本地早蜜橘炭疽病病原鑒定及防治研究.pdf

1、本地早蜜橘(Citrus succosa Hort.ex Tanaka)味甜少酸，汁多化渣，是鮮食和加工橘片罐頭的地方特色優(yōu)良品種。然而，本地早柑橘炭疽病常年危害，嚴重影響了果品的產(chǎn)量和品質(zhì)。國內(nèi)外對本地早果實炭疽病的研究鮮有人報道，本研究以本地早柑橘果實為試材，分離獲得59株炭疽病菌株，通過形態(tài)學(xué)和分子技術(shù)鑒定病原種類，研究了病菌對甲基硫菌靈的抗性頻率，室內(nèi)測定了6種殺菌劑對病菌的毒力，并進行了田間防治試驗，獲得如下結(jié)果:
　　

2、1、對來自臺州不同地區(qū)本地早果實炭疽病樣品，分離獲得59個菌株，根據(jù)PDA培養(yǎng)基上的生長菌落特征可以分為2類。A類:菌落白色或灰白色，培養(yǎng)后期可產(chǎn)生朱紅色分生孢子團，共36株;B類:菌落初始為白色或灰白色，培養(yǎng)過程中菌落變黑，可產(chǎn)生黑色素，培養(yǎng)后期未觀察到朱紅色分生孢子團，共23株。取分生孢子團鏡檢發(fā)現(xiàn)，分生孢子橢圓形至短圓筒形，無色，單孢，大小12～18.9μm×3～8.9μm，內(nèi)常有1～2個油球。選擇A、B類菌株，離體測定了對柑橘果

3、實的致病性，結(jié)果表明A、B類菌株都可以侵染果實，接種果實發(fā)病率為100％。選擇兩類型的部分菌株，采用膠孢炭疽菌[Colletotriehum gloeosprioides]、尖孢炭疽菌(C.acutatum)的特異性引物Cglnt/ITS4和Calnt/ITS4，進行PCR擴增，結(jié)果表明:以Cglnt/ITS4為引物，可以從兩類菌株中擴增出約500bp的條帶，而Calnt/ITS4為引物，未擴增出條帶。以通用引物ITS4/ITS5，進行

4、PCR擴增后測序，結(jié)果用NCBI中的Blast工具進行比對，發(fā)現(xiàn)兩類菌株與膠孢炭疽菌[C.gloeosprioides](JQ580528，AJ301988.1)同源性達99％。綜合以上試驗結(jié)果，將引起本地早果實炭疽病的病原鑒定為膠孢炭疽菌[C.glocosprioides]
　　2、采用區(qū)分劑量法測定59株炭疽病菌對甲基硫菌靈的抗性頻率。結(jié)果表明椒江區(qū)三甲農(nóng)場分離的14個菌株中12個是抗性菌株，抗性比例為86％，黃巖區(qū)的45個菌

5、株的抗性比例達100％。
　　3、采用生長速率法測定了6種殺菌劑對柑橘炭疽病菌室內(nèi)毒力，結(jié)果表明:吡唑醚菌酯、嘧菌酯、咪鮮胺、唑醚·代森聯(lián)、甲基硫菌靈和丙森鋅對炭疽病抑制菌絲生長的EC50值分別為0.81、2.58、0.066、4.97、1555.5、237.98μg/ml。
　　4、采用孢子萌發(fā)法測定了4種殺菌劑對柑橘炭疽病菌室內(nèi)毒力，結(jié)果表明:吡唑醚菌酯、嘧菌酯、咪鮮胺和唑醚·代森聯(lián)對柑橘炭疽病抑制孢子萌發(fā)的EC50值分

6、別為0.93、14.34、4.47、5.29μg/ml。
　　5、2011、2012年，應(yīng)用60％唑醚·代森聯(lián)WG、25％吡唑醚菌酯EC、70％丙森鋅WP、25％嘧菌酯SC和25％咪鮮胺EC進行了田間防治柑橘炭疽病的試驗，田間試驗結(jié)果表明，嘧菌酯、咪鮮胺、丙森鋅和唑醚·代森聯(lián)在試驗劑量下對炭疽病的防效在95％以上，各藥劑在試驗劑量下2012年的防效比2011年稍低，但各藥劑的防效趨勢和2011年相一致。因此，可以認為嘧菌酯、咪鮮胺