茄科蔬菜青枯病菌的PCR檢測及遺傳多樣性分析.pdf

1、由青枯雷爾氏菌（Ralstonia solanacearum）引起的青枯病是茄科蔬菜作物上的一種毀滅性土傳病害。由于青枯病菌存在豐富的種內遺傳多樣性和明顯的致病力分化，給該病的準確診斷和防治帶來許多困難，至今尚無有效的解決辦法。因此，開展青枯菌的快速診斷技術研究及其遺傳多樣性研究對于將來的抗病品種選育和綜合防控具有十分重要的理論指導意義。
　　 本研究從海南省各地茄子、番茄、辣椒作物上分離獲得了47個青枯病菌菌株，其中12株為海

2、南省不同地區(qū)的菌株，35株為同一塊田地的青枯病菌株。運用特異性引物Y2/OLI1對分離的青枯病菌株進行了PCR擴增檢測.同時對其中一個菌株的16SrDNA片段進行了序列分析。結果表明，該對引物從茄子、番茄、辣椒作物上分離的青枯病菌株DNA中擴增出了大小約為300bp的特異性片段。 PCR檢測結果與16SrDNA片段的測序結果一致，證實該PCR檢測技術可用作茄科蔬菜青枯病菌的快速準確的檢測手段。運用REPIR-(I)/REP2-(I)、E

3、RICIR/ERIC2和BOXA1R三對通用引物對分離獲得的47個青枯病菌菌株進行了遺傳多樣性分析?；蚪M指紋圖譜分析結果表明，不僅來自不同地區(qū)的菌株呈現(xiàn)很高的遺傳多樣性，而且來自同一田塊的菌株也表現(xiàn)明顯遺傳多樣性。比較三種引物的指紋圖譜，顯示三種引物都具有較豐富的圖譜多態(tài)性。BOXA1R引物相對于其他兩種引物產生的圖譜多態(tài)性更多一點。菌株之間豐富的遺傳多樣性表明該菌田間種群結構復雜多樣，也提示其可能在不利環(huán)境因素的影響下遺傳分化和變異