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文檔簡介
1、研究目的:下丘腦是調(diào)節(jié)內(nèi)臟活動的神經(jīng)中樞,也是功能復雜的神經(jīng)內(nèi)分泌中樞。下丘腦參與運動過程中心血管、內(nèi)分泌與免疫等機能的調(diào)節(jié),與運動性疲勞的產(chǎn)生、恢復有重要的聯(lián)系。目前關(guān)于運動與下丘腦的研究主要集中在內(nèi)分泌、神經(jīng)遞質(zhì)與氧化應(yīng)激等方面,而對下丘腦蛋白質(zhì)組的變化極少有人涉及。本研究通過實驗觀察不同負荷運動對大鼠下丘的代謝、超微結(jié)構(gòu)、以及生化指標的影響,應(yīng)用雙向電泳建立運動大鼠下丘腦蛋白質(zhì)表達圖譜,比較分析不同負荷運動大鼠下丘腦蛋白質(zhì)組的差異
2、表達,篩選并鑒定相關(guān)蛋白質(zhì),分析其功能及特點,為深入了解運動對下丘腦的代謝與神經(jīng)內(nèi)分泌等功能的影響及調(diào)控機制提供參考依據(jù)。
研究方法:2月齡雄性SD大鼠40只,體重160—180g。隨機分為3組,對照組、中等強度運動組與大強度運動組,分別進行8周中等強度與大強度運動,顯微鏡觀察下丘腦形態(tài)結(jié)構(gòu)變化,測定CK、血氨、HB、BUN等血液生化指標與下丘腦SOD、MDA、T—AOC自由基代謝指標,應(yīng)用雙向電泳與質(zhì)譜技術(shù)等分析下丘腦蛋
3、白質(zhì)組的差異表達。
研究結(jié)果:(1)運動對大鼠下丘腦神經(jīng)細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)產(chǎn)生影響,中等強度運動組大鼠下丘腦神經(jīng)細胞核變粗,突觸增多,大強度運動組大鼠下丘腦神經(jīng)細胞的間隙增大,細胞核大小變化不均勻,部分神經(jīng)細胞染色異常;(2)不同負荷運動后肌酸激酶活性與血氨濃度升高,尿素生成增多,大強度運動組由于負荷較大,疲勞程度較深,血紅蛋白含量降低;(3)不同負荷運動后大鼠下丘腦氧自由基增多,中等強度運動能使機體的抗氧化系統(tǒng)的能力得到增強,
4、大強度運動組下丘腦的自由基大量產(chǎn)生,抗氧化酶活性受到抑制;(4)通過雙向電泳分離大鼠下丘腦組織蛋白質(zhì),建立不同負荷運動大鼠下丘腦蛋白質(zhì)表達譜,與對照組比較,中等強度運動與大強度運動大鼠下丘腦部分蛋白質(zhì)的表達有顯著差異,(5)通過比較分析與篩選差異顯著的蛋白質(zhì)點,共鑒定出18個差異表達蛋白質(zhì)。它們分別屬于細胞骨架蛋白、熱休克蛋白、抗氧化蛋白、代謝酶、信號傳導蛋白以及1個分子量為59.87kD的未知功能蛋白質(zhì)。
研究結(jié)論:經(jīng)過
5、8周的不同負荷跑臺運動,大鼠血液生化指標、下丘腦神經(jīng)細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)、氧自由基代謝以及蛋白質(zhì)組表達譜發(fā)生了相應(yīng)變化。中等強度運動能夠促進下丘腦的新陳代謝、抗氧化酶活性、信號傳導蛋白的表達,對實現(xiàn)細胞骨架蛋白的重新排列,調(diào)節(jié)機體生理功能產(chǎn)生了良好的促進作用;大強度運動使下丘腦氧化應(yīng)激程度加深,對下丘腦的調(diào)節(jié)功能產(chǎn)生了抑制作用。本研究的結(jié)果顯示,應(yīng)用雙向電泳與質(zhì)譜分析能夠?qū)ふ遗c鑒定差異表達的蛋白質(zhì),為進一步研究運動訓練對下丘腦的代謝與神經(jīng)內(nèi)分
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