草莓炭疽病病原學(xué)及侵染特性比較研究.pdf

1、本文針對(duì)草莓炭疽病病原菌的生物學(xué)特性、致病因子活性、侵染機(jī)制和病害侵染循環(huán)規(guī)律進(jìn)行了系統(tǒng)的比較研究。 1．對(duì)草莓炭疽病的田間發(fā)病情況進(jìn)行了初步調(diào)查對(duì)丹東草莓主產(chǎn)區(qū)的20個(gè)草莓品種炭疽病發(fā)生情況調(diào)查結(jié)果表明：田間發(fā)病率在86％～100％。一些歐美品種抗病性較強(qiáng)，病情較輕，其中來(lái)自美國(guó)的哈尼和BF6尤為突出。而一些日本品種抗性較弱，其中以99號(hào)、幸香的抗病性最弱。 2．初步鑒定明確了采集、分離菌株的分類歸屬對(duì)采自遼寧省丹東市

2、振安區(qū)和東港市、撫順草莓生產(chǎn)基地、撫順市清原縣、沈陽(yáng)市于洪區(qū)、沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)大草莓園的標(biāo)樣進(jìn)行分離，得到28個(gè)草莓炭疽病菌菌株經(jīng)鑒定，基本分為A、B、C、D、E、F 6個(gè)類型。分屬為炭疽菌屬的4個(gè)種：Colletotrichumgloeospoioides、C.fragariae、C dematium和C. acutatum。其中菌株A、E、F同屬于Cgloeospoioides，E、F在培養(yǎng)過(guò)程中產(chǎn)生有性態(tài)，經(jīng)鑒定屬于子囊菌門球殼目小

3、叢殼屬Glomerella(Stonem)Spauld．et Schr．。 3．對(duì)草莓炭疽病菌的生物學(xué)特性進(jìn)行了較系統(tǒng)的比較研究6株菌株在PDA和PSA培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)情況均為最佳；菌株B、E在酵母浸膏培養(yǎng)基上較易產(chǎn)孢其余菌株在PDA和PSA培養(yǎng)基上較容易產(chǎn)孢；蔗糖、葡萄糖、甘露醇糖、果糖對(duì)6菌株的菌落生長(zhǎng)具有較明顯的促進(jìn)作用；氮源中以蛋白胨對(duì)各菌株菌落生長(zhǎng)及產(chǎn)孢的促進(jìn)作用最為明顯。各菌株生長(zhǎng)的適宜溫度為20～30℃，所有菌株在

4、5℃和40"C均不能生長(zhǎng)，菌株A、D在35℃即不能生長(zhǎng)。菌株D、F產(chǎn)孢的適溫為15～30℃，其余菌株產(chǎn)孢的適溫為20～30℃；光照對(duì)菌株A、B、C、E的菌落生長(zhǎng)影響不大，菌株D、F在光照條件下有利菌絲生長(zhǎng)，除菌株D在光暗交替條件下產(chǎn)孢量最大外，其余5個(gè)菌株光照利于其產(chǎn)孢；各菌株生長(zhǎng)的適宜pH值為4～7，一般5為最適pH值。產(chǎn)孢的適宜pH值為4～8。 6株菌株分生孢子萌發(fā)對(duì)光照的反應(yīng)不敏感，對(duì)溫度及酸堿性的適應(yīng)性比較廣泛，溫度在1

5、0～40℃范圍均可萌發(fā)，pH在3～11范圍內(nèi)均可以萌發(fā)，適宜pH范圍為4～7；供試的5種碳源對(duì)各菌株孢子萌發(fā)均有一定的促進(jìn)作用。6株菌株分生孢子致死溫度較高，均在55℃以上、10min。 4．初步測(cè)定了草莓炭疽病菌的致病特性草莓炭疽病菌細(xì)胞壁降解酶活性測(cè)定結(jié)果表明：6株菌株間，濾紙酶的活性差異較小且活性最低；β-葡萄糖苷酶、羧甲基纖維素酶、聚甲基半乳糖醛酸酶的活力較大，且各菌株間差異較大。菌株E、F的β-葡萄糖苷酶、羧甲基纖維素

6、酶、聚甲基半乳糖醛酸酶的活力均明顯高于其它菌株。 采用2種方法提取草莓炭疽病菌毒素結(jié)果表明：硫酸銨分級(jí)沉淀法提毒素量小，結(jié)果不理想；有機(jī)溶劑萃取該毒素的效果相對(duì)較好。對(duì)草莓炭疽病菌毒素生物活性測(cè)定結(jié)果表明，毒素針刺草莓葉片可產(chǎn)生黑色病斑，說(shuō)明毒素對(duì)葉片細(xì)胞具有致病破壞作用。毒素高濃度下致病力強(qiáng)，表明其對(duì)葉片的損傷程度與濃度具有密切的關(guān)系。對(duì)毒素的透析結(jié)果證明，草莓炭疽病菌所產(chǎn)生的致病毒素為一種大分子化合物。熱穩(wěn)定性試驗(yàn)表明草莓炭

7、疽病菌致病毒素具有較高的熱穩(wěn)定性。毒素中蛋白質(zhì)含量測(cè)定結(jié)果表明，6株菌株所產(chǎn)的毒素中蛋白質(zhì)含量與其致病力沒(méi)有明顯相關(guān)性。 5．初步探討了草莓炭疽病的侵染循環(huán)基本規(guī)律病害侵染循環(huán)研究結(jié)果表明，病組織標(biāo)樣在4℃恒溫貯藏條件下，20個(gè)月后病菌仍可存活，表明病原菌越冬存活能力較強(qiáng)；直接種草莓葉片15d，尚未出現(xiàn)癥狀，表明病原菌在健康草莓組織中具有較長(zhǎng)時(shí)間的潛伏侵染能力。所以防止幼苗帶菌是草莓炭疽病防治中至關(guān)重要的一步。 6．進(jìn)行