惡性腦膠質(zhì)瘤自殺基因治療優(yōu)化方案的初探.pdf

1、天津醫(yī)科大學博士學位論文惡性腦膠質(zhì)瘤自殺基因治療優(yōu)化方案的初探姓名：黃強申請學位級別：博士專業(yè)：神經(jīng)外科學指導教師：浦佩玉2001.5.1天津匠平} 大掌博士茸啦論文天，給藥1 4 天。( 3 ) T G F 組：顱內(nèi)接種C 6 細胞后五天于原位立體定向多點注射A d C M V - T K 4 0 t ll ，兩天后腹腔注射G C V ( 更昔洛韋) ，3 0 m g ／k g ／天，給藥1 4 天。( 4 ) T A 組：顱內(nèi)接種c

2、 6 細胞后五天于原位立體定向多點注射a d C M ' V - T K4 0 u l ，兩天后腹腔注射A C V ( 阿昔洛韋) ，1 0 0 m g ／k g ／天，給藥1 4 天。觀察大鼠的生存期和病理組織學變化，采用M R I 動態(tài)監(jiān)測顱內(nèi)腫瘤的生長。采用T U N E L 法檢測體內(nèi)、外實驗腫瘤細胞或標本的細胞凋亡。原位雜交鑒定轉(zhuǎn)導t l ( 基因的表達。體外實驗結(jié)果；M O I = 1 0 時C 6 細胞的t l 【

3、轉(zhuǎn)導率為5 0 ％；M O I = 1 0 0 時c 6 細胞的t l 【轉(zhuǎn)導率為1 0 0 ％。A d C M V - T K 轉(zhuǎn)導C 6 細胞可使c 6 細胞對G C V ／A C V 的敏感性顯著性提高，M O I = 1 0 時G C V 的t k 轉(zhuǎn)導C 6 細胞D ，。約為野生型c 6 細胞的2 0 倍；M O I = 1 0 0 時，G C V 的t l 【轉(zhuǎn)導c 6 細胞D 。約為野生型c 6 細胞的1 0 0 0 倍。

4、而M O I = 1 0 時A C V 的t l ( 轉(zhuǎn)導c 6 細胞D 。約為野生型C 6 細胞的5 倍，M O I = 1 0 0 時A C V 的t k 轉(zhuǎn)導c 6 細胞D ，。約為野生型c 6 細胞的1 5 0 倍。H S V - T K 轉(zhuǎn)導細胞對G C V 的敏感性明顯高于A C V 。A d C M V - T K 轉(zhuǎn)導的C 6 細胞對G C V ／A C V 的敏感性呈劑量依賴性，時間依賴性及A d C M V - T

5、K 重復感染率依賴性的。體內(nèi)試驗結(jié)果：兩對照組( n - 1 0 ) 中位生存期為1 6 天。T A 組( n = 9 ) 鼠的中位生存期為2 6 天，T G F 組5 ／7 只鼠均生存超過1 2 0 天。另兩只鼠分別于6 4天和8 7 天死于其他原因。經(jīng)l o g r a n k 檢驗：對照組之間生存期無差別( p > o ．0 5 ) ，T G F 組和T A 組與兩個對照組、T G F 組與T A 組生存期之間存在顯著性差別

6、( p < O0 0 1 ) 。M R I 示T G F 組顱內(nèi)腫瘤約于8 周時消失。腺病毒中介的t l d G C V 系統(tǒng)抑瘤效果明顯好于t l d A C V 系統(tǒng)，t l d G C V 系統(tǒng)可獲1 0 0 ％的腫瘤根除率，t k ／A C V 系統(tǒng)也可延長荷瘤鼠的生存期。廣、一1第二部分：腺病毒介導的p 5 3 優(yōu)化惡性膠質(zhì)瘤自殺基因療效的體內(nèi)、外研究j本研究旨在評價以腺病毒介導的p 5 3 對t k ／G C V ／A

7、 C V 自殺基因治療體內(nèi)、外療效的作用。( 體外實驗：以不同重復感染率( M O I ) = 0 ，1 0 ，5 0 ，1 0 0 ，5 0 0 的A d C M V - p 5 3感染鼠C 6 膠質(zhì)瘤細胞；以不同重復感染率( M O I ) = 1 0 ( T P G l ) ，1 0 0 ( T P G 2 )的A d C M V - p 5 3 和M O I = 1 0 0 的A d C M V ．t k 感染C 6 細胞后，加