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文檔簡介
1、目的:建立局灶性腦缺血模型,從蛋白質(zhì)整體水平探討腦缺血/再灌注的保護作用機制。 方法:雄性、健康大鼠SD,隨機分為正常組、腦缺血模型組、茅莓總皂苷干預組和尼莫地平干預組。參照Koizumi法并加以改進,建立MCAO大鼠腦缺血2h再灌注24h的模型;裂解液提取總蛋白質(zhì),以雙向電泳技術進行蛋白質(zhì)分離,考馬斯亮藍染色,獲得雙向電泳圖譜,利用專門的軟件篩選出差異蛋白質(zhì),用MALDI-TOF-MS獲得肽指紋圖譜,MS-Fit數(shù)據(jù)庫進行搜索
2、,獲得有關的蛋白質(zhì)信息。 結果: 1、以正常大鼠腦組織為研究對象,在不同的條件下進行2-DE,所分離得到的蛋白質(zhì)點滿足質(zhì)譜分析的要求。 2、局灶性腦缺血模型組與正常組腦組織的比較蛋白質(zhì)組學研究。與模型組比較,從正常組篩選到23個差異表達蛋白斑點,其中13個低表達,10個高表達,鑒定其中6個蛋白質(zhì),發(fā)現(xiàn)白細胞三烯A-4水解酶、促甲狀腺激素釋放激素降解胞外酶等與腦缺血相關的蛋白質(zhì)。 3、局灶性腦缺血模型組與茅
3、莓總皂苷干預組的比較蛋白質(zhì)組學研究。與模型組比較,從茅莓總皂苷干預組從找到了29個差異表達蛋白斑點,其中15個低表達,10個高表達,鑒定其中7個蛋白質(zhì),發(fā)現(xiàn)FNF-α、L,TGF-2等與腦缺血相關的蛋白質(zhì)。 4、局灶性腦缺血模型組與尼莫地平干預組的比較蛋白質(zhì)組學研究。與模型組比較,從尼莫地平干預組找到了25個差異表達蛋白斑點,其中10個低表達,15個高表達,鑒定其中6個蛋白質(zhì),發(fā)現(xiàn)激肽原-1前體、谷氨酸受體4前體等與腦缺血相關的
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