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1、研究目的:觀察根尖生物膜超微結(jié)構(gòu),并對(duì)其細(xì)菌進(jìn)行分離、培養(yǎng)和鑒定,了解根尖生物膜細(xì)菌的種類、組成和來源。 實(shí)驗(yàn)方法:在第一部分實(shí)驗(yàn)中,按納入標(biāo)準(zhǔn)收集慢性根尖周炎患牙6顆作為觀察對(duì)象,其中根尖肉芽腫和慢性根尖膿腫各3顆,另收集1 顆健康活髓牙作為對(duì)照。在掃描電鏡下觀察根尖生物膜的形態(tài)、分布,以及組成根尖生物膜的細(xì)菌及胞外基質(zhì)。在第二部分實(shí)驗(yàn)中,按納入標(biāo)準(zhǔn)收集25顆慢性根尖周炎患牙的根尖生物膜樣本(均通過根尖外科手術(shù)采集),同時(shí)收集
2、其中20顆患牙的根管細(xì)菌樣本。所有樣本均按常規(guī)接種、分離、純化后,根據(jù)耐氧實(shí)驗(yàn)、細(xì)菌和菌落的形態(tài)、菌落的顏色、革蘭染色和生化實(shí)驗(yàn)對(duì)細(xì)菌進(jìn)行鑒定。統(tǒng)計(jì)分析比較根尖生物膜和根管細(xì)菌的檢出率、構(gòu)成比,并對(duì)不同臨床狀態(tài)下的根尖生物膜細(xì)菌檢出進(jìn)行分析。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果:掃描電鏡觀察發(fā)現(xiàn),6個(gè)慢性根尖周炎標(biāo)本中有5個(gè)根尖表面存在根尖生物膜(83.3%)。觀察的樣本中,細(xì)菌以球菌為主,也可見到桿菌、球桿菌、螺旋體及真菌等,這些細(xì)菌沿膠原纖維網(wǎng)分布
3、,成串、成簇,并被胞外基質(zhì)覆蓋、包裹。X片顯示為根尖肉芽腫和根尖膿腫的患牙,其根尖生物膜超微結(jié)構(gòu)未見明顯區(qū)別。對(duì)照牙根尖未見生物膜樣結(jié)構(gòu),僅見大量的牙周膠原纖維網(wǎng)。通過對(duì)根尖生物膜樣本細(xì)菌分離、培養(yǎng)、鑒定結(jié)果發(fā)現(xiàn),25例根尖樣本中23例細(xì)菌培養(yǎng)陽性(92.0%),共檢出細(xì)菌27種。檢出2~4種細(xì)菌的樣本占80.0%。檢出的細(xì)菌中G<'+>菌的檢出率為80.0%,G<'->菌為84.0%,兼性厭氧菌為44.0%,專性厭氧菌為80.0%;其
4、構(gòu)成比分別為54.6%; 45.4%,39.6%和60.4%。細(xì)菌檢出率較高的依次為口腔鏈球菌、產(chǎn)黑色素的G<'->短桿菌、不產(chǎn)黑色素的G<'->短桿菌、放線菌、消化鏈球菌、梭桿菌、嗜血菌、瘡皰丙酸桿菌、小韋榮球菌、二氧化碳嗜纖維菌等。根管樣本細(xì)菌檢出情況與上述根尖樣本基本一致,兩組各項(xiàng)指標(biāo)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(除小韋榮球菌的構(gòu)成比外)。細(xì)菌學(xué)研究發(fā)還現(xiàn),慢性根尖周炎不同病變狀態(tài)以及是否接受過根管治療,其根尖生物膜中主要細(xì)菌檢出無明顯差異。
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