糖尿病大鼠微血管通透性與周圍神經(jīng)病變相關(guān)性的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:探討實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠坐骨神經(jīng)微血管通透性變化與周圍神經(jīng)病變的相關(guān)性。
　　方法:將雄性SD大鼠(220±20g)隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組(T組,n=60)和對(duì)照組(N組, n=12)。采用腹腔注射鏈脲菌素( STZ)的方法將實(shí)驗(yàn)組的60只大鼠全部制備成實(shí)驗(yàn)性1型糖尿病大鼠模型。在成模即刻(0w)、成模后2w、4w、8w、12w分別隨機(jī)選取12只大鼠,分別用T0、T2、T4、T8、T12表示,依次通過伊文思蘭灌注在分光光度計(jì)下測(cè)坐骨神經(jīng)

2、組織OD值和熒光顯微鏡下測(cè)其熒光量以及坐骨神經(jīng)的含水量等指標(biāo)來了解坐骨神經(jīng)滋養(yǎng)血管的通透性。對(duì)其坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度進(jìn)行檢測(cè),觀察大鼠成模后不同時(shí)間的病理改變,包括其HE染色及電鏡下的超微結(jié)構(gòu)變化。并對(duì)坐骨神經(jīng)組織含水量與NCV、組織EB含量與NCV進(jìn)行線性相關(guān)分析。用免疫組化的方法檢測(cè)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)在大鼠坐骨神經(jīng)上的表達(dá)。
　　結(jié)果:1.糖尿病大鼠伊文思藍(lán)灌注后,分光光度計(jì)下其坐骨神經(jīng)OD值從4W開始明顯增加(p<0.

3、05);熒光顯微鏡下觀察坐骨神經(jīng)組織的熒光量可見T4、T8、T12的大鼠神經(jīng)外膜血管管壁非常強(qiáng)的紅色熒光,神經(jīng)內(nèi)膜、神經(jīng)束呈現(xiàn)較強(qiáng)的紅色熒光。而與正常對(duì)照組相比,糖尿病大鼠8W、12W始出現(xiàn)坐骨神經(jīng)組織含水量明顯增加。2.與正常對(duì)照組相比,糖尿病組大鼠從2W開始出現(xiàn)坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度( Nerve conduction velocity;NCV)明顯下降(p<0.05)。光鏡下可見,糖尿病大鼠的坐骨神經(jīng)從4w開始出現(xiàn)神經(jīng)纖維的髓鞘變薄、形

4、態(tài)不規(guī)則,軸突染色變淺,并伴有軸索萎縮;電鏡下觀察大鼠坐骨神經(jīng)的變化可見,T4、T8、T12的糖尿病大鼠均出現(xiàn)了有髓神經(jīng)纖維髓鞘板層薄厚不一、分離或脫落,局限增厚,結(jié)構(gòu)疏松,且隨糖尿病病程的推移,坐骨神經(jīng)結(jié)構(gòu)病變逐漸加重。3.通過對(duì)坐骨神經(jīng)組織含水量與 NCV、組織 EB含量與 NCV進(jìn)行線性相關(guān)分析,結(jié)果顯示,在糖尿病的病程中,坐骨神經(jīng)組織含水量與NCV存在負(fù)相關(guān)(r=-0.903);坐骨神經(jīng)組織EB含量與NCV呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0

5、.799)。4. VEGF在各組大鼠坐骨神經(jīng)上的表達(dá)顯示 T2、T4、T8的糖尿病大鼠的坐骨神經(jīng)纖維雪旺氏細(xì)胞、軸突以及髓鞘中表達(dá)呈陽性,血管壁陽性表達(dá)增強(qiáng)。T12糖尿病大鼠的坐骨神經(jīng)纖維雪旺氏細(xì)胞表達(dá)呈陽性,而軸索、髓鞘無表達(dá),血管壁表達(dá)稍弱,這與N組、T0大鼠類似。
　　結(jié)論:1.糖尿病大鼠成模后4周發(fā)生了微血管通透性的改變。2.糖尿病大鼠成模后2周出現(xiàn)坐骨神經(jīng)功能的改變;糖尿病大鼠成模后4周出現(xiàn)坐骨神經(jīng)結(jié)構(gòu)的改變。3.實(shí)驗(yàn)性