電針對實(shí)驗(yàn)性腦缺血再灌注大鼠細(xì)胞凋亡及基因表達(dá)的影響.pdf

1、背景資料 “中風(fēng)”即現(xiàn)代醫(yī)學(xué)所稱的急性腦血管病，包括腦出血、腦梗塞、蛛網(wǎng)膜下腔出血等。臨床流行病學(xué)調(diào)查表明急性腦血管病是目前致死率最高的疾病之一。而缺血性中風(fēng)約占75％，且有逐年增加的趨勢。因此預(yù)防和治療缺血性中風(fēng)，降低它的發(fā)病率和致殘率，已成為當(dāng)前迫切需要解決的問題。 腦缺血再灌注損傷是缺血性中風(fēng)的重要病理生理機(jī)制，而缺血再灌注損傷中神經(jīng)元的凋亡扮演了重要角色。細(xì)胞的凋亡是個(gè)可逆的過程。目前，凋亡的詳細(xì)機(jī)制尚未完全清楚

2、，越來越多的證據(jù)表明凋亡主要發(fā)生在缺血的半暗帶區(qū)域，缺血半暗帶區(qū)存在著側(cè)枝循環(huán)，有大量因可以獲得血供而存活的細(xì)胞，而缺血中心區(qū)因?yàn)榭焖俚哪芰縼G失引起細(xì)胞急性壞死，所以半暗帶區(qū)域被認(rèn)為是腦缺血治療的目標(biāo)所在。凋亡的發(fā)生有兩個(gè)重要的調(diào)節(jié)分子家族：一個(gè)是caspascs家族，包括caspase-3；另一個(gè)是bcl-2分子家族，包括bcl-2，bax。當(dāng)bcl-2家族成員引起釋放促凋亡分子從而調(diào)節(jié)死亡信號時(shí)，caspascs始動(dòng)并執(zhí)行細(xì)胞凋亡。

3、 目的 通過電針局灶性腦缺血再灌注大鼠模型，探討caspase-3、bcl-2、bax基因表達(dá)與局灶性腦缺血再灌注后神經(jīng)元凋亡間的關(guān)系，為臨床針灸治療缺血性腦血管病提供確切的理論依據(jù)。 方法 40只健康SD大鼠，分為假手術(shù)對照組、模型對照組、穴位治療組、非穴位對照組，每組10只。采用Zealonga線栓法建立大腦中動(dòng)脈閉塞(MCAO)腦缺血再灌注損傷模型。穴位治療組選取“肩髃”、“外關(guān)”、“髀關(guān)”、“足三

4、里”穴，非穴位對照組取“天泉”與“曲澤”連線中點(diǎn)、“曲澤”與“郄門”連線中點(diǎn)、“足五里”與“陰包”連線中點(diǎn)和膝關(guān)節(jié)與“中都”連線中點(diǎn)共4點(diǎn)進(jìn)行針刺，假手術(shù)組和模型組只固定不針刺。TUNEL(AP)法觀察與測定大腦皮層和海馬凋亡神經(jīng)元，免疫組織化學(xué)方法測定大腦皮層和海馬神經(jīng)元capase-3、bcl-2和bax基因表達(dá)。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，各組均數(shù)比較采用方差分析后最小顯著差(LSD)t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有顯著性意義。

5、結(jié)果 電針能明顯增加MCAO大鼠皮層和海馬bcl-2陽性細(xì)胞數(shù)及bcl-2/bax比值(P<0.05-0.001)；顯著降低MCAO大鼠皮層和海馬的bax陽性細(xì)胞數(shù)、capase-3陽性細(xì)胞數(shù)及TUNEL染色陽性細(xì)胞數(shù)(P<0.05-0.001．)，與模型對照組比較有顯著性差異。與假手術(shù)組比較，MCAO模型對照組大鼠皮層及海馬bcl-2陽性細(xì)胞數(shù)有增多的趨勢(P<0.05-0.001)；皮層與海馬的bax陽性細(xì)胞數(shù)、capase

6、-3陽性細(xì)胞數(shù)和TUNEL染色強(qiáng)陽性的神經(jīng)細(xì)胞顯著增多(P<0.01-0.001)；bcl-2/bax 顯著降低(P<0.05-0.01)。 與非穴位組比較，穴位治療組電針能明顯增加皮層和海馬bcl-2陽性細(xì)胞數(shù)、bcl-2/bax比值(P<0.05-0.001)；顯著降低MCAO大鼠皮層和海馬的bax陽性細(xì)胞數(shù)、capase-3陽性細(xì)胞數(shù)、TUNEL染色陽性細(xì)胞數(shù)(P<0.001)。 結(jié)論 1、電針特定穴位能明