趨勢，在接種后第4d時活性開始增大，到第7d時，峰值為為對照的2.82倍，而后緩慢下