吡格列酮對(duì)糖尿病大鼠肝臟、胰腺和肌肉的免疫保護(hù)作用研究.pdf

1、背景：糖尿?。―iabetes mellitus，DM）是最常見的慢性病之一，除了可以引起腎臟、心臟、視網(wǎng)膜神經(jīng)等器官的損害外，還可以導(dǎo)致各種類型的肝臟、胰腺和肌肉損傷。近年來研究發(fā)現(xiàn)，免疫和炎癥機(jī)制在DM及其慢性并發(fā)癥的發(fā)病過程中起著十分重要的作用。吡格列酮（Pioglitazone，Piog）屬于噻唑烷二酮類藥物（Thiazolidinediones，TZDs），是過氧化物酶體增殖物激活受體γ（PPARγ）的選擇性激動(dòng)劑，除胰島素增

2、敏作用外，還可能對(duì)免疫及炎癥反應(yīng)有重要的調(diào)節(jié)作用，可以不依賴于調(diào)節(jié)系統(tǒng)糖脂代謝而直接發(fā)揮對(duì)靶器官和組織的保護(hù)作用。 目的：以正常大鼠及無干預(yù)治療的STZ誘導(dǎo)的DM大鼠為對(duì)照，觀察不同干預(yù)劑量Piog對(duì)STZ誘導(dǎo)的DM大鼠肝臟、胰腺和肌肉組織的作用，并與免疫調(diào)節(jié)劑環(huán)孢菌素A（Cyclosporine A，CsA）及胰島素（Insulin，INS）的干預(yù)作用比較，了解Piog是否通過免疫調(diào)節(jié)機(jī)制，進(jìn)而影響到炎癥反應(yīng)，來預(yù)防和控制DM

3、及其并發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展，為其臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。 方法：健康雄性SD大鼠96只，隨機(jī)分為Piog小劑量干預(yù)組（A組）、Piog小劑量加INS干預(yù)組（B組）、Piog大劑量干預(yù)組（C組）、小劑量Cs A干預(yù)組（D組）、小劑量CsA加INS干預(yù)組（E組）、單純INS干預(yù)組（F組）、無干預(yù)組（G組）和正常對(duì)照組（H組）等8組。除H組外，其余均由STZ誘導(dǎo)造成DM模型。造模前及成模后每周檢測(cè)大鼠體重，每月測(cè)定血糖，共飼養(yǎng)16周后處死。

4、處死前留取血清和24h尿檢測(cè)肝腎功能、血脂、尿蛋白和尿微量白蛋白。對(duì)各組大鼠肝臟、胰腺和肌肉組織，分別采用HE染色觀察的大體病理學(xué)變化；MASSON染色觀察肝臟有無纖維化改變；AZON染色觀察胰島細(xì)胞形態(tài)；Mallory氏磷鎢酸蘇木素染色法觀察骨骼肌組織改變；透射電子顯微鏡觀察各器官組織超微結(jié)構(gòu)變化；免疫組織化學(xué)法（Immunohistochemistry，IHC）觀察胰島的INS表達(dá)；IHC法和免疫熒光法（Immunofluoresc

5、ence，IFC）觀察各器官組織免疫球蛋白（Immunoglobulin，Ig）的異常沉積；IHC法和逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Reverse transcription-polymerase chain raction，RT-PCR）檢測(cè)IL-1β和NF-κB蛋白和mRNA表達(dá)水平。對(duì)各組間的數(shù)據(jù)采用單因素方差分析進(jìn)行比較。 結(jié)果：1.Piog各干預(yù)組血脂、尿素氮、肌酐、尿蛋白和尿微量白蛋白最接近H組，明顯低于G組；2.G組大鼠肝

6、臟大體病理正常，胰島體積縮小，形態(tài)不規(guī)則，INS表達(dá)減少，肌肉有萎縮變性，肝臟、胰腺和肌肉均有較多的Ig沉積，IL-1β、NF-κB的mRNA和蛋白表達(dá)明顯增多；3.光鏡和電鏡下C組大鼠肝臟、胰腺和肌肉組織組的大體病理學(xué)和超微結(jié)構(gòu)與H組接近，與CsA干預(yù)的D、E兩組無明顯差別，優(yōu)于A組和B組，也明顯優(yōu)于F和G組；4.C組的DM大鼠胰島體積相對(duì)減小，但胰島形態(tài)相對(duì)正常，胰島INS表達(dá)較多，接近CsA干預(yù)的D、E組，優(yōu)于A組和B組；5.Pi

7、og干預(yù)的DM大鼠肝臟、胰腺和肌肉組織IgA、IgG和IgM的表達(dá)和沉積均明顯減少，尤其是在C組，與CsA干預(yù)的D、E組無顯著性差別；6.Piog干預(yù)的DM大鼠肝臟、胰腺和肌肉組織，IL-1β、NF-κB的mRNA和蛋白表達(dá)明顯減少，尤其是在C組，與CsA干預(yù)組無顯著性差別。 結(jié)論：STZ誘導(dǎo)的DM大鼠存在多器官的免疫損傷。Piog能明顯降低DM大鼠的血脂和改善腎功能，大劑量時(shí)與免疫抑制劑CsA的作用相似，對(duì)DM大鼠的肝臟、胰腺