TLRs在大鼠骨關(guān)節(jié)炎軟骨中的表達(dá)及降鈣素干預(yù)對其的影響.pdf

1、目的:探討軟骨細(xì)胞內(nèi)Toll樣受體(Toll-like receptors,TLRs)在骨關(guān)節(jié)炎(Osteoarthritis,OA)進(jìn)程中表達(dá)的特點,以及受降鈣素(Calcitonin,CT)干預(yù)后的影響。
　　 方法:將75只SD大鼠隨機分為三組,手術(shù)組與CT干預(yù)組各35只,假手術(shù)組5只。對手術(shù)組與CT干預(yù)組的右膝行前交叉韌帶切斷加內(nèi)側(cè)半月板切除術(shù),左膝作為空白對照,不予手術(shù)。假手術(shù)組的右膝只進(jìn)入關(guān)節(jié)腔,不處理交叉韌帶和半月

2、板。CT干預(yù)組動物于術(shù)后第二天始行CT15IU/kg隔日皮下注射。前兩組大鼠分別于術(shù)后7、10、14、21、28、42及56天處死,每組每次處死5只,假手術(shù)組動物于術(shù)后56天處死并提取標(biāo)本。對標(biāo)本進(jìn)行大體和組織學(xué)切片觀察。另用Real-time PCR法對手術(shù)組和CT干預(yù)組動物雙膝關(guān)節(jié)內(nèi)的軟骨標(biāo)本分別進(jìn)行TLR2、TLR3、TLR4表達(dá)的檢測。
　　 結(jié)果:手術(shù)組大鼠造模7天后可見組織學(xué)變化；10天后大體觀察出現(xiàn)軟骨面暗淡,失去

3、光澤；28天后可見骨贅形成；56天后見軟骨缺損,軟骨下骨外露。Mankin評分由7天的1.0分到28天的6.6分發(fā)展到56天的12.2分,與假手術(shù)組相比有顯著差異。與手術(shù)組相比在同一時間點上,CT干預(yù)組大鼠的滑膜增生較少；軟骨損傷較輕；骨贅形成較小；Mankin評分也較低。手術(shù)組膝關(guān)節(jié)的軟骨細(xì)胞中TLR2的表達(dá)早期增高,晚期明顯受到抑制；TLR3的表達(dá)與病變嚴(yán)重程度呈正相關(guān)性；TLR4表達(dá)增高,但不隨病程發(fā)展而變化。降鈣素干預(yù)后TLR2

4、表達(dá)早期受到抑制,28天后開始增高；TLR3的表達(dá)早期也受到抑制,但隨著病程的進(jìn)展表達(dá)逐漸的升高；TLR4的表達(dá)在早期也同樣受到了抑制。
　　 結(jié)論:采用前交叉韌帶切斷加內(nèi)側(cè)半月板切除術(shù)可以有效的制作大鼠的OA模型:OA病程中,軟骨內(nèi)有TLRs的表達(dá),TLR2先增高后降低；TLR3與病變嚴(yán)重程度呈正相關(guān)性:TLR4高表達(dá)但在病程中無明顯變化。加用降鈣素干預(yù)后,尤其是在早期,可明顯抑制TLRs的表達(dá),OA的癥狀也明顯改善,在OA早