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1、膽固醇是影響卵母細(xì)胞和胚胎發(fā)育的重要物質(zhì),VLDL是產(chǎn)蛋雞膽固醇的主要載體,影響著卵母細(xì)胞和蛋黃中的膽固醇含量,而HMGCR(3-羥基-3-甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶,HMG-CoA reducase)是膽固醇合成過(guò)程中的限速酶。本試驗(yàn)以眉山溫氏400只青腳麻肉種雞為研究對(duì)象,分析血清VLDL濃度及HMGCR基因多態(tài)性的關(guān)系及其對(duì)繁殖性狀的影響,結(jié)果如下:
試驗(yàn)檢測(cè)了384份血清的VLDL濃度,按濃度大小由低到高分為1~4
2、組(44~200、200~400、400~600、600~720mg/ml血清),各組對(duì)應(yīng)的產(chǎn)蛋量依次為:90.35、105.70、103.65、93.46。其中,第1組與第2組、第3組與第4組的產(chǎn)蛋量差異極顯著(P<0.01),第1組與第4組、第2組與第3組差異不顯著(P>0.05);1、2組血清VLDL濃度與產(chǎn)蛋量呈正相關(guān)(r=0.51,P<0.01),3、4組血清VLDL濃度與產(chǎn)蛋量呈負(fù)相關(guān)(r=-0.41,P<0.01)。而各組
3、的受精蛋孵化率和受精蛋健雛率差異不顯著(P>0.05)。表明中等血清VLDL濃度組(VLDL濃度200~600mg/ml血清)的產(chǎn)蛋量較高。
試驗(yàn)設(shè)計(jì)了6對(duì)引物,采用PCR-SSCP方法,擴(kuò)增了HMGCR基因的部分外顯子和部分內(nèi)含子序列,檢測(cè)到3個(gè)多態(tài)位點(diǎn)。分別為內(nèi)含子1處的SNP1(789bp,G/A)和SNP2(937bp,C/G)、內(nèi)含子4處的SNP3(2316bp,A/C)。3個(gè)位點(diǎn)均為中度多態(tài)(PIC值分別為0.
4、3551、0.3204、0.3749)。
HMGCR基因多態(tài)性與繁殖性狀的關(guān)聯(lián)分析發(fā)現(xiàn):各位點(diǎn)不同基因型在受精蛋孵化率、受精蛋健雛率性狀中的差異不顯著(P>0.05)。在產(chǎn)蛋量性狀中:SNP2中的C、D型差異不顯著(P>0.05);SNP1、SNP3的不同基因型差異極顯著(P<0.01),B型比A型高11.95個(gè)蛋,E型比F型高4.95個(gè)蛋,表明B、E型為高產(chǎn)蛋量的優(yōu)勢(shì)基因型。單倍型分析發(fā)現(xiàn),各單倍型在受精蛋孵化率、受精蛋
5、健雛率性狀中的差異仍然不顯著(P>0.05),在產(chǎn)蛋量性狀中的差異極顯著(P<0.01),最好單倍型為BCE(106.11),最差單倍型為ACE(84.90),相差21.21枚蛋,大于單個(gè)位點(diǎn)變異的差異。
HMGCR基因多態(tài)性與血清VLDL濃度的關(guān)聯(lián)分析發(fā)現(xiàn):各位點(diǎn)的不同基因型差異極顯著(P<0.01)。其中,B、C、E型為低血清VLDL濃度,A、D、F型為高血清VLDL濃度,A_比B_、D_比C_、F_比E_分別高214
6、.07、228.99、73.57(mg/ml血清)。表明3個(gè)SNP位點(diǎn)的變異極顯著地影響血清VLDL濃度。進(jìn)行單倍型分析后發(fā)現(xiàn),各單倍型的差異仍然達(dá)到了極顯著水平(P<0.01),最高單倍型為ADE(502.12),最低單倍型為ACE(184.40),相差317.72(mg/ml血清),大于單個(gè)位點(diǎn)變異的差異。
關(guān)聯(lián)分析結(jié)果表明,單倍型在選擇產(chǎn)蛋量、高低血清VLDL濃度方面比單個(gè)SNP的效率更高。ACE單倍型的產(chǎn)蛋量和血清
7、VLDL濃度都最低,進(jìn)一步表明過(guò)低的血清VLDL濃度明顯降低了產(chǎn)蛋量,所以在肉種雞的肥度性狀中不宜過(guò)度追求低膽固醇。
轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)分析中:SNP1的變異(G→A)造成了一個(gè)Oct-1轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)的增加,同時(shí)也使CdxA轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)的分值增加;其他兩個(gè)SNP沒(méi)有查到有意義的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)的變化。
綜上所訴,中等VLDL濃度(200~600mg/ml血清)可作為提高產(chǎn)蛋量的候選指標(biāo)。HMGCR基因的
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