花燭離體培養(yǎng)與快速繁殖技術(shù)研究.pdf

1、雖然國(guó)內(nèi)外花燭離體培養(yǎng)取得了巨大進(jìn)展，但尚存在不足：如尚未歸納出完善、實(shí)用的離體培養(yǎng)操作程序；生產(chǎn)周期長(zhǎng)；對(duì)各種生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的應(yīng)用看法不一致；生產(chǎn)成本高昂；繼代過程中細(xì)菌污染的困擾等問題嚴(yán)重制約著花燭離體培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展。本研究旨在進(jìn)一步探索花燭離體培養(yǎng)的快捷途徑、降低生產(chǎn)成本、減少污染的技術(shù)，為建立完善、實(shí)用的離體培養(yǎng)操作程序提供依據(jù)。 本研究以花燭(Anthurium andfaeanum)材料A1為試驗(yàn)對(duì)象，研究了無菌培養(yǎng)體系

2、的建立、愈傷組織的增殖培養(yǎng)及不定芽的誘導(dǎo)培養(yǎng)、壯苗生根培養(yǎng)、試管苗移栽、低成本快速繁殖等技術(shù)。 研究外植體、基本培養(yǎng)基類型、接種前滅菌處理方法、葉片生理部位、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、光照條件等因素對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)的影響，結(jié)果表明：葉片的誘導(dǎo)率最高，污染率最低；誘導(dǎo)愈傷組織發(fā)生率及發(fā)生速度依次為：1/2MS培養(yǎng)基>Ms>N6>B5>white，幼葉>中齡葉>老葉，近軸端>遠(yuǎn)軸端，不含葉緣葉片>含葉緣葉片；經(jīng)HgCl：滅菌處理的材料污染率較低

3、，生長(zhǎng)勢(shì)最強(qiáng)。愈傷組織在1/2MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.2 mg/L中長(zhǎng)勢(shì)最好；在1/2MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA0.1 mg/L中生長(zhǎng)旺盛，不定芽健壯，可進(jìn)一步生根培養(yǎng)；全面光照不利于愈傷組織形成，12小時(shí)光照下愈傷組織發(fā)生率最高；6mg/L慶大霉素對(duì)花燭試管苗細(xì)菌處理效果最好。 研究繼代次數(shù)、基本培養(yǎng)基、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑等對(duì)愈傷組織的增殖培養(yǎng)及不定芽的誘導(dǎo)培養(yǎng)的影響，結(jié)果表明：前五次繼代培養(yǎng)愈傷組織產(chǎn)生

4、芽的能力較強(qiáng)，不定芽質(zhì)量較好；6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1mg/L誘導(dǎo)不定芽的分化率較高，生長(zhǎng)健壯；Ms是該階段最優(yōu)培養(yǎng)基。 研究植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、基本培養(yǎng)基、蔗糖、活性炭對(duì)于生根培養(yǎng)的影響，結(jié)果表明：細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素在壯苗過程中缺一不可，6-BA0.3mg/L+NAA0.5mg/L對(duì)于壯苗過程最佳；生長(zhǎng)素對(duì)于生根苗的生長(zhǎng)是必需的；1/2Ms培養(yǎng)基、2.0％的蔗糖、1/2MS+NAA0.3rng幾生根效果最佳。研究

5、基質(zhì)、溫度、試管苗質(zhì)量、季節(jié)對(duì)試管苗移栽的影響，結(jié)果表明：花燭苗在泥炭中生長(zhǎng)好，成活率較高；壯苗移栽30d后成活率90％，弱苗只有55％，后來又有陸續(xù)死亡現(xiàn)象；3個(gè)月后，兩種無菌苗株高和最大葉寬差異顯著。簡(jiǎn)單設(shè)施條件下，4—9月份煉苗成活率最高，達(dá)到86％以上；1-3月、10-12月煉苗成活率較低。 研究充分利用自然光、刻傷處理、不同碳源運(yùn)用、瓶外生根法以及不定芽增殖與生根同步進(jìn)行等對(duì)生產(chǎn)成本的影響，結(jié)果表明：晴天利用自然光，僅