蛋白多肽類藥物藥代動(dòng)力學(xué)分析方法研究進(jìn)展

1、蛋白多肽類藥物藥代動(dòng)力學(xué)分析方法研究進(jìn)展蛋白多肽類藥物藥代動(dòng)力學(xué)分析方法研究進(jìn)展作者：張琪王廣基摘要通過查閱近期國內(nèi)外有關(guān)文獻(xiàn)10余篇，綜述了現(xiàn)代分析分析方法在蛋白蛋白多肽多肽類藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究中的應(yīng)用應(yīng)用，重點(diǎn)介紹了生物生物檢定法、同位素標(biāo)記法、免疫學(xué)、色譜色譜等方法的原理、特點(diǎn)、及發(fā)展?fàn)顩r。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)；多肽；藥物動(dòng)力學(xué)；生物檢定法；同位素標(biāo)記法；免疫學(xué)；色譜文章編號(hào)：10058915(2000)02012603The

2、ProgressoftheAnalysisMethodofProteinPolypeptideDrugPharmacokiicsZhangQiWangGuangji(CenterofPharmacokiicsChinaPharmaceuticalUniversityNanjing210009)AbstractAreviewofapplicationofmodernanalysismethodsinstudyingthepharmacok

3、iicsofproteinpolypeptidedrugispresentedwith16references.Thepaperemphasizestheprincipleacteristicprogressofbioassayradioiodinationimmunoassaychromatography.KeyWdsProteinPolypeptidePharmacokiicsBioassayRadioiodinationImmun

4、oassayChromatography在國家確定的發(fā)展高新技術(shù)技術(shù)計(jì)劃中，生物技術(shù)產(chǎn)品一直作為優(yōu)先開發(fā)的領(lǐng)域之一。蛋白多肽類藥物在實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品的產(chǎn)業(yè)化過程中，受到諸多因素的制約，其中藥中藥物動(dòng)力學(xué)的研究面臨著更高的要求。其主要原因是蛋白多肽類藥物的結(jié)構(gòu)特殊、用藥量很小、生物體內(nèi)有大量相似物質(zhì)的干擾，這一切都使得該類藥的分析方法不同于傳統(tǒng)藥物，大大增加了檢測(cè)檢測(cè)的難度。本文就目前進(jìn)行該類藥藥物代謝動(dòng)力學(xué)過程中所使用或發(fā)展中的幾種分析方法做一

5、概述。1蛋白多肽類藥物的分析方法蛋白多肽類藥物的分析方法1.1生物檢定法生物檢定法由于蛋白多肽類藥物多為有生物活性的物質(zhì)且生物活性不僅取決于藥物的一級(jí)結(jié)構(gòu)，1.2.1放射免疫法（放射免疫法（RadioimmunoassaysRIA）該法是被測(cè)藥物（Ag）標(biāo)記藥物（多為125IAg）與抗體（Ab）的競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合反應(yīng)，方法的特異性取決于抗原抗體的親和力及標(biāo)記藥物的純度，與生物檢定法相比，有簡(jiǎn)明，易于控制的優(yōu)點(diǎn)。1.2.2免疫放射定量法（免疫放

6、射定量法（ImmunadiometrecassaysIRMA）該法中被測(cè)藥物依然是Ag，它先與固定相上的Ab形成Ab∶Ag復(fù)合物，再與標(biāo)記抗體125IAb結(jié)合，形成Ab∶Ag∶125IAb夾心狀。由于Ag需有兩個(gè)Ab來識(shí)別，這就大大增加了方法的特異性，是一靈敏而低變異的方法，只是對(duì)標(biāo)記抗體的純度要求很高。1.2.3酶聯(lián)免疫法（酶聯(lián)免疫法（EnzymelinkedimmunosbentassaysELISA）ELISA的原理與IRMA相似

7、，只是第二個(gè)抗體不是用碘標(biāo)，而是用可以與底物發(fā)生顯色反應(yīng)的酶如HRP來標(biāo)記，與上述兩法相比，ELISA具有使用壽命長(zhǎng)，重復(fù)性好，無輻射源的優(yōu)點(diǎn)，并且已有不少實(shí)驗(yàn)證明，它與生物檢定法具有一定的量效關(guān)系［4］及相關(guān)性［5］，提示它可部分地反映藥物的生物活性。免疫學(xué)方法的缺點(diǎn)在于：?它測(cè)定的是蛋白多肽的免疫活性而不是生物活性；?不能同時(shí)測(cè)定代謝物，且具有抗原決定簇的代謝片段可能增加結(jié)果誤差；?不同來源的抗體與相同的蛋白多肽反應(yīng)可能有較大的差別

8、；?還可能受到內(nèi)源物質(zhì)的干擾。但免疫法畢竟是一種迅速，靈敏，適于批處理的方法，已有數(shù)十種蛋白多肽被開發(fā)成能滿足藥物動(dòng)力學(xué)研究的商品藥盒。目前臨床藥動(dòng)學(xué)領(lǐng)域，免疫法已逐漸取代生物檢定法。1.3同位素標(biāo)記示蹤法同位素標(biāo)記示蹤法放射性同位素標(biāo)記技術(shù)是研究蛋白多肽在生物體內(nèi)處置的一種最常用的方法。所使用的同位素有125I，99mTc，3H，14C，35S等，其中125I因比放射性高，半衰期適宜，標(biāo)記制備簡(jiǎn)單而最為常用。標(biāo)記方法有兩種，一是內(nèi)標(biāo)法