人臍血細(xì)胞靜脈移植對(duì)家兔急性心肌梗死心肌細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、研究背景: 心血管病是造成人類死亡的重要的疾病之一，其中心肌梗死和慢性心功能不全而導(dǎo)致死亡占心血管病死亡50％以上，目前所用的治療手段如溶栓、植入支架等介入手段只是恢復(fù)血流的再灌注，防止心梗面積的擴(kuò)大，而不能逆轉(zhuǎn)已壞死的心肌。心臟移植手術(shù)由于供體來源，免疫排斥以及高額的手術(shù)費(fèi)用而難以在臨床上廣泛使用。自20世紀(jì)90年代以來，干細(xì)胞技術(shù)的出現(xiàn)與發(fā)展，給予治療這類疾病以突破性的發(fā)展，隨后動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，胚胎干細(xì)胞，骨骼肌干細(xì)胞，骨髓干

2、細(xì)胞等可以作為細(xì)胞移植的干細(xì)胞，但是存在供體來源受限，免疫排斥及倫理學(xué)糾紛問題等缺點(diǎn)，這使國內(nèi)外的許多學(xué)者陷入困境，就在這時(shí)一種新的干細(xì)胞-臍血干細(xì)胞應(yīng)運(yùn)而生了，與其他干細(xì)胞相比臍血干細(xì)胞具有以下優(yōu)越性：臍血干細(xì)胞取材方便、含量豐富、排斥反應(yīng)性小，對(duì)產(chǎn)婦及新生嬰兒無危害等優(yōu)點(diǎn)而受到廣泛關(guān)注，理論上成為最適宜的干細(xì)胞來源。研究表明臍血干細(xì)胞移植可減低心梗范圍和改善心功能等，但臍血干細(xì)胞靜脈移植對(duì)心肌細(xì)胞凋亡的影響國內(nèi)尚未有報(bào)道。本研究旨在

3、觀察人臍血單個(gè)核細(xì)胞靜脈移植對(duì)家兔心肌梗死后心功能及心肌細(xì)胞凋亡的影響。 目的: 探討人臍血單個(gè)核細(xì)胞靜脈移植對(duì)家兔心肌梗死后心功能及心肌細(xì)胞凋亡的影響。 方法: 45只健康成年中國家兔（雌雄不限，體重2.5-3.0Kg）隨機(jī)分為3組：（1）移植組：15只，AMI模型建立后24小時(shí)經(jīng)耳緣靜脈注入含3×106 BrdU標(biāo)記HUCBC細(xì)胞懸液500uL。（2）：對(duì)照組：15只，AMI模型建立后24小時(shí)經(jīng)耳緣靜

4、脈注入生理鹽水500uL。（3）假手術(shù)組：15只，左前降支穿線不結(jié)扎，術(shù)后24小時(shí)經(jīng)耳緣靜脈注入生理鹽水500uL。移植后1周、2周、4周各組隨機(jī)選取5只家兔行超聲檢測(cè)心功能；心肌組織切片HE染色觀測(cè)心肌病理變化；脫氧核糖核酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)末端標(biāo)記法（TUNEL）檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡；免疫組化法檢測(cè)心肌BrdU陽性細(xì)胞及Bcl-2、Bax蛋白在心肌細(xì)胞中表達(dá)水平。 結(jié)果: （1）與假手術(shù)組比較，移植組與對(duì)照組超聲心功能指標(biāo)短

5、軸縮短率（LVFS）、左室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）均顯著下降；與對(duì)照組比較，移植組移植后1周、2周、4周LVFS，LVEF均明顯改善（P<0.01）（2）移植組與對(duì)照組HE染色顯示梗死區(qū)明顯變薄，并有大量纖維結(jié)締組織形成。移植組免疫組化顯示梗死周邊區(qū)存在BrdU陽性細(xì)胞；部分染色陽性的細(xì)胞形態(tài)呈扁平狀，參與血管壁的組成。對(duì)照組梗死區(qū)及其周邊均未檢測(cè)到BrdU陽性的移植細(xì)胞。（3）免疫組化顯示對(duì)照組、移植組Bcl-2及Bax蛋白均有明顯陽性表

6、達(dá)；與對(duì)照組相比，移植組Bcl-2蛋白水平顯著升高（P<0.05），Bax蛋白水平顯著降低（P<0.05）而假手術(shù)組基本無Bcl-2，Bax陽性表達(dá)。（4）TUNEL法結(jié)果顯示移植術(shù)后4周移植組心肌細(xì)胞凋亡計(jì)數(shù)顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。 結(jié)論: （1）經(jīng)靜脈移植人臍血細(xì)胞治療家兔急性心肌梗死能顯著改善心功能； （2）經(jīng)靜脈移植人臍血細(xì)胞治療家兔急性心肌梗死，臍血細(xì)胞能遷移至梗死周邊區(qū)，并存活； （3