潰結Ⅰ號方治療脾腎陽虛型潰瘍性結腸炎大鼠模型的實驗研究.pdf

1、　　潰瘍性結腸炎(Ulcerative Colitis,UC)是以結直腸的表淺性、非特異性炎癥病為主,伴有腸外多器官損害的疾病,病情輕重不等,多反復發(fā)作或長期遷延呈慢性經過。該病治愈難度大、治愈后復發(fā)率較高,并與結腸癌的發(fā)病存在一定的關系,被世界衛(wèi)生組織列為現(xiàn)代難治病之一。目前由于 UC 的病因病機尚不完全清楚,現(xiàn)代醫(yī)學對 UC 尚缺乏較強的針對性的藥物治療,中醫(yī)藥治療 UC 具有一定優(yōu)勢,但目前缺乏系統(tǒng)研究,作用機制不明確。目前普遍認

2、為免疫學異常、感染因素、氧自由基損傷等因素在 UC 的整個病程中起著重要作用。因此本文目的在于科學評價潰結Ⅰ號方治療脾腎陽虛型 UC 大鼠模型的臨床療效,并從免疫學、氧自由基等方面探索潰結Ⅰ號方治療脾腎陽虛型 UC的部分作用機制。
　　目的：通過對 UC 大鼠結腸粘膜損傷指數(shù)(CMDI 分)、UC 大鼠結腸組織中MDA、SOD含量、UC大鼠血清中 IgG、SIgA 含量等療效評價指標進行觀察,評價潰結Ⅰ號方治療脾腎陽虛型 UC

3、的療效并探索其部分作用機制。
　　方法：健康雄性大鼠 90 只,隨機分為 A 組(潰結Ⅰ號方治療組)、B 組(美沙拉嗪治療組)、C組(生理鹽水治療組)、D組(空白對照組)。其中 A、B、C三組各25只大鼠,D組 15只大鼠。免疫復合法建立脾腎陽虛型 UC動物模型成功后后, A組(潰結Ⅰ號方治療組)按 10ml/kg體重給予潰結Ⅰ號方中藥水煎劑灌胃；B組(美沙拉嗪治療組)按 50mg/kg 劑量灌服美沙拉秦緩釋片溶液；C 組(生

4、理鹽水治療組組)按 10ml/kg體重給予生理鹽水灌胃。各組灌胃均每日一次。D組(空白對照組)不予任何干預。治療期間,各組均與常規(guī)飲食,共治療 4周。分兩次采集標本：第一次在造模 4 周完成后,大鼠禁食 24小時,隨機抽取 A、B、C組大鼠 10只,D 組 6 只,取眼球血 2ml,做 SIgA,IgG 檢測,采血后頸椎脫臼法處死,立即開腹截取距肛門約 6-8cm處病變結腸,平均分為兩份,投入到事先準備好的裝有 4%多聚甲醛液的瓶中,

5、4℃低溫保存。其中一份常規(guī)石蠟包埋,切片, HE 染色,光鏡下觀察；另一份做組織勻漿,檢測組織 SOD及 MDA含量。第二次標本采集在治療滿 4周后,記錄大鼠體重,大鼠禁食 24小時,所有大鼠摘眼球取血后處死,開腹取結腸。標本采集方法及處理同第一次。檢測數(shù)據經 SPSS13.0統(tǒng)計軟件分析處理。
　　結果：造模成功后,A、B、C三組大鼠普遍出現(xiàn)進食量減少、體重明顯減輕、大便稀溏、黏液液膿血便或血水樣便、拱背、精神倦怠、反應遲鈍

6、、皮毛疏松無光澤,少數(shù)出現(xiàn)了步態(tài)不穩(wěn)、嗜睡甚至衰竭貌。本階段大鼠共死亡 4 只,D 組大鼠一般狀況良好,二便量及性狀無明顯改變,飲食、活動正常。
　　造模成功后, A、B、C三組大鼠結腸標本 HE染色顯示：粘膜及粘膜下層高度充血、水腫,有潰瘍形成,局部可見壞死,大量嗜酸性細胞、炎性細胞浸潤,腺體中杯狀細胞顯著減少；A、B、C三組大鼠 CMDI分較 D組顯著升高(P<0.01)。
　　造模成功后,各治療組的結腸粘膜損傷

7、指數(shù)(CMDI分)、結腸組織中 MDA、SOD含量、血清中 IgG,SIgA含量與空白對照組比較,差異有顯著意義( P<0.05)。但各治療組間的結腸粘膜損傷指數(shù)(CMDI分)、結腸組織中 MDA、SOD含量、血清中 IgG,SIgA含量無統(tǒng)計學差異；說明各治療組間的發(fā)病程度相似,具有可比性( P>0.05)。
　　治療結束后,A組大鼠大便、活動轉為正常,皮毛恢復光澤,體重明顯增加；B組大鼠大便性狀明顯好轉,活動正常,皮毛光澤

8、,體重增加；C組大便便性狀、進食量、皮毛等無明顯改善,體重進一步下降；D組大鼠一般狀況良好,體重明顯變化。
　　治療結束后,A、B 兩組大鼠結腸粘膜充血水腫消失,糜爛、潰瘍以及壞死基本愈合,殘存潰瘍有明顯修復性改變,炎性細胞浸潤有所緩解,C組無明顯變化；A、B兩組 CMDI評分顯著降低,與 C組比較有顯著差異(P<0.05)。
　　治療結束后,A 組、B組的血清 IgG、SlgA含量顯著減少,與 C組比較有顯著差異(

9、P<0.01)；A 組、B 組大鼠結腸組織中 MDA 含量顯著降低,與 C 組比較有極顯著差異(P<0.01)；A組大鼠結腸組織中 SOD含量明顯提高,與 B、C兩組比較均有顯著差異(P<0.05)。
　　結論：潰結Ⅰ號方能顯著降低血清中 IgG、SlgA含量,可明顯改善腸粘膜超微結構,有效修復 UC大鼠的結腸粘膜；明顯降低結腸組織的丙二醛含量,而且能提高超氧化物歧化酶的活性。揭示潰結Ⅰ號方治療潰瘍性結腸炎的部分機理可能是：提