組蛋白去乙?；敢种苿δX缺血的保護作用及相關(guān)機制研究.pdf

1、暨南大學(xué)碩士學(xué)位論文題名（中英對照）：組蛋白組蛋白去乙?；敢种苿δX缺血去乙酰化酶抑制劑對腦缺血的保護作用保護作用及相關(guān)及相關(guān)機制研究機制研究Protectiveeffectsofhistonedeacetylaseinhibit(HDACi)onbrainischemiaitsmechanism作者姓名：黃瓊指導(dǎo)教師姓名及學(xué)位、職稱：季煜華博士副研究員學(xué)科、專業(yè)名稱：免疫學(xué)論文提交日期：2014年5月論文答辯日期：2014年6月答辯

2、委員會主席：劉叔文教授論文評閱人：周聯(lián)教授肖佳副研究員學(xué)位授予單位和日期：暨南大學(xué)2014年6月暨南大學(xué)碩士學(xué)位論文組蛋白去乙酰化酶抑制劑對腦缺血的保護作用及相關(guān)機制研究I摘要摘要目的：目的：本研究分別采用小鼠暫時性大腦中動脈缺血（transientdlecerebralocclusiontMCAO）再灌注損傷和缺氧缺糖損傷（oxygenglucosedeprivationOGD）神經(jīng)元兩種模型，探討去乙酰化酶抑制劑（histonede

3、acetylaseinhibitHDACi）對缺血性腦卒中的保護作用及其相關(guān)機制，為臨床應(yīng)用HDACi治療腦缺血性疾病奠定實驗基礎(chǔ)。方法：方法：1、健康雄性Balbc小鼠隨機分為2組：偽手術(shù)（Sham）組和IR組。IR組按照改良Zealonga線栓法建立小鼠左側(cè)大腦中動脈缺血30min再灌注損傷模型。Sham組的手術(shù)操作與IR組相同，但不進行大腦中動脈阻塞。IR組分為三個亞組：IR24h組、IR48h組、IR72h組。于術(shù)后24h后進行

4、神經(jīng)功能缺陷評分，各組小鼠在相應(yīng)時間點處死取腦，TTC染色檢測腦梗死體積。2、健康雄性Balbc小鼠隨機分為4組：Sham組、IR組、SAHA組和DMSO對照組。采用改良Zealonga線栓法阻斷大腦中動脈供血30min，再灌注48h制備小鼠局灶性腦缺血再灌注損傷模型。SAHA組分為三個亞組，分別于腦缺血前1h腹腔注射不同劑量的SAHA：SAHA1組12.5mgKg；SAHA2組25mgKg；SAHA3組50mgKg。DMSO組：小鼠腦

5、缺血前1h腹腔注射25%DMSO0.1ml。于術(shù)后24h后進行神經(jīng)功能缺陷評分，再灌注損傷48h后處死取腦，分別進行TTC染色測量腦梗死體積以及Westernblot檢測腦組織蛋白的乙?；阶兓闆r。3、建立SHSY5Y細胞不同持續(xù)時間OGD損傷模型，檢測不同濃度的HDACi對OGD誘導(dǎo)的神經(jīng)元損傷的影響，實驗指標如下：倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài)學(xué)變化，MTT法檢測細胞活性，Propidiumiodide（PI）和Hoechst33258

6、染色檢測細胞凋亡與壞死情況，乳酸脫氫酶（LactatedehydrogenaseLDH）法檢測細胞損傷，熒光顯微鏡或流式細胞術(shù)檢測各組細胞內(nèi)活性氧（reactiveoxygenspeciesROS）含量和線粒體膜電位（mitochondrionmembranepotentialMMP）的變化，Westernblot檢測各組細胞乙?；降淖兓?。結(jié)果：結(jié)果：1、神經(jīng)功能缺陷評分顯示，與Sham組相比較，IR組出現(xiàn)不同程度的神經(jīng)功能障礙，評