中國紅花遺傳多樣性的RAPD和種子醇溶蛋白分析.pdf

1、本文借助RAPD和種子醇溶蛋白技術(shù)，研究了來自全國11個(gè)省的20個(gè)紅花品種種間遺傳多樣性，本研究為紅花品種的鑒定、種質(zhì)資源保護(hù)、雜交育種的親本選配和開發(fā)利用提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下：
　　 1、建立了紅花的RAPD反應(yīng)體系和擴(kuò)增程序。PCR反應(yīng)體系：反應(yīng)總體積為25μl包括：10×擴(kuò)增緩沖液2.5μl，MgCl2(25mmol/l)2.0μl，dNTP(l.0mmol/l)0.5μl，引物(10μmol/l)0.5μl，模

2、板(40ng/μl)1μl，Taq酶(2.5U/μl)0.5μl，無菌水18μl;擴(kuò)增程序?yàn)椋?4℃預(yù)變性5min后，94℃變性30S，36℃退火45S，72℃延伸1.5min，共40個(gè)循環(huán)；72℃延伸7min。
　　 2、借助RAPD分子標(biāo)記研究了紅花遺傳多樣性。從200條隨機(jī)引物中篩選出20條能夠擴(kuò)增出清晰而穩(wěn)定條帶的引物，用于擴(kuò)增20個(gè)紅花品種基因組DNA，共擴(kuò)增出209條譜帶，其中多態(tài)性條帶178條，平均多態(tài)性比率為85

3、.17％。遺傳相似系數(shù)在0.218-0.588之間，平均遺傳相似系數(shù)為0.403。在遺傳系數(shù)0.38處將20個(gè)紅花品種分為4個(gè)類群。其中川紅花、陜紅花聚為一類；云紅三號、毫州紅花、延津紅花、延津大紅袍、南陽紅花、盧氏草紅花、義縣紅花、白沙一號、太空一號、杞縣刺紅花聚為一類，其中大多數(shù)為河南道地紅花品種；菏澤短刺、新疆有刺、安國紅花、寧夏紅花、禹城紅花聚為一類；酒泉紅花、白沙二號、新疆無刺聚為另一類。研究結(jié)果表明，紅花不同品種之間的遺傳多

4、樣性與地理分布有一定相關(guān)性，如分布于河南的幾個(gè)紅花品種：延津紅花、延津大紅袍、南陽紅花、盧氏草紅花、杞縣刺紅花聚為一個(gè)分支，表明幾個(gè)品種間親緣關(guān)系較近。
　　 3、利用種子醇溶蛋白技術(shù)對20個(gè)紅花品種進(jìn)行了遺傳多樣性分析。結(jié)果表明：紅花種子醇溶蛋白位點(diǎn)存在豐富的變異類型，共分離出13條遷移率不同的譜帶，每份材料具有8-11條不等，平均10條。河南省內(nèi)遺傳相似系數(shù)變幅為0.615-1.000，平均值0.809，其它省間的平均GS值

5、為0.759，變異范圍為0.385-1.000。當(dāng)GS為0.22時(shí)所有材料可聚為兩個(gè)類群。類群Ⅰ包括陜西、寧夏、甘肅、新疆等地區(qū)的材料共10份，其中菏澤紅花、陜紅花，以及培育品種新疆無刺與其他紅花關(guān)系較遠(yuǎn)。類群Ⅱ中，河南省本地紅花為8種，省外的有來自安徽的白沙一號，白沙二號和來自四川的川紅花。河南7個(gè)紅花品種親緣關(guān)系較近，白沙一號和太空一號在類群Ⅱ中聚為一分支，川紅花單獨(dú)聚為一個(gè)分支。因此，紅花種子醇溶蛋白的遺傳多樣性與地理來源有很大相